混合细胞瓶对临床标本中流行性感冒病毒和肠道病毒的分离检测

目的 比较犬肾细胞系(MDCK)、人喉表皮癌细胞(Hep-2)和非洲绿猴肾细胞(Vero)制备的MHV混合细胞与相应单一敏感细胞株对流行性感冒(流感)病毒、肠道病毒的分离结果.方法 流感样患者咽拭子标本接种MHV混合细胞和MDCK细胞,手足口病患儿咽拭子或粪标本接种MHV混合细胞和Vero细胞,观察病毒致细胞病变效应(CPE),采用多重反转录-聚合酶链反应(mRT-PCR)检测甲、乙型流感病毒和肠道病毒.结果 MDCK和Vero细胞的CPE较MHV混合细胞明显.138份流感病毒接种MHV混合细胞,分离出34株流感病毒,分离率为24.6％;MDCK细胞分离出流感病毒39株,分离率为28.3％.MHV混合细胞与MDCK细胞流感病毒分离率比较,差异无统计学意义(x2=1.92,P＞0.05).32株肠道病毒接种MHV混合细胞,分离出肠道病毒9株,分离率为28.1％;Vero细胞分离出12株肠道病毒,分离率为37.5％.MHV混合细胞与Vero细胞肠道病毒分离率比较,差异无统计学意义(x2 =3.00,P＞0.05).结论 MHV混合细胞CPE不如单一细胞易于观察;MHV混合细胞适用于生物性突发公共卫生事件中,可分离培养临床标本中甲型、乙型流感病毒和表现为呼吸道症状的肠道病毒.     

手足口病病原在自来水中的存活能力

目的 了解手足口病病毒在生活用自来水中存活情况.方法 2008年上海市及浙江省手足口病监测病例分离到的手足口病病毒中,选择5株肠道病毒(EV)71型、1株柯萨奇(Cox)病毒,分别混合含氯量1.0 mg/L的自来水;采用Vero细胞培养,细胞病变效应(CPE)观察,每日监测水中病毒存活情况.运用散点图分析水中病毒存活量下降趋势.结果 该6株手足口病病毒在初始含氯量1.0 ppm模拟出厂自来水中可以存活1个月以上,并持续有感染细胞能力,病毒株间活病毒存活能力有差别.结论 EV71型及Cox病毒在水中具有较强存活能力,手足口病流行期间,城市、农村及城乡结合部需要注意手足口病病原经水传播的途径.

Abstract：

Objective To evaluate the survivability of hand foot mouth disease(HFMD)virus,in tap water for daily use.Methods HFMD viruses were isolated from cases of HFMD in Shanghai and Zhejiang from in 2008.Six isolated strains (five subtype of enterovirus 71 and one coxackie virus)were selected in this study.These viruses were mixed with chloride 1.0 mg/L tap-water and then inoculated into Vero cells.The cytopathic effect (CPE)was checked everyday in order to survey the survivability of each virus strain.The decline of virus survivability was analyzed by scatter diagram.Results These six strains of HMFD virus could survive longer than one month in tap water with initial chloride concentration of 1.0 mg/L and still had celluar infectivity.The survivabilities were varied between viruses isolated from different HFMD cases.Conclusions The survivabilities of enterovirus 71 and coxackie virus stains are quite strong in water.Therefore,the transmission route of water-borne pathogens should be monitored in regions using tap water during HFMD epidemic period.     

上海某区儿童血清轮状病毒LLR型疫苗株的免疫水平

[目的]了解2012年上海部分0～5周岁儿童的血清轮状病毒LLR型中和抗体水平及不同年龄段儿童轮状病毒感染的情况,为疫苗的研究提供科学数据。[方法]在2012年6—8月上海市静安区儿保门诊部就诊的儿童中,筛选无发热、无轮状病毒感染疑似症状的健康儿童血清标本210份,采用微量中和试验方法检测儿童血清对轮状病毒LLR型疫苗株的中和抗体水平,并对检测结果进行统计学分析。[结果]210份0～5周岁儿童血清中,轮状病毒LLR型中和抗体阳性率为27.1%,中和抗体几何平均滴度（GMT）为1∶35.36;0～6个月婴儿血清中和抗体阳性率为16.0%,GMT为1∶28.72;7～11个月儿童血清中和抗体阳性率为2.5%,GMT为1∶25.88。1～2周岁儿童的中和抗体阳性率为20.0%,GMT为1∶30.78,2～3周岁儿童的中和抗体阳性率为20.0%,GMT为1∶32.99,该两年龄组（段）间差异无统计学意义。3～4周岁儿童的中和抗体阳性率为56.67%,GMT为1∶54.84,4～5周岁儿童的中和抗体阳性率为63.33%,GMT为1∶44.55,此两年龄组（段）儿童的阳性率和GMT均显著高于3周岁以下各年龄组,此两组间阳性率差异无统计学意义。[结论]0～3周岁儿童中和抗体水平较低,特别是7～11个月年龄组为最低,提示可能为轮状病毒感染的高危儿童群体。     

