角质形成细胞的培养及其表皮生长因子受体表达

目的:在成功分离人皮肤角质形成细胞的基础上,观察表皮生长因子受体在人皮肤角质形成细胞中的表达情况。方法:实验于2006-3/10在北京大学深圳医院中心实验室进行。采用dispase Ⅱ-trypsin两步消化法获取表皮基底层细胞,用小鼠皮肤成纤维母细胞滋养层和黄素腺嘌呤二核苷酸培养液进行培养。小鼠皮肤成纤维母细胞的预处理:向对数生长期的小鼠皮肤成纤维母细胞培养液中加入丝裂霉素C至终浓度为4mg/L,37℃下培养4h,弃去培养液,用D-Hank’s液洗3次,加入浓度为0.25g/L的胰蛋白酶消化,分离出细胞,离心(200g,5min),用黄素腺嘌呤二核苷酸培养液悬浮细胞,计数,以5.0×104/cm2的密度种于培养皿内,37℃、体积分数0.05的CO2培养箱下培养。角质形成细胞的培养:将分离的角质形成细胞悬浮在黄素腺嘌呤二核苷酸培养液中,以2.0×104/cm2的密度接种在前1天经丝裂霉素C处理的小鼠皮肤成纤维母细胞滋养层上,37℃、体积分数0.05的CO2培养箱下培养。24h换液,以后每3d换1次液。采用免疫细胞化学的方法检测表皮生长因子受体的表达,采用复合逆转录聚合酶链反应检测角质形成细胞中表皮生长因子受体mRNA的表达。结果:采用dispaseⅡ消化法分离了真皮和表皮,获得较多的角质形成细胞,可以避免真皮成纤维细胞的污染。人皮肤角质形成细胞在黄素腺嘌呤二核苷酸培养液中培养5d可见明显的集落,约10d可长满单层。免疫细胞化学显示表皮生长因子受体在细胞表面有明显的表达,复合逆转录聚合酶链反应显示表皮生长因子受体mRNA有明显的表达。结论:用小鼠皮肤成纤维母细胞滋养层和黄素腺嘌呤二核苷酸培养液可以较好地培养原代人皮肤角质形成细胞,表皮生长因子受体在细胞表面有明显的表达,这些结果为与表皮生长因子受体相关的皮肤病(如银屑病)的研究奠定了基础。     

假性湿疣21例临床分析

<正> 女阴假性湿疣是发生在女性外阴部,特别是小阴唇内侧和阴道前庭处类似尖锐湿疣样丘疹的一种疾病。该病国内在1990年才有正式报告,至今报道不多。我科从1990年初至年底共发现21例,现总结报告如下。 1 临床资料 1.1 一般情况:21例均为女性,年龄20～46岁,未婚14例,已婚7例。其中9例发现于婚前检     

尖锐湿疣患者血清细胞因子和黏附分子水平的检测

[目的]为了解尖锐湿疣患者部分细胞因子及血清可溶性黏附分子水平.[方法]采用ELISA法检测了46例尖锐湿疣患者和30例正常对照者血清中白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α),可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)和可溶性E-选择素(sE-selectin)水平.[结果]患者血清IL-6明显低于正常对照组(P＜0.01),TNF-x、sE-selectin明显高于正常对照组(P＜0.01),sICAM-Ⅰ无显著性差异.[结论]尖锐湿疣患者存在免疫缺陷和部分血清黏附分子水平的异常,可能与本病的复发有一定关系.     

银屑病患者血清肿瘤坏死因子水平与中医辨证关系的初步研究

目的探讨ＴＮＦα水平与中医辨证的关系。方法采用ＥＬＩＳＡ法检测了６０例寻常型银屑病患者和２０例健康人血清肿瘤坏死因子组（ＴＮＦα）水平,并探讨了其与中医辨证的关系。结果银屑病患者组血清ＴＮＦα水平与健康对照组比较无显著性差异（Ｐ＞０．０５）,但中医辨证血虚风燥型银屑病患者ＴＮＦα水平显著低于正常对照组及血热型组。结论提示ＴＮＦα水平对本病中医整体辨证有参考意义。     

