人神经生长因子β基因转染对糖尿病大鼠神经病理性痛的影响

目的 探讨皮下转染重组腺病毒介导的人神经生长因子β(Ad-hNGFβ)基因对糖尿病大鼠神经病理性痛的影响及其可能机制.方法 采用腹腔注射佐脲霉菌素(STZ)75 mg/kg的方法制备大鼠糖尿病模型.健康雄性SD大鼠,体重180～220 g,随机取10只大鼠作为对照组(C组)不制备糖尿病模型;取模型制备成功的大鼠75只随机分为3组(n=25):糖尿病神经病理性痛组(DNP组)、Ad-hNGFβ基因治疗组(NGF组)和Ad-LacZ基因治疗组(LacZ组).NGF组和LacZ组分别于STZ注射后21d且痛阈测定结束后双侧腹股沟皮下脂肪接种1.12×1011 PFU Ad-hNGFβ 10 μl和1.12 x 1011 PFUAd-LacZ 10 μl,C组和DNP组不作任何处理.于STZ注射前(基础状态)、注射后21、35、49 d时测定机械痛阈和热痛阈.于注射后49 d且痛阈测定结束后测定血清hNGFβ浓度和背根神经节降钙素基因相关肽(CGRP)的表达.结果 与基础值和C组比较,DNP组、NGF组和LacZ组STZ注射后机械痛阈和热痛阚均降低.DNP组和LacZ组血清hNGFβ浓度和背根神经节CGRP表达下降,NGF组血清hNGFβ浓度和背根神经节CGRP表达升高(P＜0.05);与DPN组比较,NGF组STZ注射后49 d时热痛阈升高,血清hNGFβ浓度和背根神经节CGRP表达升高(P＜0.01),LacZ组各项指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Ad-hNGFβ基因转染可在一定程度上减轻糖尿病大鼠神经病理性痛,其机制与上调背根神经节CGRP表达有关.     

芬太尼镇痛对严重烧伤患者休克期应激反应和免疫功能的影响

目的 探讨严重烧伤患者休克期芬太尼静脉自控镇痛的安全性、有效性,及其对应激反应和免疫功能的影响.方法 40例严重烧伤患者于伤后24 h内入院,随机分为传统镇痛(CAT)组、静脉输注芬太尼自控镇痛(PCIA)组,每组20例.在积极抗休克的同时,CAT组根据需要肌肉注射哌替啶50 mg和异丙嗪25 mg.PCIA组给予芬太尼镇痛,配方:芬太尼10 μg/mL+氟哌利多50 μg/mL,负荷剂量3 mL,背景输注剂量2 mL/h.对镇痛开始前、后两组患者疼痛程度和镇静状态通过视觉模拟标尺(VAS)进行评分,并观察有无恶心、呕吐、幻觉、呼吸抑制等不良反应;检测镇痛前、后血浆应激激素(ACTH、Cor、E和NE)以及细胞因子(IL-1、IL-6和TNF-α)的浓度.结果 PCIA组镇痛效果明显优于CAT组(P＜0.01).两组均未出现明显的恶心、呕吐、幻觉及呼吸抑制等不良反应;PCIA组镇痛开始后血浆中应激激素及细胞因子的水平大部分明显降低(P＜0.05),与CAT组各时点比较差异均有统计学意义(均P＜0.01).结论 严重烧伤患者采用芬太尼静脉自控镇痛能明显降低机体的应激反应,抑制炎性细胞因子的释放,发挥免疫调节作用.     

七氟烷预防老年全膝关节置换术后下肢深静脉血栓形成的效果

目的 观察七氟烷吸入麻醉预防老年全膝关节置换术(TKA)后下肢深静脉血栓的效果.方法 选取行单侧TKA术的老年患者78例,随机分为七氟烷吸入麻醉组(七氟烷组)和全凭静脉对照组(对照组),每组39例,观察比较两组患者术中一般情况、麻醉前后凝血指标及术后深静脉血栓发生率.结果 两组患者的麻醉与手术时间、术中失血量及术后开始下地活动时间均差异无统计学意义(P>0.05).术后1、7 d,七氟烷组血小板、血浆纤维蛋白原、D-二聚体水平均显著低于对照组(P<0.05),凝血酶原时间与活化部分凝血酶时间均显著高于对照组(P<0.01).七氟烷组术后发生深静脉血栓1例(2.56%),对照组7例(17.95%),两组差异有统计学意义(P<0.05).结论 七氟烷吸入麻醉能有效预防老年患者TKA术后深静脉血栓,值得临床推荐.     

