胆汁淤积性肝纤维化大鼠肝组织中PTEN表达与肝星状细胞凋亡的关系研究

目的 探讨胆汁淤积性肝纤维化大鼠肝组织中磷酸酶张力蛋白同源物基因(PTEN)的动态表达与在体肝星状细胞(HSC)凋亡的关系.方法 健康雄性SD大鼠50只,随机分为模型组(n=40)及假手术组(n=10).模型组采用胆总管结扎法建立胆汁淤积性大鼠肝纤维化模型,并分别于结扎后1、2、3、4周(每个时间点取10只)麻醉后留取肝组织.假手术组大鼠亦于相应时间麻醉后留取肝组织.采用免疫组化法测定大鼠肝组织中PTEN蛋白的表达;采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记法(TUNEL)及α-SMA免疫组化双染法检测在体活化HSC的凋亡情况.结果 正常大鼠肝组织未见凋亡的HSC.随着肝纤维化程度加重,肝组织中PTEN蛋白的表达量逐渐减少(P<0.01),而活化HSC增多,凋亡HSC也增多.造模1、2、3、4周,大鼠肝组织的HSC凋亡指数(分别为4.57%±0.41%、4.02%±0.48%、3.45%±0.37%、2.88%±0.50%)逐渐减少(P<0.01).大鼠肝纤维化组织中PTEN的蛋白表达量与在体HSC的凋亡呈显著正相关(r=0.76,P＜0.01).结论 胆汁淤积性大鼠肝纤维化组织中PTEN的蛋白表达下调与在体活化HSC的凋亡减少相一致.     

大鼠肝纤维化组织中PTEN蛋白的定位分布

目的 探讨大鼠纤维化肝组织中PTEN蛋白的定位分布及其在肝纤维化病理过程中的作用。方法 结扎胆总管建立大鼠肝纤维化模型;用免疫组织化学染色测定大鼠肝组织中PTEN及α-SMA 蛋白的分布及表达;免疫荧光双标记共聚焦激光扫描显微术测定大鼠肝组织中活化肝星状细胞（HSC）的PTEN蛋白分布及表达。结果 随着肝纤维化的发展,大鼠肝纤维化组织中α-SMA阳性细胞明显增多(P<0.01),PTEN阳性表达细胞逐渐减少(P<0.01);PTEN蛋白在活化HSC广泛表达,主要表达于细胞质,随着肝纤维化的加重,表达PTEN的活化HSC占总的活化HSC的比例逐渐减少(P<0.01)。 结论 大鼠肝纤维化组织中PTEN阳性表达细胞减少,减少程度与HSC的活化、增殖呈负相关。     

PTEN与肝脏疾病研究进展

过去,PTEN在肿瘤发生发展中的作用是研究的热点.近年来,一些学者广泛关注PTEN在某些非肿瘤疾病中的作用.肝脏疾病方面,除对PTEN在肝细胞癌发生发展中的作用进行研究外,也有一些PTEN与其他肝脏疾病关系的研究.本文就PTEN的发现、结构、功能及与肝脏疾病的关系等作一综述.     

非酒精性脂肪性肝病患者甲状腺激素水平变化及其临床意义

目的探讨非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）患者血清甲状腺激素水平变化及其临床意义。方法采用放射免疫法检测123例NAFLD患者及56例对照组的血清甲状腺激素（TT3、TT4、TSH）及透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原氨基末端肽（PⅢNP）、Ⅳ型胶原（CⅣ）等反映肝纤维化的血清学指标。结果 非酒精性脂肪性肝炎（NASH）组血清TT3浓度低于对照组及非酒精性单纯性脂肪肝（NASFL）组（P〈0.05）;三组间血清TT4、TSH浓度比较无显著差异（P〉0.05）;NASFL组患者血清HA、PⅢNP浓度高于对照组（P〈0.05）,CⅣ、LN浓度与对照组比较无显著差异（P〉0.05）;NASH组血清HA、PⅢNP、CⅣ、LN浓度均高于对照组及NASFL组（P〈0.05）;中、重脂肪肝组TT3浓度低于对照组（P〈0.05）,HA、PⅢNP、CⅣ、LN浓度高于对照组（P〈0.05）;轻度脂肪肝组TT3、HA、PⅢNP、CⅣ、LN浓度与对照组比较无显著差异（P〉0.05）。NASFL患者血清TT3水平与HA、PⅢNP呈负相关（P〈0.05）;NASH组患者血清TT3水平与HA、PⅢNP、CⅣ、LN均呈负相关（P〈0.05）。结论 NAFLD患者存在血清TT3水平降低,且下降程度与临床分型、超声分度及肝纤维化严重程度一致,检测NAFLD患者血清TT3浓度变化对判断病情及预后有一定的临床意义。     

PTEN过表达及其突变对体外活化肝星状细胞凋亡的影响

目的 探讨过表达的野生型PTEN及其突变体G129E对体外培养的活化肝星状细胞(HSC)增殖、凋亡的影响及其机制.方法 体外培养活化的HSC,以腺病毒为载体将野生型PTEN基因及其突变体G129E基因瞬时转染HSC;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测HSC增殖;末端转移酶标记技术(TUNEL)及流式细胞术测定HSC凋亡;Western印迹及实时荧光定量PCR方法 检测HSC PTEN表达;Western印迹测定HSC Bcl-2及Bax表达.结果 外源性野生型PTEN基因及G129E基因成功转染体外活化HSC,并引起HSC的Bax表达增加,Bcl-2表达下降(P<0.01).过表达的野生型PTEN及G129E明显抑制HSC增殖,在转染HSC后48 h、72 h的增殖抑制率分别为14.03%、23.12%和9.52%、12.63%.野生型PTEN基因及G129E基因转染HSC后72 h,HSC凋亡率均显著增加(P<0.01).在上述作用中野生型PTEN均明显强于其突变体G129E.结论 过表达的野生型PTEN及其突变体G129E通过降低Bcl-2/Bax途径诱导体外活化HSC凋亡,并抑制其增殖;并且,野生型PTEN的作用明显强于G129E.     

