褪黑激素对增生性瘢痕成纤维细胞分泌转化生长因子β1的影响及其机制

目的 研究褪黑激素对增生性瘢痕Fb分泌TGF-β1的影响及机制. 方法 采用组织块法分离培养人增生性瘢痕Fb,按随机数字表法将细胞分为褪黑激素组、褪黑激素+Luzindole(褪黑激素受体拮抗剂)组、Luzindole组和对照组(仅以细胞培养液培养),前3组每孔细胞分别添加相应物质与细胞培养液培养,褪黑激素终浓度为1×10-3 mmol/L、Luzindole终浓度为1 mmol/L.每组10个复孔.培养24 h,采用ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β1含量,实时荧光定量PCR检测细胞TGF-β1、Smad 7和Rho激酶(ROCK) mRNA表达.对数据进行单因素方差分析或LSD-t检验或Kruskal-Wallis检验,组间比较采用Nemneyi法. 结果 褪黑激素组Fb上清液中TGF-β1含量为(2.8±2.4) pg/mL,低于褪黑激素+Luzindole组的(23.9±2.7)pg/mL、对照组的(28.9±2.0) pg/mL和Luzindole组的(24.9 ±2.8)pg/mL(F=94.58,P＜0.05).褪黑激素组细胞TGF-β1 mRNA表达量为11.9±1.2,明显低于其他组(F=20.79,P＜0.05)；褪黑激素+Luzindole组TGF-β1mRNA表达量(14.9±1.8)与对照组(17.2±0.6)比较差异无统计学意义(t=0.806,P＞0.05).褪黑激素组Fb Smad 7 mRNA表达量(0.076±0.080)明显高于对照组(0.023±0.024)、褪黑激素+Luzindole组(0.026 ±0.026)、Luzindole组(0.037±0.021),x 2=9.567,P＜0.05.褪黑激素组ROCK mRNA的表达量明显低于对照组(0.002 30±0.002 70)、褪黑激素+Luzindole组(0.001 30±0.001 20)和Luzindole组(0.001 10 ±0.001 20),x 2=9.420,P＜0.05. 结论 褪黑激素可通过与受体结合,上调瘢痕Fb中Smad 7表达、下调ROCK表达,从而抑制增生性瘢痕Fb表达TGF-β1.     

针刺对烧伤早期创面组织一氧化氮的影响

背景：一氧化氮在烧伤创面愈合过程起重要作用，针灸有消炎和免疫调节作用，但其作用机制是否对创面组织一氧化氮的影响有关还不清楚。目的：探讨针刺减轻烧伤创面早期进行性损害的机制。设计：双盲随机对照研究。地点和对象：实验在广州市红十字会医院烧伤整形科完成，对象为22只新西兰大白兔，体质量2．0～2．5b，雌雄不限，由广东省实验动物中心提供。干预：建立兔深Ⅱ度烧伤模型，针刺双侧足三里穴。采用一氧化碳试剂盒(酶法)测定组织一氧化碳。主要观察指标：创面组织一氧化氮的含量。结果：兔深Ⅱ度烧伤早期组织中一氧化氮含量显著低于正常组织。正常组织，烫伤后1，3，5d创面组织一氧化氮分别为(4．76&;#177;1．31)，(2．68&;#177;0．92)，(2．07&;#177;0．81)，(2．85&;#177;1．12)μmol／g。以伤后第3天最低(t=2．382，P&;lt;0．05)；针刺治疗3d，创面组织一氧化氮为(3．05&;#177;1．16)μmol／g，明显提高(t=2．216，P&;lt;0．05)。但仍低于正常组(4．76&;#177;1．31)μmol／g(t=2．156，P&;lt;0．05)。结论：针刺能提高创面组织一氧化氮含量，可能是其减轻组织水肿和烧伤创面早期进行性损害重要因素。     

瘢痕水泡液中肿瘤坏死因子、白细胞介素6的变化对瘢痕形成的作用

目的：研究瘢痕早期的水泡液中肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素6(IL-6)的变化以探索研究瘢痕的新方法和瘢痕形成的可能机制。方法：采用深度烧伤患者愈后增生性瘢痕的水泡液，以化学发光酶免疫法测定患者血和瘢痕水泡液中TNF，IL-6的含量，监测瘢痕早期组织中TNF，IL-6的变化。结果：深度烧伤患者愈后血液中的TNF，IL-6的含量无升高；增生性瘢痕水泡液中TNF，IL-6含量显著增加(P<0．01)，其高水平持续至少3个月(P>0．05)。结论：瘢痕水泡液可作为研究瘢痕发生发展的重要手段；瘢痕形成早期组织中TNF，IL-6含量增高是瘢痕增生的重要因素。     

