PTEN-PI3K/AKT信号传导途径对胃癌细胞株MKN28凋亡的影响

目的 探讨PTEN-PI3 K/AKT信号传导途径对胃癌细胞株MKN28凋亡的调控作用及其机制.方法 构建PTEN真核表达载体,转染至胃癌细胞株MKN28中(转染组);同样方法转染空载体和等量的PBS分别作为阴性对照组和空白对照组,检测对胃癌细胞株MKN28凋亡的影响及对PI3K、AKT、Caspase-3、Caspase-9的影响.MTT检测细胞生长曲线,TUNEL染色法检测细胞凋亡,Western blot检测蛋白的表达.PI3K抑制剂LY294002处理未转染PTEN的胃癌细胞株MKN28(处理组);对照组加入等量的PBS,抑制PI3K活性后检测细胞凋亡蛋白及凋亡相关蛋白的表达.组间比较采用t检验,时间依赖性检验采用相关分析方法.结果 成功构建PTEN真核表达质粒并转染至胃癌细胞株MKN28中,获得稳定过表达PTEN的细胞模型.MTT检测发现转染组胃癌细胞株MKN28生长明显受到抑制,且呈时间依赖性(r =0.938,P＜0.05).转染组平均凋亡率达到27.86％ ±4.78％,明显高于阴性对照组的0.01％±0.01％(t=9.527,P＜0.05).转染PTEN后,转染组PI3K蛋白表达量为0.25±0.03,明显低于空白对照组的0.93 ±0.16及阴性对照组的0.96±0.15(t=7.235,8.883,P＜0.05).转染组活化的AKT (P-AKT)蛋白表达量为0.21±0.03,明显低于空白对照组的0.93 ±0.13及阴性对照组的0.91±0.12(t =9.347,9.802,P＜0.05).而转染组凋亡相关蛋白Caspase-3及Caspase-9表达量分别为0.86±0.11和0.87±0.12,明显高于阴性对照组的0.16±0.03和0.18 ±0.04及空白对照组的0.15±0.02和0.16 ±0.03(t=10.634,10.999,9.448,9.942,P＜0.05).抑制PI3K活性后,处理组细胞凋亡率为28.60％ ±4.50％,明显高于对照组的0.12％±0.06％(t=10.961,P＜0.05).Western blot检测发现处理组PI3K和P-AKT的蛋白表达量分别为0.18 ±0.02和0.11 ±0.01,明显低于对照组的0.93 ±0.14和0.90 ±0.12(t =9.186,11.363,P＜0.05);同时处理组PTEN的蛋白相对表达量为1.15 ±0.15,明显高于对照组的0.21±0.08(t =9.577,P＜0.05).处理组的凋亡相关蛋白Caspase-3及Caspase-9相对表达量分别为0.86 ±0.12和0.88 ±0.11,明显高于对照组的0.25±0.02和0.21±0.03(t =8.685,10.178,P＜0.05).结论 高表达PTEN可以抑制PI3K/AKT途径,促进胃癌细胞凋亡;抑制PI3K途径可以促进PTEN的表达,两者之间相互作用,共同调控着胃癌细胞的凋亡.     

TaqMan PCR反应在EGFR基因突变检测中的应用

目的 研究一种快速、敏感、高通量的方法来检测非小细胞肺癌患者是否存在EGFR基因突变,以指导吉非替尼的分子靶向治疗.方法 收集94例非小细胞肺癌标本,先做EGFR基因测序,序列比对,然后用TaqMan PCR反应检测EGFR基因突变.比较两种检测结果的一致性.结果 94例患者中93例应用TaqMan PCR反应的检测结果和直接基因测序的结果完全一致,1例患者经直接测序,没有探测到EGFR基因突变,而利用TaqMan PCR反应却检测到了一种突变.该患者对吉非替尼化疗敏感.结论 应用TaqMan PCR反应检测EGFR基因突变是一种快速、敏感、高效的方法,对于判断非小细胞肺癌的患者是否要用吉非替尼有重要的指导价值.     

抑制肿瘤干细胞生长的策略研究

肿瘤干细胞假说认为,肿瘤的复发和转移与肿瘤干细胞残存有密切关系。近几年的研究发现,肿瘤干细胞高表达ABC转运蛋白、抗凋亡基因高水平表达、端粒酶活性高、DNA修复能力增强,因而对放化疗不敏感,容易导致肿瘤的复发和转移。抑制肿瘤干细胞生长的微环境、抑制ABC转运蛋白的活性、阻断信号转导、导入溶瘤病毒、抑制端粒酶活性等方法抑制肿瘤干细胞将为肿瘤的临床治疗提供新的策略。     

肿瘤间质与恶性肿瘤的治疗进展

目前,临床抗肿瘤的治疗更多着眼于对肿瘤细胞的抑制和杀伤,而对肿瘤间质干预的关注不多.现已证实,肿瘤间质与肿瘤细胞间具有密切的相互作用,不仅参与肿瘤的发生、发展、侵袭及转移过程,还可影响肿瘤细胞对放射治疗及抗肿瘤药物的敏感性,影响抗肿瘤治疗的疗效.肿瘤间质可直接或间接影响肿瘤的发生发展过程,机制复杂.有效干预肿瘤间质可提高抗肿瘤治疗效果.本文就肿瘤间质成分及以肿瘤间质为靶点的抗肿瘤治疗的相关研究进展进行综述.     