Q开关Nd:YAG激光治疗颧部褐青色痣161例

颧颞部褐青色痣(nevus fuscoceruleus zygomaticus NFZ)亦称Hori痣、获得性双侧太田痣样斑(acquired bilateral nevusof Ota-Likemacules),是一种波及到真皮的色素增生性疾病,好发于中青年女性[1],影响面部美观。2003年5月～2006年5月,我们采用Q开关Nd:YAG激光倍频532nm治疗颧部褐青色痣患者161例,取得了较好疗效,现报道如下。     

1450例慢性荨麻疹的变应原检查

为寻求慢性荨麻疹的病因，我科对1450例慢性荨麻疹进行了变应原皮试检查，结果如下。1临床资料1·1诊断依据见参考文献［1～2］。1．2病例：1450例慢性荨麻疹均为我科门诊患者，其中男543例，女907例，男女之比为1：1．67。年龄8～72岁，20岁以下175例（l．07％），20～40岁928例（64％），41～60岁318例（21．93％），60岁以上用例（2％）。合并支气管哮喘或（和）过敏性鼻炎者123例，占8．48％。病程为2个月～28年不等。多数病例长期应用抗组胺药物，部分病例采用激素疗法、自血疗法、注射组胺球蛋白法及中药针灸疗法等均效果不佳。从地区…     

从外阴分泌物中分离出一株深红酵母菌

真菌感染在临床分离的菌种中,以念珠菌、隐球菌常见,女性外引阴道念珠菌病也以念珠菌为主,深红酵母菌感染并不多见[1].我院临床微生物室从门诊患者外阴皮损分泌物中分离到一株深红酵母菌.报道如下: 患者情况:蒲××,女,15岁,门诊病历号0142459.主因外阴疼痛、搔痒就诊.     

组织工程化人工皮肤胶原蛋白和蛋白多糖的代谢

背景:真皮的细胞外基质由胶原蛋白、弹性蛋白和其他基质成份组成。组织工程化人工皮肤作为一种体外皮肤模型应当具有合成、分泌和分解细胞外基质功能。目的:观察组织工程化人工皮肤胶原蛋白和蛋白多糖的代谢。设计:单一样本观察。单位:北京大学深圳医院皮肤科。材料:转铁蛋白;胰蛋白酶;3H-脯氨酸;天狼星红等。方法:实验于2000-06/2004-12在北京大学深圳医院皮肤科和吉林大学再生医学科学研究所完成。①参照文献进行组织工程化人工皮肤的制备。②3H-脯氨酸掺入法测定组织工程化人工皮肤合成胶原蛋白能力,于培养第1,2和3周的人工皮肤培养板孔中,分别加入3H-脯氨酸,培养4h,并与天然皮肤做对照。③苦味酸-天狼星红染色观察组织工程化人工皮肤合成、分泌胶原蛋白的功能;AB-PAS染色测定组织工程化人工皮肤合成、分泌蛋白多糖功能;均于培养第1,2,3,4和6周进行观察。主要观察指标:①组织工程化人工皮肤合成、分泌蛋白多糖测定结果。②组织工程化人工皮肤合成、分泌胶原蛋白的功能。③3H-脯氨酸掺入实验结果。结果:①培养第7,14天的组织工程化人工皮肤3H-脯氨酸掺入值与天然皮肤相近,培养第21天的组织工程化人工皮肤3H-脯氨酸掺入值明显高于天然皮肤。②培养的组织工程化人工皮肤,在偏振光显微镜下可见到有成束的红色双折光物质和细的绿色双折光物质。单纯基质网架只见到红色双折光物质。③培养第1,2周的组织工程化人工皮肤Ab-PAS染色阴性,单纯网架Ab-PAS染色呈阴性,培养第3～6周的组织工程化人工皮肤Ab-PAS染色阳性。结论:构建的组织工程化人工皮肤具有合成、分泌细胞外基质胶原蛋白和蛋白多糖的功能。     

寻常型银屑病患者发病的诱因分析

目的:研究寻常型银屑病患者发病的部分诱因。方法:应用Epi分析统计软件对临床收集的320例寻常型银屑病患者和165例对照病例的部分诱因进行分析统计。结果:受潮、感染、刺激性食物、精神紧张、饮酒、吸烟、外伤、服药等对银屑病的发病有显著的影响(P<0.05)。结论:精神紧张、感染、吸烟、饮酒等能诱发或加重银屑病,值得广大临床医生注意并有待进一步研究。