绝经后女性脑梗死患者血清垂体促性腺激素、催乳素的检测及其意义

目的探讨血清促卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)及催乳素(PRL)在绝经后女性脑梗死患者发病过程中的变化特点及其意义。方法采用放免法动态测定110例绝经后女性脑梗死患者血清FSH、LH及PRL的水平。分析其与病程、病情、梗死范围及梗死部位的关系。结果①绝经后女性脑梗死患者急性期血清FSH、LH值下降,PRL值升高,与恢复期及对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);恢复期血清FSH、LH及PRL值与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。②急性期中、重型组血清FSH、PRL值明显高于轻型组(P<0.05),二组间血清LH差异无统计学意义(P>0.05)。③梗死范围≥2cm×2cm×2cm组血清PRL明显高于梗死范围<2cm×2cm×2cm组(P<0.05);二组间血清FSH、LH差异无统计学意义(P>0.05)。④急性期皮质组、皮质下组、混合组比较,血清FSH、LH及PRL值差异无统计学意义(P>0.05)。结论绝经后女性脑梗死患者急性期存在垂体促性腺激素(FSH、LH)及PRL的紊乱,而随着疾病的恢复趋于正常。且这种紊乱不受梗死部位的影响,除PRL外也不受梗死范围影响,而与病情程度密切相关。     

性激素结合球蛋白与绝经后女性脑梗死的关系

目的:探讨性激素结合球蛋白(SHBG)与绝经后女性脑梗死的关系。方法:采用放免法动态测定30例绝经后女性脑梗死患者及30例健康对照组血清SHBG的水平,分析其与脑梗死的关系。结果:绝经后女性脑梗死患者急性期血清SHBG明显高于恢复期及对照组,有显著性差异(P<0.05),而恢复期与对照组血清SHBG无显著差异(P>0.05)。结论:绝经后女性脑梗死患者急性期SHBG增高,而在恢复期恢复正常。这种变化是机体对脑梗死的一种适应性反应,有利于脑梗死的恢复。     

垂体促性腺激素及性激素与脑梗死

近年来，国内外一些学者对脑梗死患者垂体促性腺激素及性激素的变化，性激素与脑梗死的关系进行了探讨。一些研究显示，雌激素可减轻脑缺血损害，具有神经保护作用。有关脑卒中的流行病学调查结果也显示，女性脑卒中的发病率、病死率明显低于男性，但绝经期后女性脑卒中的发病率迅速上升。这提示脑卒中的发病与性别有关，性激素的变化可能与脑卒中的发生与发展有一定的关系。     

蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1与肝脏疾病研究进展

蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1是含有SH-2结构域的非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶,负向调控JAK/STAT、PI3K-AKT等多种信号转导通路。大量研究表明,SHP-1在造血系统疾病及某些实体肿瘤的发生发展中发挥重要作用。近年来,SHP-1与非造血系统肿瘤及非肿瘤性疾病的相关研究也逐渐成为研究热点。在肝脏疾病方面,研究发现SHP-1表达异常与肝细胞癌、肝脂肪变性、肝纤维化、慢性乙型病毒性肝炎等肝脏疾病的发生发展密切相关。本文就SHP-1的结构、功能及与肝脏疾病的关系做一综述。     

野生型PTEN 过表达对体外活化肝星状细胞内钙离子浓度的影响

目的 探讨野生型第10 号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物基因（PTEN）过表达对体外活化肝星状细胞（HSC）内钙离子浓度的影响。方法 体外培养活化大鼠肝星状细胞系（HSC-T6）,利用腺病毒载体,将野生型PTEN 基因转染活化HSC ;Western blot 及实时荧光定量聚合酶链反应（qrt-PCR）检测HSC 的PTEN 蛋白及mRNA 表达;采用钙离子荧光探针Rhod-2/AM,于激光扫描共聚焦显微镜下检测HSC 内钙离子浓度变化。实验分组：① Control 组：腺病毒转染时以DMEM 代替病毒液;② Ad-GFP 组：转染表达绿色荧光蛋白（GFP）的对照空病毒Ad-GFP ;③ Ad-PTEN 组：转染携带野生型PTEN 基因并表达GFP 的重组腺病毒Ad-PTEN。结果 野生型PTEN 在活化大鼠HSC 大量表达,3 组HSC 内钙离子浓度比较,差异有统计学意义（P <0.05）,Ad-PTEN 组HSC 内钙离子浓度（251.60±90.88）低于Control 组（1 953.95±132.99）及Ad-GFP 组（1 937.57±115.17）,而Control 组与Ad-GFP 组之间HSC 内钙离子浓度比较,差异无统计学意义（P >0.05）。结论 野生型PTEN 过表达可降低体外活化大鼠HSC 内钙离子浓度。