嗅神经母细胞瘤的临床病理及超微结构观察

本文报道了12例嗅神经母细胞瘤的临床病理及其中2例的超微结构特点。光镜观察结果,12例均可见细胞之间由细胞突起形成的嗜酸性背景,有4例可见Flexner菊形团、7例见Homer-Wright菊形团(其中3例同时存在Flexner菊形团);电镜观察结果,细胞具有轴突样和树突样突起,胞体及突起内含微管、神经细丝及神经分泌颗粒,细胞突起之间见突触样的连接。作者并对该瘤的诊断问题进行了探讨。     

一种可生物降解温度敏感型聚乙二醇-聚己内酯-聚乙二醇水凝胶的合成和表征

合成了一系列分子量较低的聚乙二醇．聚己内酯-聚乙二醇（Poly（ethylene glycol）-Polycaprolactone-Poly（ethylene glycol），PEG-PCL—PEG）三嵌段共聚物。分别采用FTIR和1H—NMR对其结构进行了表征。所合成的PEG-PCL-PEG共聚物具有良好的水溶性，当水溶液浓度高于临界凝胶浓度（Critical gel concentration，CGC）时，随着温度的变化聚合物水溶液会呈现特有的凝胶-溶胶转变。研究了共聚物亲水疏水链段的比例和长度，以及热历史等对凝胶-溶胶转变行为的影响。通过调节上述条件，可以在一定程度上拓宽凝胶-溶胶转变温度范围，有助于PEG—PCL-PEG水凝胶在可注射药物控制释放系统等方面的应用。     

受体选择与B细胞自身免疫耐受

基因重组机制的存在使得B细胞抗原受体呈现高度的多态性,这其中包括大量的自身反应性抗原受体;而免疫细胞在发育过程中对自身抗原耐受状态的形成正是为了避免对机体自身的攻击。传统认为这主要缘于自身反应性细胞或克隆的死亡性清除,即细胞选择;近年来随基因操作技术特别是转基因及基因靶导技术的成熟运用,发现这些被“清除”的细胞并非全部死亡,其中大部分是通过重新启动基因重组机制以一种“受体选择”(Receptor selection)的方式,以重组的新的非自身反应性受体替代了原自身反应性受体;同时受体选择尚参与成熟B特异性的调整,以使正参与免疫反应B细胞受体更加多样化从而适应当前免疫应答的需要。     

重组人内皮抑素腺病毒抗肿瘤实验研究

目的肿瘤生长具有血管依赖性。内皮抑素为胶原X羧基末端裂解片段,是重要的内源性血管抑制因子。实验中利用重组人内皮抑素腺病毒(recombinanthumanendostatinadenorirus,Ad-hEndo)在肿瘤局部给药以探索其抗血管基因治疗的可行性。方法以Ad-hEndo感染体外培养肿瘤细胞,观察重组蛋白表达及其对培养的血管内皮细胞的抑制效应;在裸鼠A549肺癌模型中瘤内注射重组病毒,观察肿瘤抑制效应、剂量依从效应和毒副反应。结果不同感染复数的Ad-hEndo感染肿瘤细胞均表达重组内皮抑素蛋白,并能抑制血管内皮细胞的生长。动物实验中Ad-hEndo治疗组肿瘤体积及肺转移结节数明显低于对照组,且转移数与治疗剂量负相关。结论以腺病毒为载体的肿瘤局部血管基因治疗能抑制肿瘤新生血管形成进而有效抑制肿瘤生长和转移,其效应具有剂量依从性。     

α-干扰素对骨巨细胞瘤细胞凋亡和bFGF及其受体表达的影响

目的:探讨α-干扰素对体外培养的骨巨细胞瘤细胞碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)及受体Bek表达与生物学行为的影响,为骨巨细胞瘤术后复发转移的防治探索新途径.方法:采用不同浓度的α-干扰素诱导体外培养的第三代骨巨细胞瘤细胞,观察α-干扰素对瘤细胞生物学行为的影响,流式细胞术与细胞-酶联免疫吸附法分析α-干扰素诱导48h后瘤细胞凋亡情况及Bek/bFGF表达的变化.结果:浓度为1 000IU/ml以上的α-干扰素作用10～12h左右,瘤细胞即出现退缩现象,生长明显受到抑制;至48h,瘤细胞数目明显减少,且出现大量细胞碎片.α-干扰素可诱导第三代骨巨细胞瘤细胞发生凋亡,其凋亡率随α-干扰素作用浓度增加而递增,呈明显的剂量依赖关系.α-干扰素可抑制第三代骨巨细胞瘤细胞bFGF和Bek的表达,其抑制强度也随α-干扰素作用浓度的增加而增加,呈明显的量效关系.当α-干扰素作用浓度达到1 000IU/ml以上时,其诱导凋亡与抑制Bek/bFGF表达的效应均发生显著性变化.结论:α-干扰素对体外培养的第三代骨巨细胞瘤细胞具有明确的抗肿瘤效应,可作为骨巨细胞瘤术后辅助治疗,以防治和减少其复发转移.     