细胞因子与肿瘤免疫检查点抑制剂治疗相关不良事件关系及临床价值的研究进展

免疫检查点抑制剂(ICI)的应用显著提高了不同类型恶性肿瘤的疗效, 但其引起的免疫治疗相关不良事件(irAE)涉及多个器官和系统, 影响治疗, 威胁患者健康, 甚至危及生命。因此, 需要选择生物标志物来预测、监测irAE的发生, 帮助高风险患者早期诊断, 指导个体化治疗。研究表明, 某些细胞因子参与了irAE的发生、发展。文章就细胞因子与irAE的相关研究进行综述, 为临床预测和监测irAE提供参考。     

代谢组学在恶性肿瘤研究中的应用进展

摘 要：代谢组学是一种系统性研究生物体内代谢物质组成和变化规律的高通量技术，以探究代谢物在生物体内的作用和调控机制。代谢重编程是恶性肿瘤的重要特征之一。在肿瘤的发生和进展过程中，生物体内代谢谱会发生变化。近年来，代谢组学技术已在恶性肿瘤研究中得到广泛应用，包括肿瘤筛查、早期诊断、疗效预测、预后评估和新药靶点研发等。全文总结代谢组学在恶性肿瘤研究进展，揭示代谢组学技术在临床应用中的潜在价值。     

细胞外基质复合温敏性水凝胶与膀胱上皮细胞的生物相容性

目的检验细胞外基质／温敏性水凝胶（ECM/TSH）复合支架材料与膀胱上皮细胞（UC）的生物相容性,探索其作为泌尿道组织工程支架的可行性。方法实验分为A、B、Ci组,A组为ECM／TSH复合支架种植UC组;B组为单纯ECM种植UC组;C组为单纯培养UC组,另设无细胞培养液为空白组（D组）。应用角蛋白免疫荧光染色技术鉴定细胞．应用倒置相差显微镜和扫捕电镜观察细胞的黏附和生长情况．利用MTT法检测细胞的活力。结果光镜下ECM／TSH复合支架为红染的网状结构,纤维较粗,网孔较小,未见到细胞碎片;种植UC后4h可见细胞紧密黏附于材料表面;14h可见细胞沿支架纤维伸展;3d时可见黏附于材料的细胞增多、增殖明显;扫描电镜下,可见发育良好的细胞伪足沿纤维伸展,附着牢固,细胞间连接紧密,胞膜表面有ECM分泌。MTT法示各组间细胞相对增殖率差异有统计学意义（P〈0．05）。结论ECM／TSH复合材料具有便于细胞黏附和生长的微孔结构,生物相容性好．无细胞毒性,是一种理想的组织工程材料。     

锯齿棕与大荨麻提取物联合治疗下尿道综合征的有效性和安全性

良性前列腺增生（BPH）为临床常见病，该病往往引起梗阻性和刺激性的下尿道综合征（LUTS），如排尿不尽、夜尿增多、尿频等。在欧洲，植物提取物在治疗BPH中的地位越来越受到关注，其中研究较多的有锯齿棕Sabal serrulata（或Serenoa repens）浆果与大荨麻Urtica dioica根的提取物。前者已被证实具有抑制5α-还原酶的活性，而后者则被认为与抑制前列腺细胞膜上的Na^＋，K^＋-ATPase活性有关。     

肿瘤免疫治疗不容忽视的微环境：癌相关成纤维细胞

摘 要：癌相关成纤维细胞（cancer associated fibroblasts,CAF）,肿瘤微环境中宿主细胞主要成分,除具有直接促瘤作用外,还可通过抑制T细胞功能、促进免疫抑制细胞功能、调节胞外基质结构参与肿瘤免疫抑制微环境的形成。抑制CAF功能和以CAF为靶点的抗肿瘤微环境治疗为免疫治疗提供新的辅助手段。     

栀子糖蛋白具有氧自由基清除活性并抑制氧自由基诱导产生的蛋白激酶Cα及NF—κB

关于栀子Gardenia jasminoides Ellis糖蛋白的分离方法及其细胞生物学功能鲜有报道。作者研究了栀子糖蛋白对多种氧自由基的清除活性，同时还通过对葡萄糖／葡萄糖氧化酶（G／GO）或次黄嘌呤／黄嘌呤氧化酶（HX／XO）系统诱导的NTH／3T3细胞蛋白激酶Ca（PKCa）和NF—κB活性的抑制作用，研究了其是否具有抗细胞凋亡的作用。