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目的:利用昆虫杆状病毒表达系统表达早期快速反应基因5(IER5)蛋白,为后续蛋白质结晶及探索蛋白质三级结构提供线索。方法:以HeLa细胞cDNA为模板扩增出IER5基因片段,构建重组转移质粒pFastBac1-IER5;重组转移质粒经双酶切及测序鉴定后转化至感受态细胞DH10Bac,以获得重组的穿梭质粒rBacmid-IER5;将重组穿梭质粒感染Sf9细胞,待细胞出现明显病变时收集重组杆状病毒;用间接免疫荧光、SDS-PAGE及Western blot以及对表达产物进行分析鉴定。结果:重组转移质粒pFastBac1-IER5经双酶切后得到与预期相同的2条条带;重组穿梭质粒rBacmid-IER5经PCR鉴定在3 300 bp左右出现一条特异性条带;间接免疫荧光结果提示IER5蛋白在Sf9细胞中得到表达;SDS-PAGE结果显示,表达产物的相对分子质量约为48 k,Western blot结果表明表达产物能与IER5抗体特异性结合。结论:利用昆虫-杆状病毒表达系统成功表达了人IER5蛋白,获得了体外表达重组IER5蛋白的相对分子质量、溶解性等物理化学特性。 相似文献
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目的探讨小儿胰腺损伤临床特点及诊治方法。方法我院自2004年8月~2011年12月共收治胰腺损伤患儿13例,其中Ⅰ度胰腺损伤3例,Ⅱ度7例,Ⅲ度2例,Ⅳ度1例;淀粉酶升高4例。13例患儿均经病史、腹部查体、淀粉酶检测、B超及CT明确诊断,4例经手术探查证实。结果 3例Ⅰ度及6例Ⅱ度经非手术治疗;1例Ⅱ度行腹腔广泛引流;1例Ⅲ度胰腺损伤因膜膜炎行剖探查术,术中见腹腔中等量积液,胰腺中部断裂,胰管未断裂,行断裂修补,局部引流;1例Ⅲ度因形成胰腺假性囊肿行胰腺囊肿-空肠Roux-Y吻合术;1例Ⅳ度行胰腺断裂近端缝合、远端胰腺空肠Roux-Y吻合术。所有患儿均临床治愈。结论小儿胰腺损伤因其症状往往较为隐匿,诊断较为困难,了解胰腺损伤的机制及高度警戒心理有利于胰腺损伤的早期诊断及恰当治疗。胰淀粉酶及脂肪酶升高在胰腺损伤诊断中并不可靠;螺旋CT增强扫描检查应作为胰腺损伤首选检查方法;轻度胰腺损伤多可非手术治愈,重型胰腺损伤合并腹膜炎表现需行剖腹探查并相应处理。 相似文献
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正慢性充血性心力衰竭(CHF)是心脏结构或功能显著异常,导致心室充盈或射血功能受损,所引起的影响心室灌注或搏血能力的临床综合征~([1]),是各种心血管疾病发展的最后阶段。目前CHF仍然是人类致死或致残的主要原因,严重危害着人类健康。在CHF的发生发展过程中,心肌能量代谢紊乱起着关键的作用~([2])。因此如何改善心肌能量代谢,减轻心肌重构,是改善CHF患者的重要手段之一。为 相似文献
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目的 探讨导致胆道再次或多次手术的原因.方法 回顾性分析2005年1月至2011年6月上海市第六人民医院金山分院收治的265例行胆道再次或多次手术患者的临床资料.第1次胆道再次手术主要以取尽结石、修补胆管损伤、治疗恶性肿瘤为主要目的.手术方式主要包括胆总管切开取石+T管引流术或胆管空肠Roux-en-Y吻合术,经胆道镜或ERCP+ EST取石术,胆总管切开取石+肝段或肝叶切除+T管引流术或胆管空肠Roux-en-Y吻合术,胆管狭窄切开成形+胆肠内引流术,肝外胆管对端吻合+T管支撑引流术,肿瘤根治性或姑息性手术,单纯胆肠内引流术或内镜下置胆道内支架引流术,剖腹探查术,胆瘘或出血部位缝扎、止血、腹腔冲洗和置管引流术等.