内皮克隆形成细胞旁分泌对人脐静脉内皮细胞生物学功能的影响北大核心

背景:研究表明,内皮克隆形成细胞移植对缺血损伤组织的血管新生具有促进作用。然而,这一作用是否与其旁分泌效应有关,仍有待进一步研究证实。目的:检测人脐血来源内皮克隆形成细胞条件培养基中细胞因子分泌谱,并观察内皮克隆形成细胞条件培养基对人脐静脉内皮细胞增殖、迁移及成管能力的影响。方法:从人脐血中分离、培养内皮克隆形成细胞,并进行细胞鉴定。采用抗体芯片对无血清内皮克隆形成细胞条件培养基中的细胞因子进行检测。采用无血清EBM-2培养基作为对照组,应用CCK-8、细胞划痕实验、Matrigel成管实验检测内皮克隆形成细胞条件培养基对人脐静脉内皮细胞增殖、迁移及成管能力的影响。结果与结论:(1)原代培养细胞形态:培养的细胞呈"铺路石"样生长,表达CD34,KDR及CD144,不表达CD45及CD133,Dil-acLDL摄取及FITC-UEA-I结合双阳性,在Matrigel基质胶中可形成管腔样结构,以上均符合内皮克隆形成细胞的特征;(2)抗体芯片检测:内皮克隆形成细胞条件培养基高表达30种促血管新生因子;(3)CCK-8检测:实验组人脐静脉内皮细胞在24,48,72 h增殖活性均高于对照组(P<0.01);(4)细胞划痕实验结果显示,实验组人脐静脉内皮细胞迁移率在12,24 h均高于对照组(P<0.01);(5)与对照组相比,实验组人脐静脉内皮细胞在Matrigel基质胶上可形成更多的管状结构(P<0.01)。(6)结果表明:内皮克隆形成细胞能通过旁分泌效应促进成熟内皮细胞的生物活性。     

荧光定量分析人皮肤瘢痕疙瘩组织中miRNA-34s的表达

背景：通过分析不同肿瘤组织与正常组织miRNA表达谱的差异,有可能筛选到特异性好、灵敏度高、可作为特定肿瘤分子标志物的miRNA。目的：采用实时荧光定量RT-PCR检测miRNA-34家族（miRNA-34s：miR-34a/b/c）在瘢痕疙瘩和正常皮肤组织中的差异表达,分析评价microRNA-34s在瘢痕疙瘩形成发展的作用及可能的机制影响。方法：收集手术切除瘢痕疙瘩组织（10例）和正常皮肤（2例）;TRIZOL法提取标本的总RNAs并进行质检,再采用 Ambion′s miRNA Isolation Kit 从总 RNAs 中分离 microRNA,采用实时荧光定量 RT-PCR 技术检测miRNA-34s（miR-34a/b/c）在瘢痕疙瘩组织和正常皮肤组织中的表达水平。结果与结论：miRNA-34s（miRNA-34a/b/c）在瘢痕疙瘩组织中均呈下调表达（P＜0.01）。表明该家族成员参与了瘢痕疙瘩的形成发展,下调表达的miRNA-34s可能导致了瘢痕疙瘩的肿瘤性生长。     

点阵激光联合IPL对痤疮瘢痕患者的临床疗效分析

目的 探究点阵激光联合IPL对痤疮瘢痕患者的临床疗效分析.方法 选取2017年2月至2018年10月本院收治的60例痤疮瘢痕患者,根据治疗方法的不同分为CO2点阵激光组(CD组)和强脉冲激光联合CO2点阵激光组(IC组),每组30例.比较两组临床疗效、继发效应发生情况、满意度.结果 IC组治疗总有效率、满意度均高于CD组,继发效应发生率低于CD组,但差异无统计学意义.结论 CO2点阵激光和强脉冲激光联合CO2点阵激光治疗痤疮瘢痕均有不同程度的疗效,且IC组红斑、色沉不良反应较少,患者满意率较高.     

应用逆行腓肠肌内外侧头肌皮瓣修复小腿中下1/3软组织缺损

目的 探讨逆行腓肠肌内、外侧头肌皮瓣修复小腿中下1/3软组织缺损的临床效果.方法 2000年8月至2009年12月对下肢中、下1/3软组织缺损采用逆行侧腓肠肌内、外侧头肌皮瓣进行修复5例.结果 5例肌皮瓣成活,软组织缺损区形态与功能修复良好.结论 应用逆行腓肠肌内、外侧头肌皮瓣修复下肢中、下1/3软组织缺损操作简单、安全,疗效可靠.     

自体游离皮片移植在糖尿病足溃疡治疗中的应用

背景：临床工作中发现无论是采用轴型皮瓣还是随意皮瓣修复糖尿病足病都难以保持良好的血供,皮瓣存活困难,且供瓣处又形成一个新的创面,难以愈合。如行局部皮瓣转移容易造成皮瓣血供不好,引起皮瓣坏死。 目的：探讨自体游离皮片移植在治疗糖尿病足溃疡病中的临床作用。 方法：选择糖尿病足溃疡患者102例,其中男57例,女45例;年龄54.5(35~83)岁。糖尿病史3个月~23年,平均12年;糖尿病足坏疽病程20 d~2.5年,平均7个月。经全身抗炎、降糖治疗及创面处理,溃疡创面为肉芽覆盖时,视创面部位、大小等用滚轴式取皮刀在自体供皮区取刃厚或薄中厚皮片后采用打包法植皮或邮票状植皮,用无菌棉垫加压包扎,石膏托固定患肢,保证移植皮片与肉芽创面紧密接触。 结果与结论：102例患者均行一期局部清创、二期植皮,植皮区未发生严重感染或因创面生长不良而形成新的溃疡。其中83例植皮后全部皮片成活,创面愈合出院。19例植皮创面少量皮片未成活,经换药或补植后迅速控制,创面愈合出院,平均历时(21±7)d。院外获随访89例,随访时间3个月~3.5年,平均15个月。3例原位溃疡复发,5例其他部位新发溃疡,余患者病足均能自行或借助拐杖条件下满足站立、行走等功能要求。说明自体游离皮片移植是治疗糖尿病足溃疡的有效方法。 关键词：糖尿病;糖尿病足;溃疡;游离皮片;组织移植     

