靶向 RECQL4基因的 shRNA 慢病毒表达载体的构建及鉴定

目的：构建介导 RECQL4 RNA 干扰的 shRNA 慢病毒表达载体。方法将人工合成的 RECQL4 siR－NA 经 PCR 扩增后与线化的 pLKO．1慢病毒表达载体连接,经测序鉴定后,将 pLKO．1－RECQL4－shRNA 与慢病毒包装质粒共转染入 HEK －293T 细胞,产生慢病毒颗粒并测定病毒滴度。体外感染人结肠癌细胞 RKO 后,实时定量 PCR 和 Western blot 检测 RECQL4 mRNA 和蛋白的沉默效果。设置未加入任何慢病毒表达载体的 RKO 细胞为未感染组,感染 pLKO．1－scramble －shRNA 慢病毒载体为阴性对照组。结果基因测序结果证实成功构建 pL－KO．1－RECQL4－shRNA 慢病毒表达载体。测定包装后的慢病毒颗粒滴度为6.70×107 IU／mL。感染 RKO 细胞后,RECQL4的 mRNA 和蛋白表达量均低于阴性组和未感染组。结论成功构建靶向 RECQL4基因的 shRNA 慢病毒表达载体,可有效抑制人结肠癌 RKO 细胞 RECQL4 mRNA 和蛋白的表达。     

胃癌裸大鼠移植瘤淋巴管内皮细胞的分离培养与鉴定

目的建立一个稳定的大鼠胃癌移植瘤新生淋巴管内皮细胞（LEC）培养体系。方法SGC7901胃癌细胞被接种到4周龄的裸大鼠足垫,瘤周围注射1％的Evans蓝显示淋巴管,显微解剖淋巴管,应用免疫磁珠法分选纯化LEC后在EGM-2培养液中培养,细胞免疫组化法检测IJEc特异性标记物淋巴管内皮透明质酸受体1（LYVE-1）、膜糖蛋白（podoplanin）、血管内皮生长因子受体3（VEGFR-3）的表达,以管腔形成实验判定LEC能否形成淋巴管样结构。结果成功构建裸大鼠胃癌移植瘤动物模型,显微解剖获得瘤周淋巴管。免疫磁珠法分选LEC,其纯度为95％,活细胞数大于70％。免疫组织化学检测表明,LEC表达VEGFR-3、podoplanin和LYVE-1。在Matrigel基质胶上,LEC能形成管腔样结构。结论淋巴管解剖和免疫磁珠法可成功分选胃癌移植瘤新生淋巴管内皮细胞,从而建立一种简便和稳定的LEC培养体系。     

低分子肝素抑制肿瘤转移的研究进展

肿瘤转移是一个复杂的过程,而针对转移治疗一直是研究的热点.低分子肝素通过抑制肝素酶对基底膜的降解、降低血液黏稠度等作用,对肿瘤细胞转移有明显的干预作用.本文就低分子肝素(LMWH)对肿瘤转移过程影响和作用机制做一综述,讨论其抗肿瘤转移的临床应用价值.     

腹腔镜辅助全胃切除术后不同途径早期肠内营养的对比研究

目的：比较空肠造瘘管与鼻空肠营养管在腹腔镜辅助全胃切除术后患者行肠内营养治疗的临床效果。方法选取2010年6月至2016年3月本院收治的腹腔镜辅助全胃切除术后拟行肠内营养治疗的112例患者,根据肠内营养途径的不同分为试验组（空肠造瘘管组55例）和对照组（鼻空肠营养管组57例）,比较两者的手术时间、术后恢复情况、营养状况及并发症发生率。结果试验组的手术时间显著长于对照组[（21．4±4．38）分钟vs．（4．70±1．30）分钟,t＝27．55,P＜0．01];肛门恢复排气时间、排便时间均明显短于对照组（均P＜0．05）;两组术后1周的血红蛋白、淋巴细胞、血清白蛋白均无明显差异（均P＞0．05）;两组并发症发生率中穿刺口疼痛、鼻咽部不适、导管堵塞、肺部感染、导管移位均有显著性差异（均P＜0．05）。结论在腹腔镜辅助全胃切除术后患者中经空肠造瘘管给予肠内营养治疗与经鼻空肠营养管途径相比,术后恢复较快,且不易堵塞、移位及造成误吸,适用于早期并需要较长时间进行肠内营养支持的胃癌术后患者。     

