腹腔镜腹股沟疝修补术后血清肿的危险因素及防治

目的:探讨腹腔镜腹股沟疝修补术后血清肿的危险因素、预防及处理措施。方法:回顾分析2017年7月至2018年7月为91例腹股沟疝患者行腹腔镜疝修补术的临床资料,其中10例并发血清肿。对于患者年龄、性别、病程、疝囊大小、疝类型、手术方式、血红蛋白、白蛋白、术前合并症、手术时间与术后血清肿的相关性,进行单因素及多因素logistic回归分析。结果:单因素分析结果显示,血清肿组年龄(t=-2.172,P=0.032)大于无血清肿组,手术时间长于无血清肿组(t=-2.695,P=0.023);病程≥5年的患者血清肿发病率高于病程<5年者(χ~2=13.239,P<0.001);疝囊直径≥5 cm的患者血清肿发生率高于疝囊直径<5 cm者(χ~2=10.214,P=0.001)。多因素logistic回归分析结果显示手术时间、病程≥5年、疝囊直径≥5 cm是发生血清肿的独立危险因素。结论:手术时间、病程、疝囊大小是腹腔镜腹股沟疝修补术后发生血清肿的独立危险因素,个体化治疗、精准解剖与合理选择补片可降低血清肿发生率。     

个体化原则在胃癌合并门静脉高压症治疗中的应用

目的:探讨个体化原则在胃癌合并门静脉高压症(portal hypertension,PHT)患者手术方式选择和围手术期处理中的应用。方法:对18例应用个体化原则治疗的胃癌合并PHT患者临床资料进行回顾性分析,其中行D2根治手术17例,姑息性切除1例;同时行脾切除加贲门周围血管离断术6例,脾切除术8例。结果:16例出现不同程度腹水,2例发生腹腔内出血,1例并发腹腔脓肿,1例并发切口感染,1例发生切口裂开,经积极治疗后均痊愈。结论:胃癌合并PHT手术复杂、根治困难、术后并发症多,但遵循个体化原则选择手术方式和围手术期治疗,同时处理两种疾病是可行的。     

TAT-N24穿膜融合多肽对前列腺癌细胞增殖的影响

目的 观察TAT-N24穿膜融合多肽抑制前列癌细胞增殖的作用. 方法 用纯化的TAT-N24穿膜融合多肽处理前列癌PC3细胞,采用流式细胞仪检测细胞周期进程的改变, BrdU掺入法检测其对细胞DNA合成的影响,Western blot法检测细胞内AKT蛋白的磷酸水平的变化. 结果 ①细胞周期分布:空白组G₀/G₁期(56.9±6.1)%,S期(27.0±2.3)%,G₂/M期(16.1±1.3)%;对照多肽组G₀/G₁期(57.9±4.8)%,S期(24.2±3.1)%,G₂/M期(27.8±1.4)%;TAT-N24组G0/G1期(68.6±5.4)%(P<0.05),S期(19.4±1.5)%(P<0.05),G₂/M期(12.3±1.4)%.②BrdU阳性细胞为空白组(37.9±3.2)%,对照多肽组(36.2±4.1)%,TAT-N24组(21.5±2.4)% (P<0.05) ;③AKT磷酸化水平组间差异无统计学意义. 结论 TAT-N24穿膜融合多肽能有效阻滞前列腺癌PC3细胞的细胞周期进程,并抑制其DNA合成.TAT-N24穿膜融合多肽有望成为有效的治疗前列腺癌的分子靶向药物.     

联合检测LDHA和PD-L1在晚期胃癌PD-1抑制剂疗效预测及预后评估中的价值

背景与目的：胃癌对程序性死亡[蛋白]-1(programmed death-1,PD-1)抑制剂的应答率较低，建立有用的疗效预测方法筛选胃癌PD-1抑制剂治疗优势人群对改善患者预后有重要意义。本研究旨在探讨联合检测乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase,LDHA)和程序性死亡[蛋白]配体-1(programmed death ligand-1,PD-L1)表达对接受PD-1抑制剂治疗胃癌患者的疗效预测和预后评估价值。方法：回顾性分析皖南医学院第一附属医院2020年1月—2022年3月接受PD-1抑制剂治疗的50例晚期胃癌患者的临床病理学资料，采用多因素logistic回归分析影响胃癌PD-1抑制剂疗效的独立危险因素，利用受试者工作特征（receiver operating characteristic,ROC）曲线分析联合检测LDHA和PD-L1对胃癌PD-1抑制剂疗效的预测价值，应用Kaplan-Meier法对患者进行生存分析。结果：LDHA低表达组和高表达组胃癌患者的客观缓解率（objective response rate,ORR）分别为59%和10%，疾病控制...     