鞘内转染重组腺病毒介导入神经生长因子β基因对神经病理性痛大鼠的镇痛作用

目的评价鞘内转染重组腺病毒介导人神经生长因子β（Ad-hNGFβ）基因对神经病理性痛大鼠的镇痛作用。方法雄性SD大鼠96只,体重200～250 g,随机分为3组（n=32）,假手术组（Ⅰ组）假手术后立即鞘内注射人工脑脊液;Ⅱ组和Ⅲ组制备坐骨神经慢性压迫性损伤（CCI）模型,术后分别立即鞘内注射人工脑脊液或Ad-hNGFβ基因。分别于术前1d（基础值）和转染后4～28 d每4天测定整体行为学评分、机械痛阈和热痛阈;每组分别于转染后4、7、14及28 d各处死8只大鼠,取脊髓组织,每个时点的4个标本用于测定hNGFβ表达（免疫组化方法）,每个时点的另外4个标本用于测定hNGFβ的含量（ELISA法）。结果Ⅲ组脊髓出现hNGFβ表达;Ⅲ组脊髓hNGFβ含量高于Ⅰ组和Ⅱ组（P〈0.01）;与Ⅰ组比较,Ⅱ组和Ⅲ组行为学评分升高,机械痛阈及热痛阈均降低（P〈0.05或0.01）;与Ⅱ组比较,Ⅲ组行为学评分及机械痛阈差异无统计学意义（P〉0.05）,转染后8～24 d热痛阈升高（P〈0.05）。结论CCI诱导的慢性神经病理性痛大鼠鞘内转染Ad-hNGFβ基因后,可在脊髓组织持续、高效表达,且能减轻热痛觉过敏,但对机械痛觉过敏无影响。     

术前急性超容性血液稀释结合控制性降压在严重烧伤患者早期切痂植皮术中的应用

目的观察急性超容量血液稀释(AHH)联合控制性降压(CH)应用于严重烧伤患者早期切痂植皮术后的节约用血效果及安全性。方法将40例Ⅱ～Ⅲ度烧伤面积在35%TBSA以上烧伤患者随机分为2组,每组20例。A组行AHH+CH,患者于切皮前经静脉快速输入6%羟乙基淀粉(20mL/kg,50mL/min),术中用硝酸甘油[0.5～1.0μg/(kg.min)]行控制性降压;B组为对照组,行常规麻醉处置。术中连续监测平均动脉压(MAP)、心率(HR)、脉搏血氧饱和度(SpO2)和中心静脉压(CVP);于稀释前、稀释后、术毕、术后第1天测定:红细胞压积(HCT)、血红蛋白(Hb)、凝血酶原时间(PT)、活化的部分凝血活酶时间(APTT)、动脉血氧分压(PaO2)、二氧化碳分压(PaCO2)和酸碱值(pH)。记录术中失血量、输血量。结果 A组术中失血量、输血量比B组要显著减少(P<0.01),但两组血液动力学、凝血功能,以及组织氧供差异无统计学意义。结论术前急性超容量血液稀释联合控制性降压可明显减少严重烧伤患者早期切痂植皮术中的失血量和异体血输入量,是一种安全有效的临床血液保护方法,值得推广。     

右美托咪定复合丙泊酚和瑞芬太尼靶控输注对老年脑功能区手术患者术中唤醒试验质量的影响

目的评价右美托咪定复合丙泊酚和瑞芬太尼靶控输注对脑功能区手术患者术中唤醒试验质量的影响。方法选取拟行脑功能区手术患者96例,随机分为试验组和对照组,试验组麻醉诱导前10 min,按0.8μg/kg将右美托咪定负荷量静脉输注,0.4μg·kg~(-1)·h~(-1)维持;对照组等时等量生理盐水静脉输注。丙泊酚和瑞芬太尼靶控输注进行麻醉诱导与维持。观察记录两组唤醒前麻醉时间、用药量及唤醒时间,记录不同时刻(包括T1为患者唤醒前30 min,T2为患者唤醒时,T3为患者唤醒后5 min,T4为加深麻醉10 min时)两组平均动脉压(MAP)、心率(HR)、脑电双频谱指数(BIS)值、去甲肾上腺素(NE)和肾上腺素(E)水平变化,同时记录两组唤醒期间不良反应。结果两组唤醒时间、唤醒前麻醉时间和顺阿曲库铵用量比较差异无统计学意义(P0.05);试验组唤醒前丙泊酚和瑞芬太尼用量明显低于对照组(P0.05);T2、T3时刻两组MAP和BIS明显高于T1时刻而HR较T1时刻明显增快(P0.05);试验组T2和T3时刻MAP明显低于对照组(P0.05),T1~T4时刻HR明显减慢(P0.05);T1～T4时刻试验组NE和E浓度明显低于对照组(P0.05);试验组躁动、心动过速、呛咳和血压升高发生率明显低于对照组(P0.05)。结论右美托咪定复合丙泊酚和瑞芬太尼靶控输注对全麻下脑功能区手术唤醒试验中应激反应有较好的抑制作用,同时还能够有效改善唤醒试验质量。     

