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目的探讨杨梅素(Myric)与围脂滴蛋白(PLIN1)基因沉默对3T3-L1脂肪细胞脂解通路的影响。方法采用经典"鸡尾酒"方法诱导分化3T3-L1前脂肪细胞,筛选出杨梅素最佳干预浓度和时间。杨梅素联合sh-PLIN1干扰载体对成熟的脂肪细胞进行干预,实验共分为4组:对照组(control group)、转染组(sh-RNA group)、杨梅素组(Myric group)和联合干预组(Myric+sh-RNA group)。油红O染色脂滴,观察脂滴形态;Western blot检测细胞中ERK、p-ERK、MEK、p-MEK和激素敏感性脂肪酶磷酸化蛋白(p-HSL)的表达;ELISA测定细胞中环磷酸腺苷(cAMP)、蛋白激酶A(PKA)和磷酸化的蛋白激酶C(p-PKC)的含量。结果与Myric组和sh-RNA组相比,Myric+sh-RNA组脂滴形态变小,数量明显减少。与sh-RNA组和对照组相比,Myric+sh-RNA组和Myric组细胞内p-PKC含量、p-ERK/ERK和p-MEK/MEK的比值以及p-HSL表达显著升高(P0.05)。同时,Myric+sh-RNA组和Myric组细胞内cAMP和PKA含量低于sh-RNA组和对照组(P0.05)。结论杨梅素的促脂解作用可能是通过激活PKCMEK/ERK信号通路,增加该通路中p-HSL的表达量来实现的;杨梅素同时可能对cAMP/PKA信号通路中相关因子的活性有一定的抑制作用。 相似文献
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<正>近年来,学者们对肠内营养(EN)做了大量的研究,EN在维护肠道功能、促进肠功能恢复、减少并发症发生(二重感染)、减少菌群失调(菌群易位)以及缩短平均住院日和减少经济负担等各个方面都有着显著的疗效[1]。而肠外营养(PN)长期临床实践带来的缺点已经被学者广泛认识,最重要的是肠黏膜的功能废用性萎缩以及胆囊炎等多并发症的发生。目前认为:只要有肠道功能存在,并能安全使用时,应该采用EN[2]。因此,本研究初步探讨EN和PN途径在全胃切除改良 相似文献
3.
目的明确Genistein对缺血/再灌注损伤后大鼠心肌是否存在药物后处理的保护效应。方法利用在体大鼠心脏局部缺血/再灌注模型,观测药物后处理前后大鼠心肌梗死面积、心肌酶和心功能指标的变化。结果在再灌注早期静脉给予Genistein能有效减轻心肌缺血/再灌注损伤。表现为心肌梗死面积减小,心肌肌钙蛋白I和MDA含量下降,SOD活力升高,心功能指标恢复率提高。结论在0.1mg/kg~5.0mg/kg剂量范围内,Genistein都具有明显的心肌保护作用,但表现出双向的剂量依赖性。在0.1mg/kg~1.0mg/kg剂量范围内其保护效应呈剂量依赖性增强,而在1.0mg/kg~5.0mg/kg剂量范围内呈剂量依赖性减弱。 相似文献
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目的 研究杨梅素(Myric)与围脂滴蛋白(PLIN1)联合作用对3T3-L1 脂肪细胞脂解的影响。
方法 常规培养及诱导分化3T3-L1 前脂肪细胞,筛选出Myric 最佳干预浓度和时间。Myric 联合sh-RNA 干
扰载体对已诱导分化成熟的3T3-L1 脂肪细胞进行联合干预,实验共分为四组:联合干预组(Myric+sh-RNA)、
转染组(sh-RNA)、杨梅素组(Myric)和空白组。采用油红O 进行脂滴染色,观察脂滴形态;采用酶学方法
检测细胞中三酰甘油(TG)和甘油含量,了解细胞脂解情况;采用Western blot 检测脂肪细胞中PLIN1A、三
酰甘油脂肪酶(ATGL)和激素敏感性脂肪酶(HSL)的表达量。结果 以浓度为100 μmol/L 的Myric 干预
72 h 时,细胞内TG 含量最低,甘油含量最高,脂解效果最佳,与其他浓度和干预24 h 比较,差异有统计学意义
(P <0.05)。联合干预后,与Myric 组和sh-RNA 组比较,Myric+sh-RNA 组细胞内TG 含量下降,甘油含量升
高,脂滴形态变小,数量减少,差异有统计学意义(P <0.05)。同时,Myric+sh-RNA 组PLIN1A 蛋白表达量降低,
ATGL 和HSL 蛋白表达量升高,差异有统计学意义(P <0.05)。结论 Myric 联合PLIN1 可以更有效降低PLIN1
表达量,提高ATGL 与HSL 的表达量,从而提高脂解效率。 相似文献
5.
道路交通受伤人员伤残评定分析系统的研发 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 研发道路交通受伤人员伤残评定分析系统。方法 基于Windows平台,依据GB18667—2002《道路交通事故受伤人员伤残评定》标准,应用Visual Basic6.0编程。结果 研发完成的道路交通受伤人员伤残评定分析系统对运行其的电脑系统配置要求较低,安装过程简单,使用方便,界面美观,运行速度快,结论可靠,具有许多方便用户使用的特点。结论 该分析系统使道路交通受伤人员伤残评定结论的公正性、标准性、可靠性、准确性和时效性得以充分保障,最大限度地减少鉴定结论的人为误差和错误,适合在公、检、法和司法鉴定机构推广应用,并将对维护司法公正和提高司法鉴定效率起到积极作用。 相似文献
6.
