神经内镜治疗儿童颅内蛛网膜囊肿临床分析

目的总结应用神经内镜治疗儿童颅内蛛网膜囊肿的临床效果,为儿童蛛网膜囊肿治疗提供依据。方法对16例儿童颅内蛛网膜囊肿患者在神经内镜下行蛛网膜下腔和脑池与囊肿沟通术和囊肿壁部分切除术。结果 14例癫痫患者,11症状未再发作,3例仍发作,继续药物控制。颅骨局部隆起1例及头颅增大1例随访3个月,未见继续增大。行CT和MRl扫描囊肿近消失3例,囊肿体积缩小1/2以上9例,另4例缩小1/3。结论应用神经内镜治疗儿童颅内蛛网膜囊肿操作简单、安全可靠、创伤小,疗效肯定。     

神经干细胞移植对实验性脑挫裂伤大鼠神经元及其环路的修复再生作用

背景：神经干细胞体内可发育成终末神经细胞，替代受损组织，重建神经环路恢复功能。目的：探讨神经干细胞移植对动物实验性脑挫裂伤的治疗作用。设计：完全随机对照实验研究。地点与材料：郑州市第二人民医院脑外科。18只Wistar(来源于河南省实验动物中心)成年大鼠雌雄不拘。清洁级。干预：将18只大鼠随机分为3组。对照组：单侧大脑半球致伤未移植；实验组：单侧致伤行细胞移植；双侧半球致伤组：一侧对照，对侧移植。主要观察指标：损伤区脑组织大体观察和该区脑组织苏木精-伊红染色切片。结果：移植组(侧)大脑半球肉眼观损伤区脑组织基本平坦，镜下见大量新生的细胞和血管，而变性或坏死细胞少见。实验组(侧)大脑局限性凹陷。组织坏死，镜下有细胞变性、坏死，区域性融合呈空泡状，缺乏细胞增生迹象。结论：神经干细胞移植对实验性脑挫裂伤具有显著的修复作用。     

不同剂量神经节苷脂对神经干细胞增殖和分化的影响

背景：近年来研究表明神经节苷脂(gangliosides，GM-1)能够修复中枢神经系统中神经元的损伤。目的：观察不同剂量神经节苷脂(GM-1)对神经干细胞增殖和分化的影响。设计：完全随机对照的开放实验。地点与材料：研究地点为郑州市第二人民医院脑外科和郑州大学医学生物工程研究所。材料为胎龄10周流产胚胎脑组织。方法与主要观察指标：从人胚胎脑组织分离出神经干细胞，培养于含bFGF和B27的DMEM／F12细胞营养液中，实验组加入不同浓度的GM-1，用MTT比色分析法测定细胞增殖能力。用含3％血清的DMEM／F12营养液诱导细胞分化，每间隔6h于倒置相差显微镜下观察细胞分化情况。结果：5d，10dMTT比色显示：bFGF(20mg／L)+B27+DMEM／F12和GM-1(33．5mg／L)+B27+DMEM／F12两组间t检验，P值均&;gt;0．05；GM-1(33．5mg／L)+B27+DMEM／F12与B27+DMEM／F12两组间t检验，P值均&;lt;0．05；GM-1(0．335mg／L)+B27+DMEM／F12，GM-1(3．35mg／L)+B27+DMEM／F12与B27+DMEM／F12间t检验，P值均&;gt;0．05。分化实验发现，接种6h后，(3％)血清+DMEM／F12组神经球周边可见明显的细胞突起，呈放射状向周围伸出，而3个实验组和阴性对照组的细胞突起短且细小，随着培养时间的延长，各组的细胞突起均逐渐伸长，3个实验组分化能力低于对照组，与阴性对照组之间无明显差异。结论：GM-1能够维持神经干细胞的原始神经状态，促进神经干细胞的增殖，对神经干细胞无明显的诱导分化作用。     

