神经节苷脂对急性创伤性脊髓损伤大鼠的神经保护作用及机制

目的探讨急性创伤性脊髓损伤大鼠应用神经节苷脂对损伤脊髓的影响及可能机制。方法 SD雄性大鼠90只随机分为假手术组、模型组、神经节苷脂组各30只。模型组和神经节苷脂组制备急性创伤性脊髓损伤模型,假手术组仅暴露脊柱。神经节苷脂组在脊髓损伤前30min腹腔注射神经节苷脂0.5mg/250g,1次/d,连续7d;假手术组和模型组腹腔注射等体积生理盐水。观察3组自主排尿、排便时间;分别于术前1d及术后1、3、7d行Basso-BeasttieBresnahan(BBB)评分、斜板抓力试验,术后7d行足底印试验检测大鼠运动功能;术后7d每组处死4只大鼠行尼氏染色观察脊髓神经元的形态改变情况,采用ELISA法检测脊髓肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达,Western blot法检测脊髓凋亡蛋白caspase-3表达。结果模型组与神经节苷脂组术后出现双下肢瘫痪,不能自主排尿、排便,模型组术后7d可自主排尿、排便,神经节苷脂组术后3d可自主排尿、排便;模型组术后1、3、7d时BBB评分[(0.60±0.27)、(2.60±0.57)、(7.40±2.07)分],斜板试验角度[(24.00±2.09)°、(34.00±2.09)°、(48.00±2.85)°]均低于假手术组[(19.80±1.09)分、(66.00±2.09)°](P0.05);神经节苷脂组术后3、7d时BBB评分[(5.60±0.67)、(15.40±2.30)分]、斜板试验角度[(41.00±2.09)°、(63.00±2.85)°]均高于模型组(P0.05);模型组术后7d有不协调的脚趾拖动,神经节苷脂组术后7d后肢行走协调,少有脚趾拖动;假手术组尼氏染色脊髓神经元细胞体饱满,尼氏体分布均匀;模型组脊髓中可见空洞形成,胞体消失,尼氏体模糊;神经节苷脂组脊髓神经元多数胞体清晰,尼氏体显示较均匀;术后7d,模型组、神经节苷脂组脊髓组织TNF-α(43.20±3.30、22.40±2.35)、caspase-3(3.26±0.47、1.88±0.13)相对表达量均高于假手术组(7.28±0.84、1.08±0.06)(P0.05),且模型组高于神经节苷脂组(P0.05)。结论神经节苷脂对急性创伤性脊髓损伤大鼠损伤脊髓有保护作用,其机制可能与减少细胞凋亡相关。     

组织工程关节软骨梯度仿生支架的研究进展

由于良好的机械性能和生物相容性,组织工程支架已经成为修复和再生关节软骨缺损的重要方法。随着组织工程技术的不断发展,过去十年已经开发和测试了许多支架的制备和形成方法,但是理想再生支架的制备一直存在争议。关节软骨作为人体关节内的承重组织,其基质结构和细胞组成呈带状,并且从软骨表层至软骨下骨存在着几个平滑的自然梯度,包括细胞表型和数量、特异性的生长因子、基质的组成、纤维的排列、力学性能、营养和氧气的消耗量等均有较为明显的不同。因此,在再生支架的设计中有必要通过重现这些梯度来原位再生关节软骨。最近的文献报道已经有许多新型的梯度仿生支架用于模拟天然关节软骨的自然梯度,这些支架在结构上呈现出不同的机械、物理、化学或者生物梯度,并且取得了不错的修复效果。通过检索关于梯度支架治疗关节软骨缺损的相关文献,首先对天然关节软骨组织的结构、生物化学、生物力学、营养代谢等梯度特性进行研究和总结,然后对目前关节软骨梯度支架的最新设计和构建进行了归类,其次从材料构成(如水凝胶、纳米材料等)以及制备工艺(如静电纺丝、3D打印等)进一步加深对梯度支架的认识,最后讨论了梯度仿生支架在软骨原位组织工程技术中的前景和挑战,为梯度支架成功用于临床转化提供理论基础。     

单侧全膝关节置换术后下肢肌间静脉血栓形成因素分析及预防

目的:调查单侧人工全膝关节置换术（TKA）后肌间静脉血栓形成（MCVT）的相关危险因素及预防。方法:回顾性分析2018年1月至2020年10月期间郑州大学第一附属医院骨科收治的551例患者资料。男187例,女364例;年龄32~90岁,平均64.6岁;左膝234例,右膝317例。根据术后第7天是否出现下肢MCVT将其分...     

原代滑膜细胞培养及同时提取微量总RNA和蛋白质的方法在体外细胞分子生物学研究中的应用

目的:建立从少量原代培养滑膜细胞中同时提取微量总RNA和总蛋白质的方法.方法:向5×105原代成纤维样滑膜细胞(FLS)中加入0.3 ml的TRIzolTM试剂经过改良抽提总RNA;同时将抽提总RNA剩下的中下两相,用异丙醇-盐酸胍-无水乙醇抽提蛋白质.另外将FLS细胞标本分别采用经典的异硫氰酸胍-苯酚-氯仿一步法(A...