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目的 构建Tmub1基因的过表达慢病毒载体(LV-Tmub1),为研究Tmub1蛋白在肝细胞增殖过程中的作用提供实验材料.方法 化学合成Tmub1基因序列,用BamHI/AgeI酶切化学合成含有目的基因的质粒及GV287载体,PCR产物连接入线性化表达的载体.PCR鉴定引物,再对PCR鉴定阳性的克隆进行DNA测序和比对分析.使用构建的LV-Tmnb1,转染293T细胞,荧光法检测构建的慢病毒滴度.结果 成功构建了LV-Tmub1,并获得相应的病毒,病毒滴度为2×108 TU/mL.结论 LV-Tmub1为进一步研究Tmub1蛋白在肝细胞增殖中的作用提供了实验基础. 相似文献
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肝切除术是目前治疗各种肝脏良恶性疾病的有效方法,但扩大性肝切除术后易出现肝衰竭,其治疗仍是世界性难题。虽然肝移植是有效治疗途径,但供体严重不足限制了肝移植的广泛开展。现有的生物人工肝技术仍不能完全替代肝脏功能,肝细胞移植体内后增殖有限,也限制了其治疗效果。肝脏与其他器官不同,具有巨大的潜在再生能力。肝切除术后,剩余肝脏内实质细胞、非实质细胞及体内各种细胞因子、生长因子,还有各类肝干细胞等能够迅速做出回应,并很快使肝脏体积恢复至原来大小,肝功能恢复正常。肝脏再生大致分为三个阶段,即启动阶段、增殖阶段、终止阶段。肝脏再生的各个阶段机制复杂,影响因素多,至今仍未完全明了。探索肝细胞再生机制可为临床促进肝再生、防治肝衰竭奠定理论基础。肝切除术后肝脏再生已成为近年的研究热点,本文就近年来肝切除术后肝脏再生的研究进展做一综述。 相似文献
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目的 探讨肝部分切除术后Tmub1蛋白与securin蛋白的相互作用。方法 SD大鼠30只,随机分为肝切除术后0、24、48h组,每组10只。0h组行肝切除术后直接灌注肝脏并取原代肝细胞,后两组分别于术后24、48h灌注肝脏提取原代肝细胞。每组肝细胞中一部分行原代肝细胞培养,并通过免疫荧光及激光共聚焦实验检测Tmub1蛋白与securin蛋白的共定位情况;另外一部分肝细胞经裂解后提取蛋白,行免疫共沉淀及Western blotting检测Tmub1/securin共沉淀蛋白的表达。结果 激光共聚焦实验结果显示,肝切除术后0h细胞核内几乎没有Tmub1和securin蛋白表达,术后24h及48h Tmub1与securin蛋白大量共定位于细胞核内;免疫共沉淀及Western blotting检测结果显示,术后0h Tmub1/securin蛋白条带较弱,术后24~48h明显增强(P<0.01),但24h与48h之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Tmub1在正常肝细胞中几乎不与securin结合,但在肝切除术后从胞质进入细胞核,与securin蛋白相互结合,从而抑制肝细胞的增殖。 相似文献
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肝癌合并门静脉高压症同期联合手术治疗28例临床分析 总被引:1,自引:1,他引:0
目的探讨肝癌合并门静脉高压症施行联合手术的疗效、手术方式和适应证。方法对28例联合手术治疗肝癌合并门静脉高压症患者进行回顾性临床分析。结果28例中1例因术后肝衰致多脏器功能衰竭死亡:27例康复出院。术后并发症10例,发生率为35.7%,其中胸腔积液3例,腹水3例,术后胆漏2例,脾窝积液2例。术后近期无上消化道出血病例。随访至2006年3月,失访10例,18例得到随访。随访中死亡9例,死亡原因:肝癌复发4例,肝衰2例,上消化道出血3例。18例中术后1年生存率为88.9%,3年生存率为61%,5年生存率为50%。结论联合手术的术后并发症增加,但围手术期病死率并不增加,远期疗效满意。合理选择手术方式.对肝癌合并门静脉高压症施行联合手术是安全、可行、有效的。 相似文献
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赵晓彪 《中国计划生育学杂志》2002,10(Z1):204-207
社区是指在一定地域内发生社会活动和社会关系,有共同的文化价值观和生活方式并具有共同的成员归属感的人群所组成的相对独立的社会生活共同体.社区发展是指社区居民参与的使社区内部各构成要素相互协调的社区改造过程.社区发展是社会稳定的基础,社区发展水平是社会文明程度和居民生活质量的基本评价标准之一,居民的社区参与意识是居民的社会公益意识和互助合作观念的主要体现. 相似文献
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目的 探讨Tmub1蛋白在肝细胞增殖中的作用.方法 分别使用Tmub1沉默慢病毒载体、Tmub1过表达慢病毒载体及对应的空载体转染大鼠BRL-3A肝细胞,得到稳定转染的细胞.转染后采用Western blotting检测Tmub1蛋白的表达,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期.结果 转染LV-Tmub1慢病毒的肝细胞Tmub1蛋白表达明显增加,转染LV-Tmub1-RNAi慢病毒的肝细胞Tmub1蛋白表达明显降低,与正常肝细胞比较,差异均有统计学意义(P<0.01).转染LV-Tmub1慢病毒的肝细胞增殖最快,转染LV-Tmub 1-RNAi慢病毒的肝细胞增殖最慢,两组之间差异有统计学意义(P<0.01).过表达Tmub1慢病毒载体转染的肝细胞的G2+S期明显长于沉默Tmub1慢病毒载体转染的肝细胞,差异有统计学意义(P<0.01).结论 Tmub1蛋白可促进BRL-3A肝细胞的增殖. 相似文献
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