摘要:目的 运用RNA干扰技术沉默黑色素浓集激素受体1(Melanin-Concentrating Hormone Receptor 1,MCHR1)基因的表达,观察其对3T3-L1细胞诱导分化的影响,为肥胖症的基因治疗提供新思路。方法 用含绿色荧光蛋白的重组载体sh-MCHR1,通过脂质体法转染3T3-L1细胞。细胞诱导分化的同时用黑色素浓集激素(Melanin-Concentrating Hormone,MCH)干预,并在不同时点对脂滴进行油红O染色。采用RT-PCR以及Western blot分别检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(Peroxisome Proliferator-Activated Receptor γ,PPAR γ)、CCAAT/增强子结合蛋白-α(CCAAT/ Enhancer-Binding Protein α,C/EBPα)和脂肪酸结合蛋白2(adipocyte protein 2,ap2)mRNA和蛋白的表达。结果 重组载体sh-MCHR1成功转染;与阴性转染组相比,sh-MCHR1转染组d 10后,油红O 染液相对OD510值显著下降(P<0.05);PPARγ、C/EBPα和ap2 mRNA的表达量分别在d 6、d 8和d 8后显著下降(P<0.05);3者蛋白的表达量均在d 8后显著下降(P<0.05)。结论 shRNA沉默MCHR1基因可减缓3T3-L1细胞诱导分化,其可能通过抑制PPARγ、C/EBPα和ap2的表达而实现。 相似文献
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目的 探讨亚麻木酚素主要活性成分开环异落叶松树酯酚二葡萄糖苷(SDG)干预对雌性去卵巢大鼠心肌缺血再灌注损伤后心肌细胞凋亡相关蛋白表达的影响。方法 选取SPF级健康SD雌性10周龄大鼠50只,按照体重随机分为2组,分别为未去卵巢组、去卵巢组,去卵巢组又分为缺血再灌注假手术组、缺血再灌注组、SDG干预组、雌二醇干预组。SDG干预组采用蒸馏水溶解SDG在50 mg/kg.体重 剂量下灌胃,雌二醇干预组采用0.8 mg/kg.体重 剂量进行灌胃,其余组均采用等量蒸馏水灌胃,共灌胃60 d。采用western blot对Bcl-2、Bax、 BAD、p-BAD蛋白进行检测。结果 与缺血再灌注假手术组比较,缺血再灌注明显使去卵巢大鼠的Bcl-2/Bax水平降低、Bad/p-Bad水平升高,SDG干预后,去卵巢大鼠心肌组织Bcl-2/Bax水平增高、Bad/p-Bad水平降低。结论 SDG可以通过下调Bad/p-Bad水平以及上调Bcl2/Bax水平来发挥对心肌缺血再灌注损伤后的保护作用。 相似文献
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目的探讨Genistein后处理对大鼠心肌缺血/再灌注损伤产生保护效应的可能机制。方法实验分7组:假手术组、缺血/再灌注组、Genistein组,ICI182780组,正钒酸钠组,Genistein+ICI182780组,Genistein+正钒酸钠组;利用Langendorff离体心脏灌流技术,建立离体大鼠心脏局部缺血/再灌注Genistein后处理模型,应用工具药物雌激素受体拮抗剂(ICI182780)和酪氨酸磷酸酶抑制剂(正钒酸钠)给予干预,观察干预前后,离体心脏局部缺血/再灌注Genistein后处理模型大鼠心肌梗死面积、心肌酶和心功能等指标变化。结果与对照组相比,缺血再灌注组增高了心肌梗死区面积,降低了心脏灌流漏出液样品中超氧化物歧化酶(SOD)活力、左室收缩压(LVSP)-左室舒张压(LVEDP)恢复率等(P<0.05)。经不同药物干预后,ICI182780组、正钒酸组、Genistein+ICI182780组的心肌梗死区面积占危险区面积的百分比高于Genistein组(P<0.05),T-SOD活力低于Genistein组(P<0.05)。结论Genistein后处理对大鼠心肌缺血/再灌注损伤所发挥的保护作用,与Genistein本身具有的雌激素特性有关;而其本身具有的酪氨酸蛋白激酶抑制作用,对心肌保护是不利的。 相似文献
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目的 探究Plin1基因敲除对肥胖小鼠脂肪组织炎症水平的作用及其可能分子机制。方法 将雄性野生型C57BL/6J小鼠和Plin1基因敲除小鼠随机分为普通饲料组和高脂饲料组4组(n=6),喂养12 w后,隔夜禁食自由饮水12h,眼眶采取所有新鲜血液及组织样本,并颈椎脱臼处死,取各组小鼠血清及部分附睾脂肪组织,酶法测定小鼠血清中游离脂肪酸(nonesterified fatty acid,NEFAs)的水平;酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)试验测定小鼠血清和脂肪组织中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)及单核细胞趋化因子1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)的水平;免疫组织化学染色法观测F4/80的表达程度;免疫荧光染色法和Western blot法观察核因子κB (Nuclear Factor kappa-B,NF-κB)亚基P65的转位及表达水平和NF-κB亚基P65表达及磷酸化差异... 相似文献