控制性低中心静脉压在原发性肝癌伴肝炎后肝硬化患者腹腔镜肝切除中的应用

背景与目的:在肝脏切除手术中采用控制性低中心静脉压(CLCVP)技术可有效减少肝断面出血,然而,低中心静脉压(CVP)所产生的相对低血压和潜在低灌注可能造成不良影响,这使其推广应用受到一定程度的限制。本研究探讨CLCVP技术在原发性肝癌伴肝炎后肝硬化患者腹腔镜肝切除手术中的应用效果和安全性。方法:回顾性分析2017年4月—2019年3月在安徽医科大学第一附属医院肝胆胰外科行全腹腔镜解剖性肝切除手术的44例原发性肝癌伴肝炎后肝硬化患者临床资料,所有患者均接受同一组医生手术,其中24例患者术中采用CLCVP技术(观察组),另外20例患者术中未采用CLCVP对照组(对照组),分析并比较两组术前、术中、术后的相关临床资料。结果:两组患者术前资料包括性别、年龄、BMI、Child分级、肝硬化程度、肝肾功能指标差异均无统计学意义(均P0.05)。两组手术均顺利完成,无围手术期死亡病例。观察组术中、术后均未见低CVP相关气栓、肝肾损伤等并发症。与对照组比较,观察组术中动脉收缩压、CVP明显降低,手术时间与肝门阻断时间明显缩短、术中出血和手术输血率明显降低,但术中乳酸指标明显升高(均P0.05)。两组的术后出血、感染、胸腔积液、胆汁漏的发生率以及肝肾功能指标、拔管时间、住院时间方面均无统计学差异(均P0.05),但观察组患者术后引流量多于对照组(P0.05);两组术后复发率亦无统计学差异(P0.05)。结论:在做好术前肝功能评估和术中密切观测患者灌注指标的前提下,CLCVP技术对肝炎后肝硬化患者腹腔镜肝切除手术是安全可靠的,虽然低CVP会使机体灌注减少,机体无氧代谢增强,乳酸含量增高,但对肝肾功能及肝癌的复发无明显影响,而且较低的CVP能够有效减少术中出血量和输血量,缩短手术时长和肝门阻断时间,降低长时间缺血缺氧对肝脏的打击。总之,在无严重心、肺、脑、肾基础疾病的肝炎后肝硬化患者腹腔镜肝切除手术中,CLCVP是一种值得推荐的控制肝断面出血技术。     

肝细胞癌患者中NLRC5的表达及其临床意义

目的探讨核苷酸结合结构域受体家族含CARD结构域-5(NLRC5)在肝细胞癌组织中表达情况及与临床病理特征、预后的关系。方法采用免疫组化SP法检测94例肝细胞癌组织及其癌旁正常组织中NLRC5的表达;Western blot检测20例新鲜肝细胞癌组织及其对应的癌旁正常组织中NLRC5的表达。结果 NLRC5在肝细胞癌组织中的阳性率(62.77%)显著高于癌旁正常组织(19.15%,P0.01);NLRC5的表达与肝细胞癌分化程度、TNM分期、有无硬化有关(P0.05),与患者年龄、性别、AFP值、肿瘤大小、HBV感染、肿瘤包膜是否完整无关(P0.05)。肝细胞癌组织中蛋白相对表达量(0.280±0.049)明显高于相应癌旁正常组织中(0.038±0.009,P0.01)。NLRC5阳性患者的3年生存期明显低于阴性患者(P0.01),并且NLRC5为肝细胞癌预后的独立性危险因素。结论 NLRC5蛋白在肝细胞癌组织中高表达,且与患者的临床病理特征、预后等因素有关,可能在肝细胞癌发生、发展过程中起着重要作用,有望成为肝细胞癌新的肿瘤标志物和潜在的治疗靶点。     

