柯萨奇-腺病毒受体在小鼠心肌组织中的表达

目的 :观察柯萨奇 腺病毒受体 (CAR)在不同年龄、性别小鼠心肌组织中的表达情况。方法 :采用免疫组化和Western Blotting技术 ,半定量分析胚胎期 18d ,生后 1d ,4、8、12周雄性小鼠及 4周雌性小鼠心肌组织中的CAR含量。结果 :免疫组化半定量分析示胚胎期 18dCAR表达最高 ,生后 1d(新生鼠 )及 4周龄 (幼年鼠 )表达量依次降低 ,8周龄 (成年鼠 )基本不表达 (P <0 .0 5 ) ,12周龄 (老年鼠 )低表达 ,与 8周龄比较 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 1) ,并且 ,4周龄雄性小鼠和雌性小鼠相比 ,CAR表达量雄性高于雌性 (P <0 .0 1) ,Western Blot ting结果示CAR表达变化趋势与免疫组化结果相一致。 结论 :小鼠心肌组织中CAR的表达具有明显的时序性 ,而且性别对CAR的表达有影响。     

特异性的VP1-siRNA对CVB3复制抑制作用的研究

目的 研究特异性的CVB3-VP1 siRNA对CVB3体外复制的抑制作用的量效关系与时效关系。方法 CVB3感染HeLa细胞，利用脂质体介导将CVB3-VP1siRNA转染HeLa细胞，用RT-PCR法检测CVB3-VP1 RNA水平，免疫荧光检测CVB3-VP1蛋白的表达水平。结果 60pmol／LCVB3-VP1 siRNA是抑制CVB3 RNA及VP1表达的最佳剂量；在转染后的48h，siRNA对CVB3-VP1的抑制作用达到最佳状态。结论 特异性的CVB3-VP1 siRNA对CVB3-VP1蛋白表达水平及CVB3-RNA复制水平呈明显的剂量依赖关系和时效关系，转染后48h呈现出完全抑制作用。     

苦瓜素对小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎caspase 3作用的研究

目的观察苦瓜素对病毒性心肌炎心肌组织caspase 3活性、基因转录及相应蛋白质表达的影响,探索苦瓜素治疗病毒性心肌炎的机制。方法实验小鼠随机分为苦瓜素治疗组、生理盐水对照组及正常对照组和正常小鼠苦瓜素处理组。苦瓜素剂量为25 mg.kg-1.d-1,1次/d,疗程7 d。第15天后取小鼠心肌进行caspase 3活性测定、HE染色心肌病理检查、心肌细胞凋亡检查、RT-PCR检测、caspase 3,mRNA转录水平,免疫组化与免疫印迹测定caspase 3蛋白表达。结果生理盐水对照组小鼠心肌组织caspase 3活性明显增高、mRNA转录水平与相应蛋白质表达水平亦显著增加;苦瓜素治疗组caspase 3活性明显抑制,caspase 3 mR-NA转录水平明显低于生理盐水对照组(0.012±0.008 vs 0.043±0.015,t=4.37,P<0.01),凋亡细胞明显减少。结论苦瓜素通过抑制caspase 3基因转录与蛋白质表达、抑制其活性,对Balb/c小鼠CVB3病毒性心肌炎具有明显的治疗作用。     

柯萨奇-腺病毒受体在小鼠病毒性心肌炎心肌表达及其与心肌损害关系

目的　探讨柯萨奇 腺病毒受体 (CAR)在病毒性心肌炎 (VM )发病中的作用。方法　 30只小鼠随机分为实验组和对照组 ,所有小鼠于感染后d10处死 ,取其心脏 ,采用Westernblotting及免疫组织化学技术检测心肌细胞CAR表达水平 ,并检查心肌病理变化 ,并对CAR表达水平与心肌的病变程度行相关性分析。结果　Westernblotting显示 ,实验组存活小鼠心肌中CAR表达水平明显高于对照组 ;免疫组织化学检测显示 ,实验组小鼠心肌CAR抗原免疫反应明显增强 (t=4 .94　P <0 .0 1) ,且其CAR表达水平与心肌病变积分呈显著正相关(r =0 .91　P <0 .0 1)。结论　CAR表达水平增加可能是病毒性心肌炎发生发展的重要因素     

小儿败血症41例临床特点及病原学分析

目的分析小儿败血症的临床特点及病原学检查结果和药物敏感情况,指导临床治疗.方法对41例败血症患儿的起病情况、细菌培养和药物敏感实验进行分析.结果临床首发症状为发热（65.9%）、腹泻（17.1%）和黄疸（14.6%）,新生儿（14/41）和婴儿（13/41）多发;培养细菌以葡萄球菌为主,其中表皮葡萄球菌（39.0%）和金黄色葡萄球菌（17.1%）占前两位;检出菌大多数对万古霉素敏感（93.8%）,其次是克林霉素（50.0%）.结论对反复发热或腹泻以及黄疸的患儿应早期行血培养检查,对可疑为败血症的患儿,早期以经验用药为主,待血培养检出细菌后,再根据药敏调整治疗方案.     

