miR-1293促进非小细胞肺癌耐药分子机制探讨

目的microRNA与非小细胞肺癌耐药性密切相关,但miR-1293在非小细胞肺癌中的作用机制仍不清楚。本研究探讨miR-1293调控Akt信号通路促进非小细胞肺癌耐药的分子机制。方法培养人肺癌A549与耐药细胞株A549/DDP,RT-qPCR检测miR-1293和抑癌基因RUNX3 mRNA表达,蛋白质印迹检测RUNX3蛋白表达。采用脂质体法将miR-1293抑制物(miR-1293inhibitor)和阴性对照RNA(miR-NC)转染A549/DDP。MTT检测细胞IC50;流式细胞仪检测细胞凋亡;蛋白质印迹检测凋亡相关蛋白Bcl-2和RUNX3;荧光素酶报告基因检测miR-1293能否调控RUNX3;qPCR检测miR-1293和RUNX3的mRNA表达;蛋白质印迹检测MDR1/ABCB1、ABCC1、RUNX3、Akt和p-Akt蛋白表达。结果A549/DDP细胞对DDP的耐药指数为7.23。miR-1293在耐药细胞株A549/DDP的表达(3.89±0.08,W=0.946,P=0.698)与A549组(1.01±0.05,W=0.938,P=0.622)相比升高,差异有统计学意义,t=74.78,P<0.001;而RUNX3 mRNA和RUNX3蛋白在耐药细胞株A549/DDP的表达与A549组相比降低,tmRNA=7.74,t蛋白=20.04,均P<0.001。与miR-NC比较,miR-1293 inhibitor组IC50降低,t=94.49,P<0.001。miR-1293 inhibitor组MDR1/ABCB1、ABCC1蛋白表达低于miR-NC,tMDR1/ABCB1=10.61,tABCC1=39.57,均P<0.001。与miR-NC比较,miR-1293 inhibitor组细胞凋亡增加,t=7.15,P<0.001。促凋亡蛋白RUNX3在miR-1293 inhibitor组表达更高,t=33.63,P<0.001;凋亡抑制蛋白Bcl-2表达更低,t=11.62,P<0.001。荧光素酶报告实验显示,在野生型RUNX33′UTR中,miR-1293 inhibitor的荧光素酶活性(6.24±0.04,W=0.911,P=0.399)高于miR-NC(3.21±0.07,W=0.879,P=0.221),t=92.06,P<0.001;提示RUNX3是miR-1293靶基因。miR-1293 inhibitor组RUNX3蛋白表达高于miR-NC,t=17.75,P<0.001;Akt1、p-Akt低于miR-NC组,tAkt1=67.55,tp-Akt=16.98,均P<0.001。结论在耐药细胞株A549/DDP中miR-1293高表达,抑制细胞凋亡,促进细胞耐药,其机制可能与靶向下调RUNX3,促进Akt信号通路激活有关。     

胸水比血清癌胚抗原比值对恶性胸腔积液的诊断价值

目的分析胸水/血清癌胚抗原(CEA)比值在恶性胸腔积液中的诊断价值。方法 2017-01-01至2018-12-31因"胸腔积液待查"入院患者92例纳入研究,其中50例诊断为恶性胸腔积液,42例诊断为良性胸腔积液,测定胸水CEA、血清CEA并计算胸水/血清CEA比值。结果胸水/血清CEA比值的截断值为1.26时,其对恶性胸腔积液诊断的敏感度为72.1%,特异性为88.1%。结论胸水/血清CEA比值是预测恶性胸腔积液有效的临床工具。     

联合检测血清和胸腔积液Crk样蛋白、CEA在恶性胸腔积液诊断中的价值

目的评价联合检测血清和胸腔积液中Crk样蛋白(CRKL)、癌胚抗原(CEA)对恶性胸腔积液的诊断价值。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测47例恶性胸腔积液和46例良性胸腔积液患者的血清和胸腔积液CRKL、CEA水平。结果恶性胸腔积液组血清CRKL显著高于良性胸腔积液组(P0.001),恶性胸腔积液组胸腔积液CRKL浓度显著高于良性胸腔积液组(P0.001);恶性胸腔积液组血清CEA显著高于良性胸腔积液组(P0.001),恶性胸腔积液组胸腔积液CEA浓度显著高于良性胸腔积液组(P0.001)。ROC曲线分析得血清及胸腔积液CRKL临界值分别为2.04ng/mL、3.04ng/mL,其敏感度分别为80.9%、74.5%;特异性分别为80.4%、84.8%。联合检测血清及胸腔积液CRKL的灵敏度为80.9%,特异性为80.4%;联合检测胸腔积液CRKL及CEA的灵敏度为89.4%,特异性为95.7%;联合检测四者的灵敏度为87.2%,特异性为97.8%。结论血清和胸腔积液中CRKL可作为鉴定良恶性疾病的重要辅助指标;胸腔积液CRKL联合胸腔积液CEA检测可提高恶性胸腔积液的诊断价值。     