选择性半肝血流阻断和Pringle′s法对肝切除术后患者肝功能的影响

2000年1月~2005年12月,我们对行肝切除术的47例原发性肝癌患者于术中分别采用了第一肝门阻断(Pringle′s法)和选择性半肝血流阻断法,并对其术后肝功能进行了对比观察。现报告如下。临床资料:47例肝癌患者中,男38例,女9例;年龄37~68岁。肿瘤直径0~6cm16例,6~10cm15例,>10cm16例。肝切除术中采用选择性半肝血流阻断法18例,采用Pringle′s法阻断血流29例。方法:1Pringle′s法:常规解剖出肝十二指肠韧带,用线带和乳胶套管阻断。2选择性半肝血流阻断法:根据术中探查的病变部位,解剖出供应左半肝或右半肝的门静脉支,根据手术方式阻断、结扎和切…     

5-LOX抑制剂NDGA对人肝癌HepG-2细胞裸鼠移植瘤生长的影响及其机制的探讨

目的观察5-lox抑制剂去甲二氢愈创木酸(NDGA)对裸鼠人肝癌HepG-2细胞移植瘤的作用,并探讨其抗肿瘤的可能机制。方法以人肝癌细胞HepG-2制备裸鼠人肝癌移植瘤模型共18只,将18只荷瘤裸鼠随机分为三组:1、正常对照组(接种正常肝癌HepG2细胞)。2、药物组(接种正常肝癌HepG2细胞同时皮下注入5-lox抑制剂去甲二氢愈创木酸(NDGA),剂量:10μml/L NDGA 0.1ml/10g一天一次,连续5天)。3、溶媒组(接种正常HepG-2细胞后皮下注射溶质二甲亚酚)。密切观察移植瘤生长及裸鼠生存情况21天,记录各组移植瘤肿瘤体积V(V=长径×短径2×0.5),计算衰退率:肿瘤衰退率=1-干预组平均肿瘤体积比/空白对照组平均肿瘤体积比(V/Vo)。通过RT-PCR及Western-blot法检测裸鼠移植瘤组织中bcl-2、caspase3凋亡调节因子以及通路信号蛋白MEK1/2、ERK1/2等的表达。结果实验期间各组荷瘤鼠活动较好,成瘤率100%,且实验过程中无不良繁衍及裸鼠死亡;试验后分别测得各组荷瘤鼠皮下移植瘤体积及肿瘤衰退率,利用单因素方差分析及t检验可以发现:药物组荷瘤鼠较对照组及溶媒组移植瘤体积明显缩小,肿瘤衰退率明显较高,且存在统计学差异(P0.01);利用RT-PCR及Western-blot法检测发现药物组caspase3表达量较对照组及溶媒组明显增强,差异存在统计学意义(P0.01),bcl-2、ERK1/2、MEK1/2等表达量较对照组及溶媒组明显下降,差异具有统计学意义(P0.01)。结论 NDGA对于裸鼠人肝癌移植瘤具有明显的抑制效果。NDGA可能通过诱导肿瘤细胞凋亡而抑制肿瘤生长,其作用机制与抑制MEK/ERK信号通路有关。     

5-LOXsiRNA抑制人肝癌HepG-2细胞裸鼠移植瘤的生长并诱导细胞凋亡

目的探讨5-脂氧合酶(5-LOX)siRNA转染的人肝癌HepG-2细胞株裸鼠皮下移植瘤生长的影响及可能的作用机制。方法选取裸鼠18只,将其随机进行分三组:1、对照组(接种正常人肝癌HepG-2细胞株)。2、转染组(接种转染5-LOX-siRNA的人肝癌HepG-2细胞株)。3、空载体组(接种转染空质粒的人肝癌HepG-2细胞株)。观察载瘤小鼠皮下移植瘤生长及小鼠的生存情况,并于接种移植瘤3周后处死载瘤小鼠,记录各组移植瘤体积V及计算肿瘤衰退率,经Western和RTPCR检测通路信号蛋白ERK1/2、MEK1/2及caspase3、bcl-2等凋亡调节因子等表达情况。结果转染组肿瘤平均体积与转染空载体组、正常对照组比较明显减小(P0.01),Western及RT-PCR检测发现转染组caspase3表达量明显增强,ERK1/2、MEK1/2及bcl-2等表达量明显下降(P0.01)。结论抑制5-脂氧合酶的表达可显著抑制肝癌移植瘤的生长,其机制可能与5-LOX通过MEK/ERK途径调节凋亡基因bcl-2 caspase3的表达有关。     