SELDI蛋白芯片技术及其应用研究进展

近年来出现的SELDI蛋白芯片技术是一种自动快捷．灵敏特异．高通量的蛋白组学研究方法。在临床诊断、药物研发及食品卫生等方面有良好的应用前景。综述了该技术的原理、分类及应用范围．并对其优势、劣势和前最展望进行了分析。     

EBV-LMP1与HSP90 β真核双表达质粒的构建及体外表达

目的从鼻咽癌组织中克隆EB病毒潜伏膜蛋白1（LMP1）与热休克蛋白90β（HSP90β）基因，构建其真核双表达质粒pIRES—LMP1-HSP90β，并检测其在体外的表达。方法提取鼻咽癌组织总RNA，逆转录PCR获得LMP1基因片段和HSP90β基因片段，将二者连接于真核双表达质粒pIRES中，测定序列后，用脂质体包裹转染COS细胞，采用RT—PCR和Western blot检测LMP1和HSP90β的表达。结果核酸序列测定证实本实验所构建的质粒正确，该双表达质粒在体外转染COS细胞后可表达LMP1和HSP90β分子。结论实验所构建的pIRES-LMP1-HSP90β双表达质粒能在体外同时表达LMP1和HSP90β分子。     

甘露聚糖修饰的靶向纳米脂质体的抗肿瘤作用实验研究

目的研究甘露聚糖修饰的靶向纳米脂质体的抗肿瘤作用。方法用胆固醇氯甲酸醋和N，N-二甲基乙二胺反应生成313[N-（N’，N’-二甲基氨基乙烷）-氨基甲酰]胆固醇（DC—chol），以DC—chol、二棕榈磷脂酰基乙醇胺（DoPE）和N-[2-（胆固醇氧羰基氨基）乙基]用氨酰甲基化革露聚糖（chol—AECM—mannan）为原料合成甘露聚糖修饰的靶向纳米脂质体，检测脂质体粒径大小。应用C57小鼠制备移植性肺癌模型，静脉给予各种纳米脂质体（实验纳米脂质体，无革露聚糖修饰的包裹有EGFR的纳米脂质体、空纳米脂质体）及对照EGFR，观察小鼠的一般情况及肿瘤生长情况；行ELISA和Western Blotting检测小鼠血清中抗体漓度差别。结果脂质体粒径大小为132．6nm。ELISA和Western Blotting检测均显示实验组小鼠血清有抗体产生而且抗体漓度远大于其他对照组。实验组肿瘤体积明显小于对照组（EGFR及空白脂质体组，P〈0．05）。结论研究结果表明实验组小鼠肿瘤生长受到抑制，甘露聚糖修饰的靶向纳米脂质体对小鼠肺癌有一定疗效。     

肿瘤相关抗原17-1A在毕赤酵母中的表达与鉴定

目的利用Pichia pastoris酵母表达系统表达糖基化的肿瘤相关抗原17-1A，为进一步设计肿瘤蛋白疫苗提供研究基础。方法通过RT-PCR从小鼠肾组织中扩增17-1A的cDNA，将其定向克隆到pPICZαA质粒上，获得重组质粒pPICZαA-17-1A，测序正确后，重组质粒电转化到Pichia pastoris酵母菌株GS115中，在甲醇诱导下，利用其AOX I基因的α信号肽，分泌表达17-1A抗原糖蛋白，并对获得的蛋白进行SDS-PAGE及Western blot分析鉴定。结果构建了pPICZαA-17-1A重组质粒，通过电转化将目的基因整合人酵母基因组中，重组毕赤酵母表达能够表达17-1A抗原并检测到抗原发生了糖基化。结论能够通过毕赤酵母表达系统稳定表达糖基化的肿瘤相关抗原17-1A。