饮食添加益生元菊粉改善烧伤大鼠肠道菌群紊乱和骨骼肌分解代谢

目的 观察饮食调节肠道菌群能否改善烧伤模型大鼠的骨骼肌分解代谢。方法 100只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为4组：假烧伤组(S组)、30%体表面积Ⅲ度烧伤模型的烧伤组(B组)、烧伤干预组(I组)和干预验证组(V组)(V组抗生素预处理2周后制作烧伤模型),烧伤后I组和V组饮用水中添加菊粉(7 g/L)。记录大鼠每日体重和进食量;取烧伤后第4天的胫骨前肌(tibialis anterior, TA),趾长伸肌(extensor digitorum longus, EDL),腓肠肌(gastrocnemius, GAS),比目鱼肌(soleus, SO)和粪便进行分析。苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色和TUNEL染色观察胫骨前肌形态学改变和细胞凋亡情况;Western blot和RT-PCR检测胫骨前肌的肌肉萎缩盒F蛋白(muscle atrophy F-box, MAFbx)、肌肉环状指蛋白1(muscle ring finger 1,MuRF-1)的蛋白和mRNA的表达情况;对粪便进行宏基因测序建库,得到的数据进行质控和去冗余后,进行物...     

氯胺酮静脉镇痛对严重烧伤患者急性期应激反应的影响

目的探讨氯胺酮静脉镇痛对严重烧伤患者急性期应激反应的影响。方法40例严重烧伤患者于伤后24 h内入院,随机均分为患者自控静脉镇痛组(PCIA组)和对照组(C组)。检测镇痛开始前及开始后1、8、24、48 h的血糖、血浆胰岛素(Ins)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(Cor)、肾上腺素(AD)和去甲肾上腺素(NA)的水平。结果PCIA组镇痛效果明显优于C组(P<0.01);PCIA组镇痛后1~48 h血糖和镇痛后8~48 h血浆应激激素与镇痛前及C组比较明显降低(P<0.05或P<0.01)。两组患者均无恶心、呕吐、幻觉以及呼吸抑制等不良反应。结论小剂量氯胺酮PCIA可有效地降低严重烧伤患者急性期的应激反应。     

人神经生长因子β基因转染对神经病理性痛大鼠脊髓背角致痛物质含量的影响

目的 探讨人神经生长因子β(hNGFβ)基因转染对神经病理性痛大鼠脊髓背角降钙素基因相关肽(CGRP)和P物质(SP)含量的影响.方法 雄性SD大鼠48只,体重200～250 g,随机分为3组(n=16):假手术组(Ⅰ组)假手术后立即鞘内注射人工脑脊液;Ⅱ组和Ⅲ组制备坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)模型,术后分别立即鞘内注射人工脑脊液或重组腺病毒介导入神经生长因子β(Ad-hNGFβ)基因.于术前1 d、转染后28 d内每4天测定热痛阈、机械痛阈及行为学评分.每组分别于转染后4、7、14及28 d各处死4只大鼠,取脊髓组织,采用免疫组织化学法测定SP和CGRP含量.结果 与Ⅰ组比较,Ⅱ组和Ⅲ组行为学评分升高,机械痛阈及热痛阈均降低(P<0.01);与Ⅱ组比较,Ⅲ组行为学评分及机械痛阈差异无统计学意义(P>0.05),转染后8～24 d热痛阈升高(P<0.05).术后Ⅱ组和Ⅲ组术侧脊髓背角SP及CGRP含量明显高于Ⅰ组,术后7～28 dm组术侧脊髓背角SP及CGRP含量明显低于Ⅱ组(P<0.05或0.01).结论 Ad-hNGFβ基因转染可能通过降低脊髓背角SP及CGRP含量减轻神经病理性痛大鼠的热痛觉过敏.     

Ad-hNGFβ转染原代培养的大鼠脊髓星形胶质细胞及其生物活性研究

目的:体外培养新生SD大鼠脊髓星形胶质细胞,观察携带人β神经生长因子基因的重组腺病毒(Ad-hNGFβ)对其存活及毒性作用,为Ad-hNGFβ在体研究打下基础。方法:分离新生SD大鼠的脊髓星形胶质细胞(Astrocyte,Ast),应用DMEM/F-121∶1培养基进行原代培养扩增鉴定。重组Ad-hNGFβ(MOI=25,50,100)转染Ast后,噻唑蓝(MTT)法检测病毒感染滴度与细胞存活的关系。ELISA方法测定培养3,6,9,12,15d时培养上清中hNGFβ的含量;用流式细胞仪对转染细胞进行倍体分析,观察转染Ad-hNGFβ对细胞周期和凋亡的影响;Western blot印迹法测定转染后表达产物的存在形式。结果:从新生SD大鼠的脊髓组织中成功分离培养出星形胶质细胞,GFAP免疫荧光阳性。经MTT法测定,当MOI=25,50,100时试验组的吸光值OD490与对照组比无显著差异,P>0.05。转染Ad-hNGFβ后试验组细胞培养上清中hNGFβ表达量与对照组同期相比有显著差异,P<0.01;且hNGFβ可持续表达至15d。Ad-hNGFβ转染细胞后所表达的活性产物以hNGFβ二聚体的形式存在。流式细胞仪测得细胞增殖指数与对照组比明显升高,P<0.01。结论:Ad-hNGFβ可有效介导hNGFβ基因转染原代培养的脊髓星形胶质细胞,并且成功表达有活性的hNGFβ,增加细胞活性。