Notch 1信号通路对人肝癌SMMC 7721细胞中CD133+细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究人肝癌SMMC 7721细胞中CD133+细胞的干细胞特性,初步探讨调控Notch 1信号通路对CD133+细胞亚群增殖和凋亡的影响.方法 流式分选和检测SMMC 7721细胞中的CD133+细胞.利用软琼脂集落实验及裸鼠成瘤实验验证CD133+细胞的干细胞特性.RT-PCR法检测CD133+细胞中Notch信号系统的表达;将分选出来的CD133+细胞分为激活组(加入Notch 1激活剂Jagged 1)、抑制组(加入Notch 1抑制剂DAPT)和空白对照组(加入PBS缓冲液),RT-PCR法检测3组细胞Hes-1基因的表达,MTT法和流式细胞仪检测各组细胞增殖能力和凋亡能力.结果 成功分选出CD133+亚群细胞;软琼脂集落实验和裸鼠成瘤实验表明CD133+细胞较CD133-细胞具有较强集落形成能力和体内成瘤能力;RT-PCR检测CD133+细胞中仅表达Notch 1/Jagged 1信号通路;激活组Hes-1表达强度增强,抑制组表达强度减弱,差异有统计学意义(P＜0.05).MTT检测激活组、抑制组和空白对照组吸光度值差异均有统计学意义(P＜0.05).流式细胞仪检测激活组总凋亡率大于空白对照组,反之,抑制组总凋亡率小于空白对照组,各组差异有统计学意义(P＜0.05).结论 CD133+细胞是人肝癌SMMC 7721细胞中干细胞标志物之一,Notch 1信号通路对CD133+细胞的增殖和凋亡发挥着重要作用.     

腹腔镜与开腹肝切除术治疗原发性肝恶性肿瘤的临床对比研究

目的通过比较腹腔镜与开腹两种不同肝切除术治疗原发性肝恶性肿瘤的术中情况及术后恢复情况,评估开展腹腔镜肝切除术(LH)治疗原发性肝恶性肿瘤的安全性和可行性。方法回顾性分析安徽医科大学第一附属医院肝胆胰外科一病区2017年3月至2019年6月接受肝切除术的111例原发性肝恶性肿瘤患者的临床资料。LH组患者37例,开腹肝切除术患者(OH组)74例,配对条件为年龄、病灶位置、手术方式。比较两组患者的手术时间、术中失血量等术中情况及术后禁食时间、肝功能变化、并发症发生情况及术后住院时间等术后恢复情况。结果两组患者的手术时间、术中失血量无明显差异(P0.05),但是腹腔镜左外叶切除的手术时间及失血量明显少于开腹肝左外叶切除(P0. 01)。禁食时间、术后住院天数LH组明显小(少)于OH组(P0. 01);术后第一天LH组谷草转氨酶(AST)和总胆红素(TBIL)好于OH组,但差异无统计学意义(P0.05),OH组谷丙转氨酶(ALT)好于LH组,差异同样无统计学意义(P0.05);术后第四天LH组的AST、ALT和TBIL均好于OH组,但仅AST差异有统计学意义(P0.05),术后第七天LH组的AST、ALT和TBIL均好于OH组,但差异均无统计学意义(P0.05)。LH组术后胸腔积液3例,腹腔积液2例,术后并发症发生率为13.51%(5/37);OH组发生胸腔积液6例,切口感染2例,切口脂肪液化1例,腹腔积液4例,并发症发生率为17.57%(13/74)。差异无统计学意义(P0.05)。结论在严格把握手术适应症、熟练掌握腔镜手术操作技术的前提下,LH治疗原发性肝恶性肿瘤是安全可行和值得推广的。特别是腹腔镜肝左外叶切除可取代传统开腹手术,可作为肝左外叶病变手术治疗的首选手术方式。     