常用手消毒剂对人肠道病毒71型灭活效果的研究

目的了解常用手消毒剂对人肠道病毒71型(HEV71)的灭活效果。方法采用悬液定量试验法进行试验观察。结果 A类消毒凝胶和B类手部消毒液分别作用1min和5min,对HEV71灭活对数值均>3.0;C类医用复方手消毒剂分别作用1min和5min,对HEV71灭活对数值均>4.0;自制乙醇甘油消毒液作用1min,对悬液内HEV71灭活对数值达5.5。结论目前市场销售常用手消毒剂对人肠道病毒均能达到消毒效果,自制乙醇甘油(77%乙醇、2%甘油)手部消毒液对人肠道病毒的杀灭效果理想。     

Mixed cells in shell vials for detection of influenza viruses and enteroviruses from clinical specimens

Objective To evaluate shell vials of MHV,a combination of Madin-Darby canine kidney cells(MDCK),human epidermoid cancer cells(Hep-2) and African green monkey kidney cells(Vero), and conventional cell culture in detecting influenza viruses and enterovirus from     

流感监测中流感病毒优势株在犬肾细胞系（MDCK）细胞模型中竞争性复制的意义

 【摘要】目的 通过流感病毒优势株在犬肾细胞系（Madin Daby canine kidney cells,MDCK)细胞中竞争性复制,探讨季节性流感流行株感染、复制能力强弱对主导流行株的贡献。方法 在对2011年至2012年上海市闵行区季节性流感监测中,监测到流感样病例775例,确诊流感病例119例。选取2012年1月至2月流感病例中分离的3株B型和3株A/H3N2亚型流感流行株,两两交叉配对成9组,共同感染MDCK,细胞培养上清液抽提核酸,mRT-PCR扩增特异性产物。 结果 有7组共感染组合中A/H3N2 (210 bp)电泳条带逐渐变强、B型条带(390 bp)逐渐变弱至第3代完全消失,2组中A/H3N2与B的条带至第3代均明亮。 结论 流感病毒共感染竞争性复制结果与当时人群流感监测中优势株转换相符。该方法为探讨可能引起主导流行株在人群中变迁的原因提供了研究思路。     

实时细胞动态监测的流感病毒株耐药性研究

目的:了解实时细胞动态监测(RTCA)系统,由细胞病变导致金电极板电阻抗变化的研究;评价磷酸奥司他韦对上海地区不同亚型流感流行株体外抗病毒效果。方法:随机选取2009年-2010年上海地区流感不同亚型流行株,采用实时细胞动态监测(RTCA)系统和传统倒置显微镜观察细胞CPE方法,检测磷酸奥司他韦的抗病毒效果。结果:实时细胞动态监测(RTCA)系统通过病变细胞引起电极板的电阻抗变化的观察,结果连续、实时、客观、可信;磷酸奥司他韦对研究中选取的14株上海地区不同亚型流感流行株有抑制病毒感染细胞的效果。结论:实时细胞动态监测系统比较于传统观察CPE方法,获取的实验信息实时、客观、敏感,但是实验费用昂贵。磷酸奥司他韦(达菲)对上海地区不同亚型流感病毒具有较好的体外抗病毒效果。     

2010年上海地区肠道病毒71型分离株VP1区基因特征分析

目的 了解2010年上海地区手足口病患者中肠道病毒71型(EV71)分离株VP1区基因特征.方法 选取2010年不同时间的轻症与重症病例EV71分离株18株,对其抗原决定簇部位VP1区进行核苷酸序列测定、比对,并与美国国立生物技术信息中心公布的EV71 A、B、C各基因型分离株序列进行比对,构建系统发生树.结果 上...     

郑州市流感和呼吸道合胞病毒感染住院病例的抗生素使用及合理性评估

目的 描述河南省郑州市流感和呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染住院病例的抗生素使用情况,评估抗生素使用的合理性。 方法 采用前瞻性病例系列研究,2018年11月—2019年11月在河南省儿童医院与郑州市中心医院分别纳入儿童和成人急性呼吸道感染住院病例,收集人口学和临床资料,采集呼吸道标本,使用Real-time PCR法检测流感病毒和RSV,分析流感和RSV感染病例合并细菌感染、抗生素使用及其合理性。 结果 共检出669例流感和RSV感染住院病例,38.4%(252/656)合并细菌感染,13例无法判断细菌感染情况。97.9%的病例住院期间使用抗生素,第三代头孢菌素(77.0%)、大环内酯类(20.3%)、青霉素和β-内酰胺酶抑制剂复合制剂(15.5%)、喹诺酮类(9.9%)和碳青霉烯类(7.9%)为常用的种类。从入院到使用抗生素的时间间隔为1.0(1.0,1.0)d,抗生素使用持续时间为6.0(5.0,8.0)d。抗生素用药频度和总费用分别为2.4(1.3,6.0)DDDs和369.7(210.6,1 154.0)元/人。在655例使用抗生素的病例中,37.7%为合理使用,60.3%为不合理使用。 结论 郑州市流感和RSV感染住院病例抗生素使用的范围广、强度大、费用负担重,预防性或无指征用药等抗生素不合理应用普遍存在,抗生素管理仍待加强。