肺毛霉菌病的再认识

肺毛霉菌病是由毛霉菌引起的条件致病性感染,好发于免疫抑制人群.起病急,进展快,临床表现无特异性,可表现为发热、咳嗽、呼吸困难、胸痛等.肺部CT表现包括渗出、实变、结节、空洞、胸腔积液.确诊主要依靠支气管镜或肺穿刺病理活检.尽早采用外科手术或抗真菌药两性霉素B治疗能明显改善预后.     

小鼠肺微血管内皮细胞的培养鉴定及其血管形成功能的研究

目的: 建立一种简单有效的小鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)原代培养方法,并对其体外血管形成功能进行研究。方法: 取小于1周龄的C57BL/6小鼠的肺组织边缘,采用组织贴块法培养原代PMVECs。经形态学观察、免疫细胞化学鉴定后,以每孔2×10⁴的密度接种于铺有基质胶的96孔细胞板,在倒置显微镜下观察(2 h 1次)其24 h 体外血管形成过程。结果: 镜下可见原代培养的PMVECs呈梭形或多角形,单层融合呈铺路石样。细胞抗Ⅷ因子相关抗原(ⅧF-Ag)染色阳性。免疫荧光显微镜下可见大部分细胞摄取四甲基吲哚碳花青标记的乙酰化低密度脂蛋白(DiI-Ac-LDL),胞质呈现红色荧光,细胞膜表面与异硫氰酸荧光素标记的异植物血凝素(FITC-BSI)结合,呈现黄绿色荧光。PMVECs接种4~6 h后出现明显的管腔结构,10~12 h呈蜂窝状结构,此后管腔结构逐渐减少。结论: 组织贴块法培养原代PMVECs操作简单,细胞得率和纯度高,并可在体外成功建立血管形成模型进行相关研究。