TGF-β change in blister fluid of hypertrophic scar and its significance

Objective To investigate of the tissue TGF-β changes at early stage of hypertrophic scar formation and the value of scar blisters in hypertrophic scar.Methods The TGF-β1 content in the blister fluid and the blood were quantified with ELISA,patients(n=15)with hypertrophy scar after depth burn were included,three time point(each n=5)on early　stage(<3 months)of hypertrophy scar formation were monitored.and normal skin blister fluid and the blood(n=5)was used as control.Results The serum TGF-β1 in the both hypertrophic scar patients and normal skin group was not elevated(P>0.01),the TGF-β1 in the blister of normal skin was also not elevated(P>0.01),but TGF-β1 level in the scarblisters hypertrophic scar was elevated significantly[<60 d(158.5±69.8)pg/L,60-90 d,(181.1±40.1)pg/L,>90 d,(534.4±125.9)pg/L,P<0.01] and higher than the normal skin blister and the blood(P<15.6 pg/L.P<0.01),the increased TGF-β1 1evel in the hypertrophic scar blisters were persisted for at least three months.the TGF-β1 level of scar blister on the 3th month of hypertrophic scar formation reached a peak [(534.4±125.9)pg/L,P<0.01].Conclusions The data in this study indicates that TGF-β production at the early stage of hypertrophic scar formation is increased and may play an important role in scar formation;scar blisters is a valuable approach in hypertrophic scar study.     

褪黑激素对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨褪黑激素对人增生性瘢痕Fb增殖和凋亡的影响与机制. 方法 采用组织块法分离培养人增生性瘢痕Fb.按随机数字表法将细胞分为低、中、高浓度组和对照组.前3组细胞分别采用含1 × 10-5、1×10-3、1 mmol/L褪黑激素的培养液培养,对照组不加褪黑激素常规培养.处理后24 h进行如下检测:对各组细胞进行形态学观察;用四氮唑复合物( XTT)-硫酸酚嗪甲酯(PMS)比色法检测细胞增殖活性;对细胞行膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(FITC)和碘化丙啶(PI)双染色后,用流式细胞仪分析细胞周期和凋亡情况;荧光定量RT-PCR法检测细胞周期蛋白E(cyclin E)、p53和Fas mRNA表达量.对数据行方差分析和LSD检验. 结果 形态学观察显示,对照组Fb为长梭形,呈集落分布;3个浓度组Fb随着褪黑激素浓度升高,细胞逐渐分散,胞体变形缩小,胞膜皱缩,核质比例减小.对照组、低浓度组、中浓度组、高浓度组Fb增殖活性(吸光度值)依次下降,分别为1.79±0.10、1.49±0.15、1.24±0.20、0.92±0.09(F=67.61,P ＜0.05);S期细胞百分比依次下降,分别为(16.9±1.3)％、(10.6±1.1)％、(6.1±1.2)％、(3.2±0.8)％(F=286.10,P ＜0.05);G2/M期细胞百分比依次下降,分别为(16.7±1.6)％、(13.5±1.1)％、(9.8±1.0)％(6.0±0.7)％(F=162.69,P＜0.05);早、晚期凋亡细胞百分比依次升高(F值分别为424.05、236.44,P值均小于0.05).对照组、低浓度组、中浓度组、高浓度组细胞cyclin E的mRNA表达量依次下降,分别为2.90±0.30、1.58±0.21、0.90±0.20、0.24±0.12(F=266.79,P＜0.05);p53和Fas mRNA表达量依次升高(F值分别为10.11、12.03,P值均小于0.05). 结论 褪黑激素可通过影响细胞cyclin E、p53和Fas基因的表达,抑制增生性瘢痕Fb增殖并诱导该细胞凋亡.     

