PLC/PIP2信号通路在辐射诱导NRP1+Treg 细胞中的作用机制

目的 观察X射线照射后小鼠胸腺细胞中CD4+ CD25+ NRP1+ Treg细胞数量及TGF-β1分泌量的变化,并探索PLC/ PIP2信号通路在其中的作用机制.方法 36只ICR小鼠按随机数字表法分为假照组、0.5、1.0、2.0、4.0和6.0 Gy的不同剂量组,X射线深部治疗机进行全身照射,于照射后16 h应用流式细胞仪分析小鼠胸腺细胞中CD4+ CD25+ NRP1+ Treg细胞的变化,ELISA法检测胸腺细胞TGF-β1含量的变化.EL-4细胞株经PKC激动剂(PMA)、Ca2+阻断剂(TMB-8)作用2h后并经4 GyX射线照射,于照射后48 h应用流式细胞术及ELISA法分别检测CD4+CD25+ NRP1+ Treg细胞及TGF-β1含量的变化.结果 小鼠胸腺细胞中NRP1+ Treg在0.5 GyX射线作用后稍有下降,于1.0 Gy降至最低(t=6.96,P＜0.01),而后呈剂量依赖性升高,于6.0 Gy升至最高(t =6.70,P＜0.01);胸腺细胞TGF-β1在0.5 GyX射线照射后显著下降(t=12.53,P＜0.01),而1.0～4.0 Gy照射后则呈剂量依赖性升高,于6.0 Gy仍保持高水平(t=10.40 ～ 15.30,P＜0.01).PMA作用后,与假照组相比,单独PMA组NRP1+ Treg细胞表达显著降低(t=3.06,P＜0.01),而联合照射后表达则明显上调(t=8.27,P＜0.01),TGF-β1无论受照与否,其含量均明显降低(t=10.46 ～39.69,P＜0.01);而TMB-8作用后,无论受照与否CD4+ CD25+ NRP1+ Treg的表达及TGF-β1的分泌量均显著上调(t=5.53～44.26,P＜0.01).结论 高剂量电离辐射可以诱导小鼠胸腺细胞中NRP1+ Treg细胞表达并增加TGF-β1的含量,此现象可能与启动PLC/PIP2信号通路有关.     

不同剂量X射线诱导体内及体外小鼠巨噬细胞CD14的剂量效应关系

目的：观察不同剂量X射线照射在体内及体外对小鼠巨噬细胞CD14表达的影响。方法：采用流式细胞术检测巨噬细胞表面CD14阳性细胞数。体内实验选择16 h、体外实验选择4 h,低剂量为0.05～0.20 Gy、高剂量为0.5～6.0 Gy。 结果：整体照射时,低剂量X射线使CD14表达明显增强,而较高剂量X射线（大于2.0 Gy）明显抑制CD14表达;在体外照射时,0.075 Gy和2.000 Gy以内的较高剂量X射线也使CD14表达明显增强,而4.0~6.0 Gy 的剂量使J774A.1细胞的CD14表达明显受到抑制。 结论：低剂量X射线在体内及体外均能诱导小鼠巨噬细胞的CD14表达;小于2.0 Gy时也能增强CD14的表达,而剂量大于2.0 Gy时CD14的表达呈剂量依赖性下降,而且在体外的变化更明显。     

兔骨髓间质干细胞的体外分离、培养及活性鉴定

目的：建立一种体外分离培养自体兔骨髓间质干细胞（ Ｍ ａｒｒｏｗ Ｓｔｒｏｍ ａｌ Ｃｅｌｌｓ， Ｍ Ｓ Ｃｓ）的方法。方法：抽取兔骨髓液３～５ ｍ ｌ，经密度梯度离心得骨髓单个核细胞，以１６×１０４／ｃｍ ２ 细胞浓度培养，１２～１４ ｄ 后得到贴壁生长的单层细胞，随后进入传代培养，每传一代约 ５～７ ｄ。结果：原代培养的、以及传代后培养的细胞均为贴壁生长的、均匀一致的纺锤形细胞。两种细胞经体外特殊环境诱导后均可转化为骨髓网状间质细胞和成骨细胞。结论：该细胞经体外长期培养后仍具有多潜能转化活性，确系骨髓间质干细胞。为该细胞的广泛应用奠定基础。     

低剂量辐射增强小鼠肿瘤基因-放射治疗效应的免疫学机制研究

目的 探讨低剂量辐射全身照射对小鼠Lewis肺癌移植肿瘤基因-放疗方案中的免疫增强作用机制。方法 小鼠右后肢皮下接种Lewis肺癌细胞建立荷瘤模型,基因-放疗组中小鼠肿瘤局部注射由多聚乙烯亚胺包裹的pEgr-IL18-B7.1重组质粒,分别接受由2 Gy 局部照射和0.075 Gy 全身照射组合的不同治疗方案,通过³H-TdR标记方法检测小鼠CTL和NK细胞毒活性,ELISA方法检测TNF-α和IFN-γ分泌活性,观察各治疗组对荷瘤小鼠抗肿瘤免疫的作用。结果 在pEgr-IL18-B7.1基因治疗方案中,单次大剂量辐射局部照射后加多次低剂量全身照射与常规多次大剂量辐射局部照射相比,小鼠CTL和NK细胞毒活性显著增强,TNF-α和IFN-γ分泌活性有不同程度的增高。 结论 低剂量辐射可以通过促进CTL和NK细胞毒效应,上调TNF-α和IFN-γ细胞因子表达,从而增强机体抗肿瘤免疫功能,提高肿瘤基因-放疗的抑瘤效果。     