24例枕大孔区肿瘤的显微手术治疗

目的探讨枕大孔区肿瘤的临床特点、显微手术切除技巧和手术疗效。方法对24例经显微手术治疗且术后严密随访的枕大孔区肿瘤患者的临床资料进行回顾性分析。结果头痛及颈项疼痛是枕大孔区肿瘤最常见的症状,发生率高达79%。本组肿瘤全切19例,次全切5例,无手术死亡者;术前1例诊断为右侧舌下神经鞘瘤,术中及术后64排CTA证实为少见的右侧椎动脉动脉瘤;本组病理类型包括:脑膜瘤12例,神经鞘瘤6例,脊膜瘤3例,实质性血管网织细胞瘤2例,胆脂瘤1例;术后一过性呛咳、吞咽困难2例,浅昏迷1例,未见颅颈连接不稳、无脑脊液漏等并发症;随访3个月～5a,22例临床症状改善,复发1例,死亡1例。结论显微手术是切除枕大孔区肿瘤的首选方案,远外侧入路是枕大孔区腹侧及腹外侧肿瘤的理想切口,手术全切率高,并发症少。     

表皮生长因子样结构域7(EGFL7)在侵袭性垂体腺瘤中的表达及临床意义

目的探讨表皮生长因子样结构7(EGFL7)蛋白在侵袭性垂体腺瘤中的表达及与侵袭性关系。方法应用免疫组化(S-P)方法检测32例侵袭性垂体腺瘤和10例正常脑组织中EGFL7蛋白的表达情况。结果 EGFL7蛋白在侵袭性垂体腺瘤组织和正常脑组织中的阳性表达率差异有显著统计学意义(P<0.05)。结论 EGFL7蛋白在侵袭性垂体腺瘤中的表达率明显高于正常脑组织,表明其可能直接参与了侵袭性垂体腺瘤的发生及侵袭过程;在肿瘤的生长、侵袭过程中表现了较强的作用,针对肿瘤EGFL7蛋白的表达可以有效进行阻断,从而针对肿瘤的生长与侵袭能够有效起到抑制作用,为肿瘤患者的临床治疗铺开了新的道路。     

电刺激小脑顶核后脑外伤患者脑血流和脑损害变化

目的　探讨小脑顶核电刺激 (FNS)对脑外伤患者脑血流速度 (Vm)和血清髓鞘碱性蛋白 (MBP)的影响。方法　30名健康者为正常对照组 (A)。 6 0例脑外伤患者 ,随机均分为B(外伤对照组 )和C(刺激治疗组 )两组。用FNS对C组实施治疗。应用经颅多普勒超声动态监测A、B和C三组患者ACA、MCA的Vm。分别于外伤后第 1、3、5天检测B、C两组血清MBP。结果　ACA和MCA的Vm正常值分别为 ( 4 5 .4± 6 .1)cm/s和 ( 5 4.3± 5 .7)cm/s ;B组外伤后呈现持续性低Vm ,ACA和MCA的Vm分别为 ( 35 .9± 5 .6 )cm/s和 ( 4 5 .5± 6 .5 )cm/s ;C组FNS后Vm明显升高 ,分别为 ( 4 2 .8± 6 .8)cm/s和 ( 5 1.9± 6 .2 )cm/s。MBP正常值为 ( 1.0 2± 0 .46 ) μg/L。外伤后第 1天 ,B、C两组MBP明显升高 ,B组于第 5天达高峰 ,而C组MBP于第 5天则明显下降。结论　外伤后Vm降低 ,血清MBP升高。FNS可明显提高脑外伤后Vm ,改善脑循环 ,降低MBP ,减轻脑损害     

多重耐药不动杆菌属感染的脑室积脓脑室炎诊疗体会

目的探讨多重耐药不动杆菌属感染的脑室积脓脑室炎的诊疗经验。方法回顾我院神经外科2010-06—2012-06收治的6例多重耐药不动杆菌属感染的脑室积脓脑室炎病例,均行双侧脑室钻孔持续外引流,根据患者个体情况,合理给予抗生素脑室内灌洗,联合静脉用药,对其疗效进行分析并随访1a。结果 4例脑室炎患者临床治愈,1例放弃治疗,1例死于恶病质。结论多重耐药不动杆菌属所致的化脓性脑室炎以预防为主,一旦确诊,早期静脉给药,联合双侧脑室持续外引流及抗生素灌洗疗效显著,值得临床推广。     

