重症肺结核患者T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子的表达及其预后意义

目的 探讨重症肺结核患者T淋巴细胞亚群、T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子(TIM-1,TIM-3)的表达及其预后意义。方法 回顾性分析2019年1月至2021年6月在我院收治的1 056例重症肺结核患者为研究对象,并将其定义为重症肺结核组,另选同期在我院进行治疗的1 000名轻症肺结核患者作为轻症肺结核组。比较两组患者TIM-1、TIM-3以及外周血T细胞亚群(CD4⁺、CD8⁺)水平;检测并比较外周血单个核细胞中TIM-1、TIM-3的mRNA水平;分析重症肺结核患者外周血T细胞亚群、TIM-1、TIM-3与患者预后的关系。结果 重症肺结核组CD8⁺、TIM-1和TIM-3水平均高于轻症肺结核组,CD4⁺水平低于轻症肺结核组(均P<0.001)。重症肺结核组TIM-1 mRNA和TIM-3 mRNA水平均高于轻症肺结核组(均P<0.001)。死亡组CD8⁺、TIM-1和TIM-3水平均高于存活组,CD4⁺水平低于存活组(均P<0.001)。相关性分析发现:存活组患者TIM-1、TIM-3与CD4⁺均呈负相关(r值分别为-0.114和-0.211,P<0.05),而与CD8⁺均呈正相关(r值分别为0.571和0.680,P<0.05)。结论 重症肺结核患者免疫功能紊乱可能与其体内外周血T细胞亚群水平异常以及TIM-1、TIM-3 表达水平升高有关。     

海南地区疑似肺结核患者非结核分枝杆菌感染特征

目的了解海南地区疑似肺结核患者非结核分枝杆菌(NTM)的菌种分布、耐药性及临床感染特征。方法收集2015年1月—2018年8月海南省某院疑似肺结核患者痰、肺泡灌洗液等呼吸道标本进行培养、菌种鉴定,对NTM感染情况、药敏结果,以及NTM肺部感染患者临床资料进行分析。结果共有833份疑似肺结核患者阳性呼吸道标本,其中126份初步鉴定为NTM,经菌种鉴定,检出结核分枝杆菌3株,检出非分枝杆菌属细菌3株,检出的4株NTM无法鉴定至种,最终116份标本中检出NTM118株。109例为单一NTM感染,7例为混合感染。有8种NTM菌种类型,主要以龟/脓肿分枝杆菌(41.5%)和胞内分枝杆菌(37.3%)为主。8种NTM菌种对8种一、二线抗结核药物呈不同程度的耐药,总耐药率最高的为异烟肼(96.6%),对8种抗结核药物全部耐药的比率高达32.2%。NTM肺部感染患者中男性少于女性,主要好发于中老年人,患者主要以海南沿海地区为主。NTM肺部感染患者主要临床表现为咳嗽咳痰、胸闷气促、血痰或咯血、食欲减退及体重下降,基础疾病既往有结核病史、支气管扩张、肺部感染及咯血,影像学表现为继发型肺结核、肺部空洞、胸膜肥厚、支气管扩张伴有肺气肿及肺部感染。结论海南地区NTM肺部感染主要是以龟/脓肿分枝杆菌和胞内分枝杆菌为主,NTM对常用的抗结核药物均具有较高的耐药性,NTM肺部感染与肺结核应依据病原学检查进行鉴别。     

海南省肺部感染患者非结核分枝杆菌的菌种鉴定分析

  目的   通过对海南省肺部感染患者非结核分枝杆菌（NTM）进行菌种鉴定,探讨海南省NTM肺部感染菌种的类型及人群分布情况。  方法   收集2016年7月至2021年6月期间就诊于海南医学院第二附属医院疑似肺结核患者的呼吸道标本进行分枝杆菌培养,对培养阳性标本进行对硝基苯甲酸（PNB）/噻吩-2-羧酸肼（TCH）培养菌型初步鉴定,采用DNA微阵列芯片技术进行分枝杆菌菌种鉴定,无法确定菌种的菌株进一步采用基因测序法鉴定。  结果   共收集8 507例疑似肺结核患者的呼吸道标本,剔除重复病例后,有318例经PNB/TCH培养初步鉴定为NTM,315例经DNA微阵列芯片技术和热休克蛋白65（hsp65）基因测序鉴定为NTM。 其中308例患者为单一感染模式,6例MTB＋NTM和1例2种不同NTM的混合感染模式。快速生长分枝杆菌128株占40.5%,以龟/脓肿分枝杆菌为主（占32.9%）;缓慢生长分枝杆菌188株占59.5%,以胞内分枝杆菌为主（占39.6%）。 女性患者多于男性且好发于中老年人,男女性别比为0.79∶1。 男女性患者年龄分布差异有统计学意义（Z=2.200,P<0.05）,>40岁的患者占91.1%。  结论   海南省NTM肺部感染主要以龟/脓肿分枝杆菌、胞内分枝杆菌感染为主,>40岁的女性中老年人为NTM侵袭的主要人群。     