人增生性瘢痕组织内下丘脑—垂体—肾上腺皮质轴成分的表达

目的 探讨增生性瘢痕组织中下丘脑-垂体-肾上腺皮质(HPA)轴成分的表达及意义.方法 应用实时荧光定量PCR法,检测人增生性瘢痕(12例)和正常皮肤(7例)组织中HPA轴的活性物质促肾上腺皮质素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质素释放激素受体1(CRH-R1)、阿片-促黑素细胞皮质素原(POMC)、黑素皮质素受体2(MC-2R)以及糖皮质激素受体α(GR-α)的mRNA表达差异,免疫组织化学法观察CRH、CRH-R1、促肾上腺皮质激素(ACTH)、MC-2R以及GR-α的分布差异.对数据进行独立样本t检验. 结果 PCR结果显示,增生性瘢痕组织标本中CRH、CRH-R1、POMC及GR-α的mRNA表达分别为3.1±0.8、0.05±0.03、0.020±0.007、0.0000±0.0010,均低于正常皮肤组织的20.6±4.7、0.30±0.12、0.060±0.020、0.0200±0.0070,差异有统计学意义(t值为2.10-4.75,P值均小于0.05);但2种组织中MC-2R mRNA表达水平接近(t=1.48,P=0.15).免疫组织化学法检测结果显示,CRH,CRH-R1、ACTH、MC-2R以及GR-α分布于瘢痕组织的表皮基底层、真皮层的Fb和汗腺管壁中.在正常皮肤组织中阳性细胞除分布于上述部位外,还可见于毛囊和皮脂腺. 结论 增生性瘢痕形成与组织中HPA轴的活性物质表达降低有关.     

哌拉西林/三唑巴坦防治重度烧伤感染

目的 研究哌拉西林／三唑巴坦（特治星）防治重度烧伤感染的疗效。方法 选择我院烧伤中心ICU病房患者46例，烧伤面积（TBSA）50％－80％，其中Ⅲ度烧伤＞20％，患者入院后24h内开始，每隔8h静脉滴注哌拉西林／三唑巴坦4.5g，用药10d，观察用药后临床疗效。结果 患者入院后应用哌拉西林／三唑巴坦10d，生命体征平稳，创面没有明显感染的表现，血中白细胞、血小板、C－反应蛋白无显著变化，哌拉西林／三唑巴坦对烧伤中心检出的常见细菌的敏感性均较高。结论 哌拉西林／三唑巴坦可作为防治重度烧伤感染的经验性药物。     

烧伤并发急性呼吸窘迫综合征治疗分析

目的　总结烧伤后并发ARDS的预防治疗经验。方法　回顾性分析 1995年 1月至 2 0 0 2年 12月间该院收治的烧伤并发ARDS患者的临床治疗资料及结果。结果　 8年间该院烧伤科共收治体表总面积 (TBSA)30 %以上的成人 4 76例 ,并发ARDS 78例 ,发病率为 16 4 % ;发病时间高峰为伤后 5～ 11d ;脓毒症、延迟复苏或复苏不理想、重度吸入性损伤等为ARDS发病的高危因素。 78例中 ,治愈 6 1例 ,死亡 17例 ,病死率 2 1 8%。死亡 17例中 ,死于ARDS 3例 ,脓毒症 7例 ,MOSF 7例。脓毒症及其引发的MOSF仍为主要死亡原因。结论　严重烧伤后ARDS仍有较高病死率 ,预防重点在于早期复苏、早期切 (削 )痂植皮手术和防治脓毒症等综合措施。治疗关键在于及早诊断和机械通气 ,PEEP是必不可少的通气方式 ,保持呼吸道的通畅是治疗的重要内容 ,深度创面的手术等原发病的处理是治疗的根本。     

瘢痕水泡液TNF、IL-6的变化及临床意义

现已证实TNF、IL 6在组织修复和瘢痕形成过程中发挥了重要作用[1 ,2 ] ,但体内瘢痕组织中TNF、IL 6的研究尚少见报道。我们检测了深度烧伤愈后早期血液和瘢痕水泡液中TNF、IL 6的变化 ,以期探讨瘢痕水泡液成分和水泡液中TNF、IL 6的变化在瘢痕防治研究中的意义。1　材料与方法1 1　临床资料 :本组共 15例 (我科住院烧伤患者 ) ,男 13例 ,女 2例 ,年龄 2 0～ 4 3岁 ,烧伤面积 33%～ 92 % ,深度烧伤面积2 0 %～ 70 % ,创面愈合后瘢痕增生明显 ,表现出充血、质硬、痛痒、起水泡 ,瘢痕未作注射皮质激素和放射等治疗。1 2　采取瘢痕水泡…