人羊膜间充质干细胞移植对荷瘤鼠C6胶质瘤生长的抑制

背景:实验室前期课题成果显示,脐血或羊膜间充质干细胞具有亲肿瘤及抑瘤特性。目的:探讨人羊膜间充质干细胞对C6胶质瘤细胞生长的抑制作用。设计、时间及地点:细胞学体内对照观察,于2008-06/09在郑州大学微生物与免疫教研室完成。材料:胎盘来源于郑州大学一附院妇产科健康剖宫产产妇,C6胶质瘤细胞株由北京神经外科研究所惠赠,10只BALR/c裸鼠由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供。方法:无菌条件下取胎盘,分离部分羊膜,体外分离培养人羊膜间充质干细胞,传至第3代用于实验。10只裸鼠背部双侧皮下注射含3×106个C6胶质瘤细胞的DMEM/F12培养基,建立双侧荷瘤鼠模型。成功造模后,模型对照组于裸鼠左侧皮下注射DMEM/F12培养基50μL,细胞移植组于同一裸鼠右侧皮下注射含2×106个羊膜间充质干细胞的等量DMEM/F12培养基。主要观察指标:肿瘤生长情况,周围组织浸润及新生血管形成等病理学观察,免疫组化法检测肿瘤中细胞周期素D1的表达。结果:细胞移植后14,21d,细胞移植组肿块体积明显小于模型对照组(F=54.127,P<0.05)。模型对照组瘤体呈结节状,部分肿瘤组织中心有坏死现象,内部有新生血管形成,肌层及皮肤浸润较明显,已达腹膜;细胞移植组瘤体分叶较少,无新生血管形成,仅有局部的皮肤浸润,未见肌层浸润。模型对照组细胞周期素D1蛋白呈阳性表达,而细胞移植组表达阳性率较低。结论:人羊膜间充质干细胞可明显抑制荷瘤鼠C6胶质瘤细胞的生长,同时可抑制细胞周期素D1蛋白的异常表达。     

量子点标记神经生长因子纳米化颗粒修饰羊膜间充质干细胞移植治疗大鼠实验性脑损伤

目的:量子点是由Ⅱ-Ⅵ族元素或Ⅲ-Ⅴ族元素组成的纳米颗粒,因三维上受到量子限制而表现出独特的光学特征,其标记的神经生长因子纳米化颗粒由于是纳米级,易通过细胞生物膜.实验观察负载此纳米颗粒的羊膜间充质干细胞移植治疗大鼠脑损伤的效果.方法:实验于2007-01/10在郑州大学完成.①材料:SPF级健康成年Wistar大鼠40只,按体质量编号分为4组:神经生长因子细胞组、常规细胞组、损伤模型组、培养基对照组,10只/组,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准.羊膜间充质干细胞来自健康产妇胎盘羊膜,产妇对实验知情同意,实验经医院医学伦理委员会批准.量子点神经生长因子纳米粒由兰州大学功能有机分子化学国家重点实验室协助构建.②实验方法;向羊膜间充质干细胞中加入含10%胎牛血清、20 μg/L碱性成纤维生长因子的DMEM/F12培养基,置于37 ℃、体积分数为0.05的CO2饱和湿度培养箱中培养,待细胞达80%～90%融合时胰酶消化传代.取传至第3代细胞,分别加入终浓度为20,40,60 μg/L的量子点标记神经生长因子纳米粒进行修饰处理72 h,并设立空白对照和空载量子点对照.4组大鼠均采用Feeney自由落体法建立脑损伤模型,神经生长因子细胞组于大鼠损伤部位注入经40 mg/L量子点标记神经生长因子纳米粒修饰的羊膜间充质干细胞悬液10 μL(约4.0×108 个细胞),常规细胞组注入等量单纯量子点标记的羊膜间充质干细胞悬液,培养基对照组注入等量DMEM/F12细胞培养基,损伤模型组不给予移植操作.③实验评估:经量子点标记的神经生长因子纳米粒修饰后,MTT法检测细胞活性,荧光显微镜观察量子点在细胞内的分布,免疫细胞化学鉴定细胞分化.细胞移植后对各组大鼠运动及感觉功能进行评分,免疫组织化学染色及荧光显微镜观察量子点荧光化羊膜间充质干细胞在脑内存活分化和迁移情况.结果:①细胞生长率:培养72 h后与空白对照和空载量子点对照细胞比较,20,40,60 μg/L量子点标记的神经生长因子纳米粒组细胞生长率均呈增长趋势,40 μg/L时细胞无明显生长抑制,达60 μg/L时增长有所减慢.②体外量子点分布:荧光显微镜连续观察羊膜间充质干细胞.约6 h后开始摄入量子点标记的神经生长因子纳米粒,随着时间延长摄入量逐渐增加,于32 h荧光强度达高峰.③体外免疫细胞化学鉴定:经量子点神经生长因子纳米粒修饰的羊膜间充质干细胞表达神经元烯醇化酶和神经丝蛋白,向神经元方向分化,但不表达胶质纤维酸性蛋白.④神经行为学检测结果:细胞移植后24h,各组神经行为学各项指标评分均基本相似(P＞0.05);移植后10,20 d,损伤模型组与培养基对照组无明显变化,神经生长因子细胞组、常规细胞组运动及感觉功能各项评分均显著降低(P＜0.05),且神经生长因子细胞组下降幅度明显强于常规细胞组(P＜0.05).⑤免疫组织化学和荧光检测结果:经量子点神经生长因子纳米粒修饰的羊膜间充质干细胞在脑组织损伤区存活,并向周围迁移.结论:量子点是一种较好的细胞示踪剂,负载其标记的神经生长因子纳米化颗粒的羊膜间充质干细胞移植能够改善脑损伤大鼠神经功能.     