儿童寰枢关节半脱位非手术治疗分析

目的:通过对寰枢椎半脱位患者临床资料的分析和研究,探讨小儿寰枢椎关节半脱位的治疗和预后。方法:10例症状较轻者经单纯的颈项固定,另外30例入院即用牵引复位。结果:10例症状较轻经单纯的颈领固定,1周后治疗有效3例,无效7例,随后此7例采用卧床牵引1周后基本痊愈。30例入院即用牵引复位有效28例,无效2例,此30例中就诊时间<1周者21例(其中18例牵引<5 d,3例>5 d)。两种治疗效果差异有统计学意义(P<0.05);就诊时间与牵引时间之间有相关关系。结论:无论寰枢椎半脱位的临床表现和X线表现轻重与否,牵引复位固定治疗是最有效的治疗方法。较轻患者的单纯颈领固定会耽误患者病情,影响预后。寰枢椎半脱位就诊时间越早,治疗效果越好。     

Labeling of human insulin-like growth factor-I eukaryotic expression vector with green fluorescent protein

Articularcartilageinjuriesinadultsarecommon.Theintrinsicrepairisgenerallyminimalandcartilageinjuriescanfurtherdevelopintoosteoarthritis.Insulin likegrowthfactor I(IGF I)is regardedasoneofthemostimportantgrowthfactorsin cartilagedevelopmentandhomeostasis.Theadditionof IGF Itochondrocytesinvitroenhanceschondrocyte metabolism,maintainsadifferentiatedchondrocyte morphologyandpromotessynthesisofmajorcartilage matrixproteins,includingtype IIcollagenand proteoglycans.1,2IGF Iinlowconcentrationi…     

兔骨髓间质干细胞的体外分离,培养及活性鉴定

目的：建立一种体外分离培养自体兔骨髓间质干细胞（ＭａｒｒｏｗＳｔｒｏｍａｌＣｅｌｌｓ,ＭＳＣｓ）的方法。方法：抽取兔骨髓液３～５ｍｌ经密度梯度离心得骨髓单个核细胞,以１．６×１０＾４／ｃｍ＾２细胞浓度培养,１２～１４ｄ后得到贴壁生长的单层细胞,随后进入传代培养,每传一代约５～７ｄ。结果：原代培养的,以及传代后培养的细胞均为贴壁生长的,均匀一致的纺锤形细胞,两种细胞经体外特殊环境诱导后可转化为骨髓网     

双钩克氏针内固定治疗锁骨中段闭合性粉碎骨折83例

锁骨中段骨折是最常见的锁骨骨折类型，通常指喙锁韧带内侧界和肋锁韧带外侧界之间的骨折。闭合性锁骨中段骨折多采用保守治疗，骨折不愈合率仅为0．1％，但保守治疗会给患者在相当长的一段时间内带来较大的痛苦及生活不便。2005年6月-2007年6月，我院采用双钩克氏针内固定治疗闭合性锁骨中段粉碎骨折83例，取得了满意的疗效，现报告如下。     

电离辐射对小鼠腹腔巨噬细胞TLR4和转接蛋白MyD88表达的影响

目的：观察电离辐射对小鼠腹腔巨噬细胞TLRs介导的信号传导通路中TLR4和转接蛋白MyD88表达的影响,探讨低剂量辐射诱导机体免疫效应的机制。方法：昆明系雄性小鼠160只。时间-效应实验60只,随机分为假照组、照射后4、8、16、24和48 h实验组,每组10只;剂量-效应实验100只,随机分为假照组、0.050、0.075、0.100、0.200、0.500、1.000、2.000、4.000和6.000 Gy照射组,每组10只;X 线全身照射 (WBI) 后,采用流式细胞术检测小鼠腹腔巨噬细胞中TLR4和MyD88阳性细胞百分率。结果：时间-效应实验表明,与假照组比较,0.075 Gy 照射后TLR4和MyD88表达率在4 h后开始增高,分别在16 h和4 h达高峰（P<0.05或P<0.01,）;2.000 Gy 照射后,TLR4和MyD88表达率在4 h后开始增高, 16 h达高峰（P<0.01）。剂量-效应实验表明,与假照组比较,各剂量照射组 TLR4和MyD88表达率均随照射剂的增加递增,在0.075 Gy 开始明显增加（P<0.05）,在2.000 Gy 照射后达高峰（P<0.01）。结论：电离辐射使小鼠腹腔巨噬细胞TLR4和转接蛋白MyD88表达增高,促进小鼠的免疫反应,启动固有免疫及适应性免疫。     

不同剂量电离辐射对小鼠脾脏调节性T细胞及TGF-β1表达的影响

目的:观察不同剂量X射线照射后小鼠脾脏调节性T细胞(Treg)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的变化,探讨X射线对Treg阳性率及TGF-β1表达水平的影响.方法:雄性ICR小鼠,用X.S.S.205(FZ)型固定式X射线深部治疗机进行不同剂量的全身照射(低剂量组为0.050、0.075、0.100和0.200...