吲哚美辛诱导的胃癌细胞凋亡与Wnt/β-连接蛋白信号通路及其下游凋亡调控蛋白的关系

目的:探讨Wnt/β-连接蛋白(Catenin)信号通路及其下游凋亡调控蛋白Bcl-2和Caspase-3的表达与吲哚美辛引起的胃癌细胞凋亡的关系.方法:用终浓度为50、100、200 μmol/L的吲哚美辛干预SGC7901细胞24 h,并设不加吲哚美辛的对照组.用CCK8法检测细胞增殖活性,用TUNEL法检测涂片中胃癌细胞的凋亡率,用Western blot法检测细胞内β-Catenin、Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达.结果:SGC7901细胞在50 μmol/L的吲哚美辛作用24 h后细胞存活率为(92.71±4.81)％,100和200 μmol/L浓度组的细胞存活率则明显降低.对照组细胞的凋亡率为0,吲哚美辛干预后的细胞的凋亡率明显升高.对照组β-Catenin和Bcl-2蛋白表达最高而Caspase-3表达最低.吲哚美辛干预后β-Catenin和Bcl-2的表达明显降低,Caspase-3表达明显增高,且表现出明显的浓度依赖性.结论:Wnt/β-Catenin信号通路在吲哚美辛引导的SGC7901细胞凋亡过程中发挥重要的作用,其下游调控蛋白Bcl-2、Caspase-3共同参与了这一过程的调控.     

急性胰腺炎患者螺旋型鼻肠营养管放置临床分析

目的 解决急性重症胰腺炎患者实施非永久性肠内营养支持的途径问题。方法 对我院诊治的13例重症胰腺炎患者进行螺旋型鼻空肠营养管留置。结果 空肠置管成功率69.2%,6例营养管24h内到达空肠,3例48h内到达空肠。余4例胃镜辅助下空肠置管成功。导管留置时间为21～52d,平均(34.6±5.2)d。置管、导管留置、经导管实施肠内营养支持过程中所有患者耐受良好,无不适及并发症发生。结论 螺旋型鼻肠营养管是解决急性重症胰腺炎患者非永久性肠内营养支持途径的一种有效措施。     

胃肠道肿瘤患者的营养风险筛查及营养状况评价

目的探讨胃肠道肿瘤患者的营养状况,为营养治疗的选择提供依据。方法选取2010年6月至2011年12月期间中山大学附属第六医院收治的453例胃肠道肿瘤患者作为研究对象,其中胃癌156例,结肠癌117例,直肠癌180例。应用营养风险筛查2002（NRS2002）进行营养风险评分;多频生物电阻抗分析仪测定机体组分;空腹抽血测定白蛋白（Alb）、前白蛋白（PA）、转铁蛋白（Tf）和视黄醇结合蛋白（RBP）4项营养指标以及红细胞（RBC）、血红蛋白（Hb）和红细胞比容（Hct）3项血液指标。结果NRS2002评分结果显示,总评分在3分以上者在胃癌、结肠癌和直肠癌中所占的比例分别为70．5％（110／156）、53．8％（63／117）和46．7％（86／180）,胃癌明显高于结肠癌和直肠癌（／9〈0．05）;营养受损评分1分以上者的比例胃癌高于结肠癌和直肠癌（P〈0．05）;而疾病评分2分以上者的比例却低于结肠癌和直肠癌（P〈O．05）。胃癌患者体质量指数、肥胖度、脂肪含量、脂肪百分数、手臂围度均明显低于结肠癌和直肠癌,而蛋白质百分比、肌肉百分比、手臂肌肉百分数、细胞质量百分数却明显高于结肠癌和直肠癌（P〈0．05）。胃癌和结肠癌患者中Alb、PA、Tf、RBC、Hb及Hct低于正常值的比例均高于直肠癌（P〈0.05）。结论胃癌患者易出现脂肪的丢失．存在营养风险及营养不良的概率高于结肠癌和直肠癌。联合人体组分分析及实验室检查能够更全面地评定胃肠道肿瘤患者的营养状况．与NRS2002评分相结合,可作为营养治疗方案的选择依据。     

转移皮瓣在胸壁静脉输液港港体外露中的应用

目的探讨转移皮瓣治疗胸壁静脉输液港港体外露的有效性。方法回顾性分析8例行转移皮瓣治疗胸壁静脉输液港港体外露患者的临床资料。结果8例行皮瓣转移术患者中原切口距港体上缘中位距离为0.75 cm，其中标准型港体和小药盒型港体比例为5∶3，规范化培训前后比例为3∶1，所有转移皮瓣患者手术切口均Ⅰ期愈合。结论转移皮瓣是治疗胸壁静脉输液港港体外露的有效方法。     

直肠腺癌转移至牙龈1例报告及文献复习

直肠腺癌转移至牙龈非常罕见。本文报道1例81岁女性患者,结肠癌切除2年后出现直肠腺癌,并转移至牙龈。通过组织病理学检查、免疫组织化学染色确诊。口腔转移很少发生,并且通常易被误诊为更常见的良性病变,因此应将其视为鉴别诊断中的一种可能性。完善的临床检查以及多学科诊疗非常必要。