普罗布考对小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎的治疗作用

目的:观察普罗布考对小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎的治疗作用。方法:对60只Balb/c系小鼠随机,分为病毒性心肌炎组(A组),普罗布考低剂量干预组(B组),普罗布考高剂量干预组(C组),正常对照组(D组)4组,每组15只,观察各组小鼠的生存情况及测量各组小鼠不同感染时点的血清肌钙蛋白Ⅰ。结果:A组生存率为60%,B组生存率为80%,C组生存率为86.7%,D组生存率100%。血清肌钙蛋白随着小鼠生存率的提高而下降。结论:普罗布考对小鼠病毒性心肌炎有治疗作用。     

Cathepsin B与扩张型心肌病发病关系的初步探讨

目的　探讨溶酶体中CathepsinB与扩张型心肌病发病的关系。 方法　收集我院因终末期扩张型心肌病行心脏移植术的受体标本 2 0例为实验组及脑死亡 3h内排除心脏疾患的心脏标本 5例为正常对照组 ,通过免疫组织化学 ,RT -PCR和WesternBlotting等方法自不同水平对CathepsinB进行检测。 结果　发现两组心肌组织中的CathepsinB均有阳性信号 ;RT PCR半定量检测CathepsinBmRNA的表达示扩张型心肌病组CathepsinB与 β actin条带面积积分比值明显高于对照组 ,分别为 0 .92 6± 0 .30、0 .4 4 2± 0 .2 5 ,两组间有显著差异 (P <0 .0 1) ;同时从蛋白水平检测CathepsinB的表达 ,显示扩张型心肌病组CathepsinB与 β actin条带面积积分比值明显高于正常组 ,分别为 0 .4 5 4± 0 .0 8及 0 .131± 0 .0 3,两组间有显著差异 (P <0 .0 1)。结论　与对照组相比 ,扩张型心肌病心肌标本中CathepsinBmRNA与蛋白质的表达量均明显增高 ,提示CathepsinB可能参与了扩张型心肌病的发生、发展过程 ,并推测其在扩张型心肌病心肌凋亡的过程中可能发挥了重要的作用     

柯萨奇-腺病毒受体基因-968G/A多态性与柯萨奇病毒性心肌炎的关系

目的 探讨柯萨奇-腺病毒受体(CAR)基因.968G/A多态性与中国南方汉族人群柯萨奇病毒性心肌炎的关系.方法 收集病毒性心肌炎患儿280例,将其中CVB-IgM阳性130例作为心肌炎组,并选择同期130名健康儿童作为对照组,采用聚和酶链反应-限制性内切酶片断长度多态性(PCR-RFLP)、DNA测序等方法 检测2组CAR基因-968G/A多态性,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定两组血清CAR水平.结果 心肌炎组GG基因型和G等位基因频率均显著高于对照组(P<0.05).心肌炎组血清CAR水平明显高于对照组(P<0.01),CAR基因-968G/A多态位点中含G等位基因(GG+GA)者血清CAR水平和CVB感染率均显著高于非G等位基因(AA)携带者(P均<0.05).结论 CAR基因-968G/A多态性可能与中国南方汉族人群柯萨奇病毒性心肌炎有关,G等位基因是柯萨奇病毒性心肌炎的易感基因.     

黄芪甲甙在Balb/C小鼠CVB3病毒性心肌炎中抗凋亡作用的机制

目的 观察黄芪甲甙对Balb/C小鼠CVB3病毒性心肌炎心肌细胞凋亡的影响,探讨黄芪甲甙抗心肌细胞凋亡的可能机制.方法 Balb/C小鼠50只随机分5组(每组10只).空白对照组:腹腔无菌注射不含病毒的Eagle's培养基0.1 mL,在腹腔注射病毒培养基30 min后,以生理盐水0.1 mL灌胃,共7天;病毒性心肌炎对照组:小鼠每只腹腔注射0.1 mL内含1×105TCID50 CVB3 的Eagle's培养基,在腹腔注射含病毒的Eagle's培养基30 min后,以生理盐水0.1 mL灌胃,共7天;黄芪甲甙低、中、高剂量干预组:在腹腔注射病毒30 min后,用黄芪甲甙[具体剂量分别为0.07、0.2、0.6 mg/(kg·d)]0.1 mL灌胃,共7天.采用缺口末端标记法(TUNEL)检测心肌凋亡细胞,免疫组织化学检测Bcl-2、Bax蛋白的表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Bcl-2、Bax基因的表达,并利用图像分析系统测量平均光密度值进行半定量分析.结果 与空白对照组比较,病毒性心肌炎对照组心肌细胞凋亡发生率增高;抑制凋亡因子Bcl-2基因及蛋白表达下降,而促进凋亡因子Bax基因及蛋白表达增强,Bcl-2/Bax mRNA比值降低.与病毒性心肌炎对照组比较,黄芪甲甙高剂量干预组能降低CVB3病毒性心肌炎心肌细胞的凋亡指数,Bcl-2基因及蛋白水平表达增强,Bax基因及蛋白水平表达下降.结论 黄芪甲甙在Balb/C小鼠CVB3病毒性心肌炎中抗凋亡作用机制可能是促进了抑制凋亡基因Bcl-2表达,抑制了促凋亡Bax基因表达.     

更昔洛韦治疗儿童EB病毒性脑炎20例

目的 探讨更昔洛韦治疗儿童EB病毒性脑炎的疗效.方法 确诊40例病人随机分为治疗组:更昔洛韦每次5 mg/kg静滴(每次静滴大于1小时),间隔12 h 1次,连用14天;对照组:阿昔洛韦每次5 mg/kg静滴,间隔8 h 1次,连用14天.两组均给予降颅压、止惊等常规治疗.结果 治疗组临床痊愈15例,好转5例,有效率100%;时照组临床痊愈5例,好转5例,无效10例,有效率50%.结论 更昔洛韦治疗儿童EB病毒性脑炎效果明显,与阿昔洛韦组有效率比较差异有显著性(P＜0.01).