中药石膏倒模联合红蓝光照射治疗中、重度痤疮疗效观察

目的观察中药石膏倒模联合红蓝光照射治疗面部寻常型中、重度痤疮的临床疗效。方法采用中药石膏倒模联合红蓝光联合照射治疗中度和重度痤疮,分别与单纯红蓝光照射治疗的对照组比较,并观察疗效。结果治疗组中度(A组)和重度(C组)痤疮有效率分别为92.5%和82.5%,对照组(B组、D组)分别为77.5%和65.0%。治疗组(A组、C组)痤疮疗效均优于对照组(B组、D组)(p<0.05);治疗中度痤疮(A组)疗效在皮肤炎症改善优于重度痤疮(C组)患者,差异有统计学意义(p<0.05)。结论中药石膏倒模联合红蓝光交替照射联合治疗寻常型痤疮安全有效,值得临床推广。     

人端粒酶催化亚基反义RNA重组腺病毒载体的构建与鉴定

背景:人端粒酶催化亚基与c-myc在喉鳞状细胞癌中有密切的相关性。目的:构建含有c-myc启动子的人端粒酶催化亚基的重组腺病毒载体,观察人端粒酶催化亚基在细胞中表达后对细胞增长的影响。方法:按照人工合成中反向转录的方法设计基因合成引物,用复式PCR获得目的片段ashTERT(322bp)。将片段ashTERT克隆到pUC57(2.7kb)克隆载体,然后热激转化到E.coli感受态细胞中,菌检、PCR、鉴定阳性克隆后,菌液放大培养,提取质粒pUC57-ashTERT,然后对质粒进行测序。将目的基因片段亚克隆到穿梭载体pshuttle-CMVneo上,然后构建重组腺病毒质粒pAd-ashTERT。转入293细胞中进行病毒包装、鉴定和滴度测定。结果与结论:提取质粒pUC57-ashTERT,测序符合序列要求。质粒pUC57-ashTERT转入293细胞后,成功构建了有较强感染能力的含人端粒酶催化亚基基因的重组腺病毒载体。     

人端粒酶催化亚基反义RNA重组腺病毒载体的构建与鉴定*

背景：人端粒酶催化亚基与c-myc在喉鳞状细胞癌中有密切的相关性。 目的：构建含有c-myc启动子的人端粒酶催化亚基的重组腺病毒载体,观察人端粒酶催化亚基在细胞中表达后对细胞增长的影响。 方法：按照人工合成中反向转录的方法设计基因合成引物,用复式PCR获得目的片段ashTERT(322 bp)。将片段ashTERT克隆到pUC57(2.7 kb)克隆载体,然后热激转化到E.coli感受态细胞中,菌检、PCR、鉴定阳性克隆后,菌液放大培养,提取质粒pUC57-ashTERT,然后对质粒进行测序。将目的基因片段亚克隆到穿梭载体pshuttle-CMVneo上,然后构建重组腺病毒质粒pAd-ashTERT。转入293细胞中进行病毒包装、鉴定和滴度测定。 结果与结论：提取质粒pUC57-ashTERT,测序符合序列要求。质粒pUC57-ashTERT转入293细胞后,成功构建了有较强感染能力的含人端粒酶催化亚基基因的重组腺病毒载体。     

磷脂多不饱和脂肪酸抑制兔耳增生性瘢痕

背景：多不饱和脂肪酸有抑制细胞炎症反应及免疫功能的作用,增生性瘢痕的形成与炎症、细胞免疫、细胞因子有着密切关系,但目前尚无应用多不饱和脂肪酸防治增生性瘢痕的实验研究。 目的：探讨磷脂多不饱和脂肪酸对兔耳增生性瘢痕的抑制作用。 方法：在9只新西兰大白兔兔耳腹侧做直径1 cm的圆形全层皮肤缺损创面,每侧6个,共108个,其中形成增生性瘢痕92个,瘢痕形成率为85%。实验分3组：每只兔耳靠前3个创面涂磷脂多不饱和脂肪酸霜,右耳靠后3个创面涂多磺酸黏多糖乳膏,创面上皮化后立即涂药,每日1次,左耳靠后3个创面自然愈合。分别在术后28,42,63,90 d,观察创面的愈合情况;显微镜下观察瘢痕组织的厚度、胶原纤维和成纤维细胞密度;免疫组织化学染色检测胶原纤维的表达。 结果与结论：涂抹磷脂多不饱和脂肪酸霜和多磺酸黏多糖乳膏可使增生性瘢痕体积缩小、厚度变薄、成纤维细胞密度减小、胶原纤维表达减少。尤以磷脂多不饱和脂肪酸霜的效果最为明显。说明磷脂多不饱和脂肪酸可抑制兔耳增生性瘢痕的形成,减轻瘢痕的增生程度。