第2次或多次胆道再次手术以解除胆管狭窄,建立通畅的胆汁引流途径为目的.组间率的比较采用x2检验.结果 胆道第1次再次手术的主要原因为结石残留或复发,占69.8% (120/172),明显高于胆道第2次或多次再次手术患者的31.2%( 29/93),两者比较,差异有统计学意义(x2 =36.51,P<0.05).第2次或多次再次手术的主要原因是胆管或胆肠吻合口狭窄,占58.1% (54/93),明显高于第1次再次手术的4.1% (7/172),两者比较,差异有统计学意义(x2=99.32,P<0.05).265例患者中46例围手术期发生并发症,其中第1次胆道再次手术患者的并发症发生率为10.5%(18/172),明显低于第2次或多次胆道再次手术患者的30.1%(28/93),两者比较,差异有统计学意义(x2 =13.61,P<0.05).围手术期死亡6例,死因为失血性休克或MODS;第1次胆道再次手术患者和第2次或多次胆道再次手术患者的病死率分别为1.7%(3/172)和3.2%( 3/93),两者比较,差异无统计学意义(x2 =0.59,P >0.05).结论 导致胆道再次或多次手术的原因包括疾病本身和手术操作.术前对病情充分评估,术中谨慎操作,选择合理的手术方式是降低再次手术及围术期并发症发生率的关键. 相似文献
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目的探讨低场磁共振胰胆管水成像(MRCP)序列对鉴别肝血管瘤和肝囊肿的应用价值。方法对已进行MRI平扫加增强扫描明确诊断的患者进行MRCP成像检查,包括肝海绵状血管瘤75例、肝囊肿66例、肝海绵状血管瘤合并肝囊肿26例,并与MRI增强扫描结果进行对照。结果 MRCP成像诊断肝海绵状血管瘤病灶169个,诊断符合率95.48%;诊断肝囊肿病灶156个,诊断符合率97.50%;总体鉴别正确325个病灶,鉴别正确率96.44%。全部病例T2WI呈高信号或较高信号,T1WI呈低信号,STIRT2压脂呈明显高信号。MRCP序列肝血管瘤信号明显衰减甚至消失,而囊肿病灶呈明显高信号,二者形成非常显著的差异。结论磁共振水成像充分利用了水的静态特征,免除了增强检查鉴别的繁琐,简便易行,且费用低,具有临床推广价值。 相似文献
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患者,男,4 1岁。因腰骶部疼痛2 + 年。伴双下肢麻木2 + 月。无大小便失禁,无双下肢活动受限,无外伤史。应用理疗、封闭后稍缓解。查体:脊柱生理弯曲存在,L5~S1椎旁压痛并放射致双下肢麻木,双侧直腿抬高试验5 0°,阳性,加强试验阳性,双拇背伸肌力减弱,鞍区感觉无减退。CT示:L5~S1椎间盘突出症(中央型)。手术中行硬膜外麻醉(L1,2 )。术中见L5~S1黄韧带增厚,L5硬膜下中间有一1.5cm×2 .0cm圆形突出物,压迫硬脊膜,手术切除突出髓核,神经根管扩大,硬膜及神经根充分减压。术后1天出现双下肢肌力Ⅱ级、大小便失禁、肛门括约肌松弛,鞍区及双… 相似文献
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目的比较黑胸散白蚁对常见几种树皮的取食偏好,为更好地开展白蚁监测控制技术研究提供科学依据。方法室内设置装置观察取食不同树皮的白蚁数量和各处理发霉情况,并称量、计算白蚁对不同树皮的取食量。结果在室内条件下,黑胸散白蚁对桉树皮的相对反应率最高,白蚁累计达到458.33只,其次是杉树皮和松树皮;松树、桉树、梧桐、杨树等4种树皮在试验期间内未发生霉变;在9种树皮中,桉树皮的被食量最高,达到0.12 g。结论桉树皮可作为诱饵或者添加材料诱杀黑胸散白蚁,本研究为黑胸散白蚁的高效诱饵研制提供了参考。 相似文献