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目的探究miR-375-3p调控结直肠癌细胞放射敏感性的作用和机制。方法在结直肠癌细胞HCT116及HT29中过表达miR-375-3p, 利用CCK-8法检测细胞增殖能力, 利用克隆形成实验检测细胞克隆形成能力, 利用Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡, 利用流式细胞术检测细胞周期分布。过表达miR-375-3p后, 检测γ-H2AX foci形成点数量、同源重组(HR)及非同源性末端连接(NHEJ)修复效率, 分析miR-375-3p表达对DNA双链断裂(DSBs)以及其修复效率的影响;利用生物信息学预测miR-375-3p在HR修复通路中的下游靶基因, 利用双荧光素酶报告基因法进一步验证miR-375-3p表达对靶基因重组蛋白A (RAD51)表达调控作用。最后, 利用荧光定量PCR技术检测经60Co γ射线2、6 Gy照射后HCT116细胞miR-375-3p的表达量;抑制miR-375-3p表达, 经0、1、2、4、6 Gy不同剂量照射后, 分析miR-375-3p表达变化对结直肠癌细胞HCT116放射敏感性的影响。结果过表达miR-375-3p显... 相似文献
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