CircPCSK5在胃癌中高表达并促进胃癌细胞的增殖、侵袭和上皮间质转化

目的 探讨circPCSK5在胃癌中的表达情况和对胃癌细胞增殖、侵袭和上皮间质转化的影响。方法 通过高通量测序构建胃癌组织和癌旁正常胃粘膜组织的circRNA差异表达谱。选取在皖南医学院第一附属医院行胃癌根治术的患者共62例作为研究对象,利用RT-qPCR检测circPCSK5在胃癌组织和细胞系中的表达情况。采用χ2检验分析circPCSK5表达水平与胃癌临床病理资料相关性,利用Kaplan?Meier法绘制患者的总生存和无病生存曲线,Cox比例风险回归模型分析影响胃癌患者预后的独立危险因素。通过RNase R和actinomycin D实验检测circPCSK5的稳定性。利用荧光原位杂交和细胞核质分离实验检测circPCSK5的亚细胞定位。通过CCK-8和EdU实验检测circPCSK5对胃癌细胞增殖能力的影响,通过transwell实验检测circPCSK5对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响。利用Western blot和RT-qPCR检测敲低或过表达circPCSK5后胃癌细胞上皮-间质转化标记物的表达变化。结果 在胃癌组织和细胞中,circPCSK5的表达明显升高（P<0.001,P<0.01）。CircPCSK5表达水平与患者的肿瘤大小、脉管侵犯、淋巴结转移和AJCC分期存在明显正相关性（P<0.05）。CircPCSK5高表达患者的总生存和无病生存时间明显低于circPCSK5低表达患者（P<0.001）,且circPCSK5高表达是影响胃癌患者预后的独立危险因素（P<0.05）。敲低circPCSK5表达能明显抑制HGC27细胞的增殖、迁移和侵袭能力（P<0.01）,并导致上皮间质转化标记物E-cadherin表达升高,N-cadherin和Vimentin表达降低（P<0.01）。过表达circPCSK5能促进MKN45细胞的增殖、迁移和侵袭能力（P<0.01）,降低E-cadherin表达,升高N-cadherin和Vimentin表达（P<0.01）。结论 CircPCSK5在胃癌中高表达,并能促进胃癌细胞的增殖、侵袭和上皮间质转化,可作为胃癌预后预测指标和潜在的分子治疗靶点。     

磷脂酰肌醇3-激酶调节亚基p55PIK表达载体的构建及单克隆株的筛选

目的 构建表达载体pEGFP-N1-p55PIK,在人胚胎肾细胞株HEK293中筛选其稳定表达的细胞株.方法 PCR扩增p55PIK基因全长,经过Xho1和Xma1酶切、T4 DNA连接酶连接、DH5α转化,酶切和测序鉴定以确定构建质粒正确.转染人胚胎肾细胞株HEK293,G418筛选稳定表达p55PIK的单克隆细胞株,应用Western blot方法检测p55PIK蛋白的表达.结果 pEGFP-N1-p55PIK质粒经PCR、酶切、测序鉴定正确,经过G418筛选后获得稳定细胞株,在荧光显微镜下可观察到绿色荧光蛋白在HEK293细胞中的表达,Western blot检测结果显示稳定转染pEGFP-N1-p55PIK的细胞中p55PIK表达水平增高.结论 正确构建表达载体pEGFP-N1-p55PIK,并在HEK293细胞中成功筛选出稳定表达p55PIK的细胞株,为进一步探讨p55PIK的功能提供了良好的工具.     

良性对称性脂肪过多症1例并文献复习

良性对称性脂肪过多症（ benign symmetric lipoma-tosis，BSL），又称为Madelung病（Madelung′s desease）、多发性对称性脂肪堆积症（ multiple symmetric lipomato-sis，MSL）或Lanois-Bensaude综合征，是一种少见的以大量无包膜团块呈对称性积聚在颈项部或肢体近端皮下组织内为主要特征的良性疾病。此病发病较为少见，现报道我院诊治的1例病例，并复习相关文献进行讨论。
　　良性对称性脂肪过多症（ benign symmetric lipoma-tosis，BSL），又称为Madelung病（Madelung′s desease）、多发性对称性脂肪堆积症（ multiple symmetric lipomato-sis，MSL）或Lanois-Bensaude综合征，是一种少见的以大量无包膜团块呈对称性积聚在颈项部或肢体近端皮下组织内为主要特征的良性疾病。此病发病较为少见，现报道我院诊治的1例病例，并复习相关文献进行讨论。     

CircSMARCA5通过miR-4295/PTEN轴调控糖酵解抑制胃癌细胞增殖和侵袭

背景与目的:胃癌是常见的消化系统恶性肿瘤.作者既往研究发现circSMARCA5在胃癌中表达降低并能够抑制胃癌进展,但其具体机制目前仍不清楚.本研究探究circSMARCA5抑制胃癌细胞增殖和侵袭的分子机制.方法:采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)和transwell实验检测过...     

四环素诱导可控表达细胞周期素B1单克隆的筛选

目的 筛选四环素诱导细胞周期素B1(Cyclin B1)可控表达的293单克隆细胞株(tetracycline-regulated expression 293 cells,T-RExTM-293).方法 从人胎肝cDNA文库中PCR带有酶切位点的Cyclin B1基因全长,将其酶切后插入到pcDNA4/TO/myc-HisB载体中.然后用测序正确的质粒转染T-RExTM-293细胞,加杀稻瘟菌素(Blasticidin)和腐草霉素(Zeocin)双药物筛选两周后,传96孔板,等单个细胞扩增出单克隆.然后用Western印迹和流式细胞仪检测Cyclin B1的诱导表达情况.结果 构建好的pcDNA4/TO/myc-HisB-Cyclin B1载体,经鉴定序列正确.筛选出的单克隆细胞株,在未加四环素时没有外源性的Cyclin B1表达,在加入四环素后,3 h就有表达,随时间的增加,Cyclin B1表达量也增加,48 h最多.结论 筛选出的T-RExTM-293单克隆细胞株能可控表达Cyclin B1.