截短的BabA蛋白结合区(C51)具有促进幽门螺杆菌AGS细胞黏附作用

  目的   获得能与Lewis b结合的截短的BabA结合域,并评价其对幽门螺杆菌黏附人胃腺癌上皮细胞系（AGS细胞）的影响。   方法   采用Swiss Model分析蛋白截短后的结构变化,克隆表达截短的BabA结合区蛋白,命名为C51,用Native-PAGE蛋白电泳法检测其是否为多聚体。 用流式细胞术检测C51蛋白对J99和M523两株幽门螺杆菌黏附AGS细胞的影响,并用革兰染色观察C51蛋白对幽门螺杆菌聚集的影响。   结果   体外表达的C51蛋白以多聚体形式存在,该蛋白促进了J99和M523的聚集并使其与AGS的黏附分别增加了12%（t=8.211,P=0.001）和22%（t=4.402,P=0.012）。   结论   C51蛋白仍保持了与黏附相关的空间结构,并促进了幽门螺杆菌和AGS细胞的结合。     

一株羊种变异布鲁氏菌分离株遗传特征分析

目的 为研究一株羊种布鲁氏菌粗糙型变异菌株的遗传特征。 方法 本研究利用布鲁氏菌表型鉴定方法、全基因组测序及比较基因组分析方法。 结果 分离株与单因子R血清、三胜黄素发生凝集且能够被结晶紫染色,全基因组测序表明,该分离株与羊种2型菌株相似性最高;其基因组由2条染色体组成,大小为3 311 700 bp,GC含量为57.2%,含有3 379个CDS,9个rRNA,55个tRNA和4个ncRNA;存在282个变异,其中243个SNPs,39个InDel;已知的LPS合成基因中,8个存在错义突变。 结论 基因水平上的突变导致LPS合成受阻,分离株表型由光滑型变为粗糙型。本研究为羊种布鲁氏菌粗糙型变异菌株的研究提供了基础数据,同时也为布鲁氏菌疫苗候选株的筛选提供新思路。     

患者胃窦黏膜组织幽门螺杆菌real time-PCR检测与分离培养结果的一致性分析

  目的  针对胃黏膜组织标本的幽门螺杆菌（HP）感染诊断的real time-PCR检测和分离培养2种最常用方法进行结果一致性分析,为HP感染诊断方法的选择提供科学依据。  方法  在浙江省4个地区（萧山、温岭、苍南和湖州）各选取1所医院,采集2020年11月16日至12月7日送至杭州致远检验医学研究所进行HP分离培养和耐药性分析的全部患者胃窦部黏膜活检标本,共1 312份。 每份样本经研磨匀浆处理后分为2份,分别用于常规HP分离培养和real time-PCR检测（以cagH为检测靶点）,2种方法平行双盲进行。 检测结果的一致性及不同医院来源样本间的差异用χ2检验、Fisher精确检验以及独立样本t检验等统计学方法进行分析。  结果  1 312份样本中,分离培养法和real time-PCR法的阳性率分别为29.34%（385/1 312） 、28.51%（374/1 312）,差异无统计学意义（P=0.636）。 来自4所医院的标本,2种方法的检出率差异均无统计学意义（P=0.075）,二者在萧山某院、温岭某院、苍南某院、湖州某院样本以及总体样本中的Kappa值分别为0.84、0.89、0.75、0.91、0.85。 real time-PCR法的灵敏度和特异度分别为89.26%、100.00%。 在real time-PCR法检测阳性而培养阴性的样本中,检测Ct值为25.47～34.97,均值为30.90,90%的Ct值均≤34.46,频数最高组为29.00～30.00组。  结论  分离培养法和real time-PCR法在临床胃黏膜标本HP诊断中均可达到较高的检测效能,且2种方法检出结果一致性良好,可应用于HP个体化治疗,以便在做出HP感染诊断的同时提供受检者的药敏检测结果。 标本中HP菌量及标本的保存运输条件可能对结果产生重要影响。