Fe3O4 纳米化颗粒标记人羊膜间充质干细胞的合适条件

目的:Fe3O4 纳米化颗粒是近来发现的活体示踪剂,由于其毒性可导致标记细胞死亡,寻找合适的浓度进行细胞标记已成为活体示踪的关键.实验以人羊膜间充质干细胞作为靶点,探讨Fe3O4 纳米化颗粒标记的合适条件.方法:实验于2007-08在郑州大学完成.①细胞来源及颗粒:人羊膜间充质干细胞由郑州大学第一临床医学院神经外科杨波教授自健康产妇胎盘羊膜中提取,产妇对实验知情同意,实验经医院医学伦理委员会批准.Fe3O4 纳米颗粒由美国Sigma公司生产,商品名:菲立磁,批号094k0788.转染剂多聚左旋赖氨酸购自大连宝生生物公司,批号033K4351.②实验方法:向人羊膜间充质干细胞加入含10%胎牛血清、20μg/L碱性成纤维生长因子的DMEM/F12培养基,置于37 ℃、体积分数为0.05的CO2饱和湿度培养箱中培养,待细胞达80%～90%融合时胰酶消化传代.取传至第3代的细胞,放入含DMEM/F12培养基的10 mL培养瓶中,密度调整为1×109 L-1.设立3组:单纯Fe3O4组分为4个亚组,即向培养基中分别加入终浓度为20,30,40,80 mg/L的Fe3O4纳米颗粒;Fe3O4 多聚左旋赖氨酸组分为4个亚组,即向培养基中分别加入上述终浓度Fe3O4纳米颗粒后,再加入1.5 mg/L多聚左旋赖氨酸;培养基对照组,仅加入DMEM/F12培养基.各组细胞标记12 h后,均更换为DMEM/F12培养基培养3周.③实验评估:分别于标记后12 h、36 h、1周和3周,普鲁士蓝染色检测Fe3O4纳米颗粒进入细胞情况,锥虫蓝染色检测细胞活性.结果:①Fe3O4 纳米颗粒标记人羊膜间充质干细胞的效果:终浓度为20 mg/L的Fe3O4纳米颗粒细胞标记率为60%,终浓度为30,40,80 mg/L的Fe3O4纳米颗粒细胞标记率均为100%.单纯Fe3O4组可见少量蓝染的Fe3O4纳米化颗粒分散于细胞浆内,Fe3O4 多聚左旋赖氨酸组蓝染颗粒明显增多,部分聚集成团.②标记后细胞活性测定:与培养基对照组比较,当Fe3O4终浓度为20,30 mg/L时,单纯Fe3O4组、Fe3O4 多聚左旋赖氨酸组细胞活性均无明显变化(P > 0.05);当Fe3O4终浓度升高至40,80 mg/L时,上述2组细胞活性均显著降低(P < 0.05).结论:①与多聚左旋赖氨酸混合,能够使进入细胞内的Fe3O4纳米颗粒增多,从而加强细胞标记效果.②30 mg/L Fe3O4纳米颗粒细胞标记率可达100%,且该浓度不影响人羊膜间充质干细胞的生物活性.③30 mg/L Fe3O4纳米颗粒联合多聚左旋赖氨酸是标记人羊膜间充质干细胞的合适条件.