5-LOX siRNA人肝癌HepG2细胞裸鼠瘤模型的建立及意义

目的建立5-脂氧合酶(5-lipoxygenase,5-LOX)5-LOX siRNA转染人肝癌细胞HepG2裸鼠瘤动物模型,探讨iR-NA干扰技术在裸鼠瘤模型中应用的可行性,为肿瘤的实验研究提供平台。方法分别用pRNAT-U6.1-5-LOX siRNA转染的HepG2细胞、空白质粒pRNAT-U6.1转染的HepG2细胞和未转染的HepG2细胞接种裸鼠建立移植瘤模型,分为转染组、转染空载体组和未转染组。建模前,用免疫荧光定量PCR检测转染HepG2细胞5-LOX mRNA表达,成瘤后测量种植瘤体积,并用Western-blot和RT-PCR检测瘤体5-LOX的蛋白和mRNA表达。结果 5-LOX siRNA转染的细胞5-LOX mRNA表达量下降(P<0.01),转染组肿瘤平均体积与转染空载体组及未转染组比较明显减小(P<0.01),而且瘤体5-LOX蛋白及mRNA表达量亦明显下降(P<0.01)。结论 5-LOX siRNA转染肝癌细胞HepG2裸鼠移植瘤瘤实验模型建立成功。将干扰技术和裸鼠移植瘤相结合,为肿瘤的实验研究提供一种更可靠有效的研究方法。     

术中多极射频消融在肝脏恶性肿瘤治疗中诊疗体会(附20例病例报告)

目的 探讨术中多极射频消融(RFA)在肝脏恶性肿瘤(特别是消化道恶性肿瘤肝脏转移肿瘤)中的作用、适应症及其安全性.方法 2011年8月至2012年3月,我科共收治应用术中RFA的肝脏恶性肿瘤患者20例.术前影像学发现20例患者的肝脏共有37个病灶;对于直径≤5 cm的病灶采用“一针穿刺,多极消融”的空间布针方案,对于直径＞5 cm的病灶采用“多针穿刺,盐水增强消融”的空间布针射频方案.结果 所有患者均顺利完成手术及RFA治疗,所有患者术后7天复查肝脏增强CT,所有消融病灶均显示为低密度液暗区,19例患者肝脏组织毁损范围超过术前病灶体积.其中直径≤5 cm的肝脏单个射频消融病灶患者13例术后随访2～7个月,肝脏未发现复发病灶.术中针道出血2例,予以缝合止血,余病例未发生腹腔内出血、胆道损伤、针道种植转移、肝功能衰竭等射频消融并发症.结论 射频消融是一种微创治疗,手术联合RFA治疗肝脏恶性肿瘤近期疗效确切,安全性好,适应症广.其远期疗效、与肝脏恶性肿瘤其他治疗方案疗效的比较尚待进一步观察.     

胰腺癌组织中骨桥蛋白的表达及意义

采用免疫组化SP法检测骨桥蛋白（OPN）在胰腺癌组织中的表达,分析其与胰腺癌临床病理特征及预后的关系。结果显示,60例胰腺癌中OPN呈阳性表达41例（68.3%）,而对照组15例中仅有4例呈阳性（26.7%）,两者相比,P〈0.05;COX回归模型多因素分析显示OPN表达对胰腺癌预后影响的相对危险度为3.093。认为骨桥蛋白在胰腺癌组织中的表达增强,OPN呈阳性表达的胰腺癌预后较差,OPN可作为胰腺癌预后的预测因子。