DNA微阵列芯片法在海南地区结核病诊断及耐药性检测中的应用

目的探讨DNA微阵列芯片法在海南地区结核病诊断及耐药性检测中的应用。方法采用抗酸杆菌涂片法、罗氏培养法、比例法药敏试验及DNA微阵列芯片法对海南地区的2069例疑似结核病患者痰标本进行检测,并对结核分枝杆菌检出率、耐药性及耐药基因突变特征进行分析。结果DNA微阵列芯片法检测结核分枝杆菌检出率为明显高于罗氏培养法和抗酸杆菌涂片法(P<0.05)。以比例法药敏试验为金标准,DNA微阵列芯片法与比例法药敏试验检测耐利福平、耐异烟肼结核分枝杆菌及耐多药结核分杆菌的效果比较,差异有统计学意义(P<0.05),但均有较好的一致性(Kappa≥0.75)。耐利福平基因突变类型主要为rpoB531(C→T),占56.3%;耐异烟肼基因突变类型主要为KatG315(G→C),占84.6%;耐多药结核分杆菌基因突变类型主要为rpoB531+KatG315占54.6%。结论DNA微阵列芯片法可快速、准确地对海南地区疑似结核病患者的痰标本进行结核分枝杆菌及其耐药性检测,从而指导临床用药。     

线性探针技术在海南省结核病诊断及耐药性检测中的应用

目的 探讨线性探针技术在海南省结核病诊断及耐药性检测中临床应用。方法 分别采用结核菌涂片、罗氏培养法、比例法药敏及线性探针技术对海南省疑似结核病患者痰液标本进行检测,并对检测结核分枝杆菌、耐药性及耐药突变特点进行分析。结果 线性探针技术检测结核分枝杆菌阳性率（58.7%）明显高于结核菌涂片（40.2%）和罗氏培养（53.8%）,线性探针法与两种传统方法比较差异有统计学意义（P<0.05）;以比例法药敏为金标准,线性探针法对结核分枝杆菌耐利福平、异烟肼和耐多药结核分枝杆菌检测的特异性为89.27%、94.95%和91.45%,敏感性为94.38%、75.00%和75.68%,阴性预测值为94.62%、80.34%和5.60%,阳性预测值为85.71%、93.32%和84.85%,符合率为90.05%、85.34%和85.34%,线性探针技术与比例法药敏检测结核分枝杆菌利福平耐药性效果比较差异无统计学意义,且具有较好一致性,检测异烟肼耐药性差异有统计学意义,且两种方法之间一致性一般,检测耐多药结核分枝杆菌两种方法差异无统计学意义,但两种方法之间一致性一般;利福平耐药基因突变类型主要是 rpoB H531L,占57.14%,异烟肼耐药基因突变类型主要是katG S315T1,占91.89%,耐多药结核分枝杆菌耐药基因突变类型主要为rpoB S531L+KatG S315T1,占56.06%。结论 线性探针技术可快速准确地从海南省疑似肺结核临床标本鉴定出结核分枝杆菌及耐多药结核分枝杆菌,并可直接快速检测临床标本耐药性从而指导临床用药。     

血清基质金属蛋白酶-9 在肺结核鉴别诊断中的价值分析

目的:分析血清基质金属蛋白酶-9(MMP 9)在肺结核鉴别诊断中的价值。方法:选取肺结核、肺炎、肺癌患者及健康志愿者各60 例分别作为肺结核组、肺炎组、肺癌组和对照组,对受试者血清MMP-9 水平检测分析。结果:对照组、肺结核组、肺炎组、肺癌组研究对象的血清MMP-9 水平分别为(1 976.36±907.44)ng/ ml、(4 350.45±2 574.75)ng/ ml、(2 135.68±1 263.56)ng/ ml 和(2 590.38±1 532.84)ng/ ml,差异有统计学意义(F =25.000,P<0.001),其中,肺结核组患者的血清MMP-9水平显著高于其他三组(P<0.001),肺癌组患者的血清MMP-9 水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清MMP-9 在肺结核与健康人+肺炎+肺癌、健康人、肺炎、肺癌、肺炎+肺癌鉴别诊断中的受试者工作特征曲线下面积(AUC)分别为0.739、0.769、0.751、0.699、0.725(P 均<0.05)。结论:肺结核患者表现为血清MMP-9 水平显著升高,且幅度高于肺癌或肺炎患者,血清MMP-9 有助于肺结核鉴别诊断和筛查,但应注意适当提高诊断的灵敏度。     

海南省某医院2014—2021年脓肿拟分枝杆菌分离鉴定及药物敏感性分析

目的 通过对海南医学院第二附属医院肺部感染患者脓肿拟分枝杆菌复合群(Mycobacteroides abscessus complex,MABC)进行菌种鉴定，探讨海南地区MABC肺部感染菌种类型、药物敏感性及人群分布情况。方法 收集2014—2021年期间就诊于海南医学院第二附属医院疑似肺结核患者的呼吸道标本并进行分枝杆菌分离培养，通过对硝基苯甲酸/噻吩-2-羧酸肼(PNB/TCH)培养基与DNA微阵列芯片法初步鉴定出非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacteria,NTM)菌株，再采用hsp65及rpoB基因测序法鉴定MABC及其亚种，并采用微量肉汤稀释法进行体外药敏试验。结果 研究期间共收集3 025例疑似肺结核患者呼吸道标本，从123例患者呼吸道标本中分离培养鉴定出124株MABC菌株，包括脓肿拟分枝杆菌脓肿亚种(Mycobacteroides abscessus subsp.abscessus)74株，脓肿拟分枝杆菌马赛亚种(Mycobacteroides abscessus subsp.massiliense)38株，脓肿拟分枝杆菌博莱亚种(M...     

DNA微阵列芯片法检测结核分枝杆菌耐异烟肼基因的研究

目的采用DNA微阵列芯片法检测结核分枝杆菌INH耐药基因,为临床诊治提供实验依据。方法应用DNA微阵列芯片法和改良罗氏培养加比例法药敏试验对疑似结核病患者的150份痰液标本进行检测,并对检测的结果进行比较分析。结果 150份痰液标本的涂阳率为60.0%(90/150),DNA微阵列芯片法检测到结核分枝杆菌阳性率为62.7%(94/150),改良罗氏培养法阳性率为60.0%(90/150),比例法药敏试验异烟肼的耐药率为43.9%(36/82),异烟肼的kat G/inh A基因总突变率为35.1%(33/94);以改良罗氏培养加比例法药敏试验为标准,DNA微阵列芯片法检测结核分枝杆菌阳性、异烟肼耐药性和敏感性的符合率分别为97.7%、86.1%和100.0%。结论 DNA微阵列法可快速准确地检测大部分疑似结核病临床标本的kat G和inh A基因突变,可用于临床耐药性的检测从而指导临床用药,也可用于临床诊断中的推广。     

急性胰腺炎患者外周血单个核细胞中PRDM3水平与预后的关系

目的探究急性胰腺炎患者外周血单个核细胞中锌指蛋白转录抑制因子3(PRDM3)的表达水平及其与患者预后的关系。方法前瞻性选取2016年5月至2020年1月在海南省东方市东方医院接受治疗的311例急性胰腺炎患者作为研究对象。根据急性胰腺炎患者治疗后28 d的预后情况将其分为生存组和死亡组。采用Ficoll密度梯度离心法分离患者外周血中单个核细胞,采用蛋白质印迹法检测单个核细胞中PRDM3的相对表达量。结果生存组的血钙水平高于死亡组,而脂肪酶水平、急性生理与慢性健康评分Ⅱ(APACHEⅡ)和急性胰腺炎严重程度床边指数(BISAP)评分均低于死亡组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。两组治疗3 d后PRDM3的相对表达量均较治疗前降低,且生存组PRDM3的相对表达量低于死亡组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。治疗3 d后的PRDM3诊断急性胰腺炎预后的受试者工作特征(ROC)曲线下面积大于治疗前PRDM3和APACHEⅡ评分,差异均有统计学意义(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,血钙是急性胰腺炎预后的独立保护因素(P<0.05),APACHEⅡ评分、BISAP评分和治疗3 d后的PRDM3是急性胰腺炎预后的独立危险因素(P<0.05)。结论急性胰腺炎患者外周血单个核细胞中PRDM3水平与预后有关,检测其表达水平有助于预后评估。     

基因芯片法与线性探针法对痰标本中结核分枝杆菌检测的应用价值

目的探讨基因芯片法与线性探针法检测痰标本中结核分枝杆菌(MTB)的应用价值。方法海南医学院第二附属医院2018年3—7月门诊和住院的106例疑似肺结核患者纳入研究,采用基因芯片法、线性探针法对患者送检的痰进行检测,并与改良罗氏培养法进行比较;以比例法药敏试验为金标准,分析上述两种方法检测利福平和异烟肼耐药性的效能。结果对106份痰标本进行改良罗氏培养,阳性率为52.83%(56/106),经鉴定其中46份标本为MTB阳性。基因芯片法和线性探针法分别检出MTB46、53株,基因芯片法、线性探针法与改良罗氏培养法检测MTB结果比较,差异均无统计学意义(均P0.05)。基因芯片法、线性探针法与比例法检测MTB对利福平的耐药性比较,差异均无统计学意义,且具有较好一致性(均P0.05,均Kappa0.75)。对利福平的耐药性检测,基因芯片法的灵敏度、特异度分别为84.62%、90.00%,线性探针法分别为84.62%、85.00%。基因芯片法、线性探针法与比例法检测MTB对异烟肼的耐药性比较,差异均无统计学意义,但一致性一般(均P0.05、均Kappa0.75)。对异烟肼的耐药性检测,基因芯片法的灵敏度、特异度分别为69.23%(18/26)、95.00%(19/20),线性探针法分别为65.38%(17/26)、85.00%(17/20)。结论基因芯片法和线性探针法均可准确、快速地从大部分疑似结核病患者的痰标本中鉴定出MTB,也适用于利福平和异烟肼耐药结果的快速检测,从而指导临床用药,值得临床推广。