TNF-α对肺微血管内皮细胞ERM蛋白表达的研究

目的 观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)表达埃兹蛋白-根蛋白-膜突蛋白(ezrin-radixin-moesin,ERM)及磷酸化ERM蛋白(p-ERM)的影响,并初步探讨Rho激酶(ROCK)与ERM蛋白磷酸化的关系.方法 体外培养大鼠PMVEC,随机(随机数字法)分为TNF-α量效组(0、0.1、1、10 μg/L TNF-α与PMVEC孵育60 min)、TNF-α时效组(10 μg/LTNF-α分别与PMVEC孵育0、15、30、60、90、120、180 min)和ROCK抑制剂(Y-27632)干预组:分别以10μg/L的TNF-α和30 μmol/L Y-27632+ 10 μg/LTNF-α与PMVEC孵育60min.Western印迹检测ERM蛋白及p-ERM相对表达量.采用SPSS 16.0软件进行分析,多组变量间比较采用单因素方差分析,以P＜ 0.05为差异具有统计学意义.结果 Western印迹检测到大鼠PMVEC均表达ERM蛋白和p-ERM,量效组p-ERM表达量随TNF-α浓度(0、0.1、1、10 μg/L)增加逐渐升高,分别为0.648±0.102、0.728±0.082、0.926±0.121、1.245±0.134(均P=0.000).时效组p-ERM相对表达量于15 min开始上升(0.777±0.151),90 min达高峰(1.295±0.176),之后渐下降,120 min (0.802±0.139),180 min仍维持较高水平(0.769±0.128),分别与未刺激0 min组(0.631±0.123)比较,P=0.004,0.000,0.001,0.016.ROCK抑制剂预处理PMVEC后再给予TNF-α刺激,p-ERM相对表达量(0.634±0.112)较单独TNF-α刺激组(0.875±0.164)显著减少(P =0.002),而较单独ROCK抑制剂组(0.661±0.108)和未处理组(0.654±0.125)差异无统计学意义(分别为P=0.973,P=0.900).结论 TNF-α诱导大鼠PMVEC中的ERM蛋白磷酸化表达增加,ROCK参与其磷酸化调控.     

可溶性人基质裂解素2和中性肽链内切酶与呼吸系统疾病的研究进展

正可溶性人基质裂解素2(soluble suppression of tumorigenicity-2,s ST2)及中性肽链内切酶(neprilysin,NEP)作为新的生物标记物,近年备受关注。研究认为s ST2、NEP在心力衰竭中的应用价值与前体脑钠肽(N-terminal prohormone B-type natriuretic peptide,NT-Pro BNP)相当。2013年ACCF/AHA指南提出s ST2是提示心力衰竭心肌纤维化和心室重构的指标之一;另外,两种蛋白还参与神经系     

尿激酶治疗多房包裹性恶性胸腔积液的疗效观察

目的观察尿激酶治疗包裹性恶性胸腔积液的临床疗效。方法收集73例肺腺癌伴包裹性恶性胸腔积液患者,随机分为两组,尿激酶组(n=37)经导管向胸腔内注入尿激酶25万U,连续3-5个周期;对照组(n=36)患者仅导管充分引流胸水。所有患者待肺完全复张后给予博莱霉素6万U胸腔注射,行胸膜固定术。比较两组患者一般特征、胸水引流量、肺复张情况和胸膜固定术成功率等;结果两组患者一般特征无显著差异,其中尿激酶组86%患者(32例)肺完全复张,对照组61%(22例)患者肺完全复张,组间差异显著(P0.05)。两组的胸膜固定术成功率无差异(P0.05)。结论胸腔内注射尿激酶可显著增加包裹性恶性胸腔积液患者的肺复张率,可作为恶性胸腔积液患者的常规处理方法。     

急性肺栓塞患者严重程度指数与血清钠水平分析

目的分析急性肺栓塞(APE)患者肺栓塞严重程度指数(PESI)与血清钠水平的病情评估价值和关系。方法回顾性分析经CT肺动脉造影确诊的APE患者临床资料。结果 22例患者入选,PESI低危组均为低危APE,PESI中、高危组的中、高危APE发生率为66.67%,与PESI低危组比较差异显著;共6(27.27%)例APE患者出现低钠血症,其中2(33.33%)例在诊断一月内死亡,低钠血症组和非低钠血症组中、高危APE发生率比较无显著性差异;APE患者血清钠水平与PESI相关系数为-0.318(P=0.149)。结论PESI而非低钠血症对APE病情严重性具有指导价值,合并低钠血症的APE患者一月内死亡率高。     

成人输液厅药品不良反应分析与护理简

目的 分析成人输液厅药品的不良反应（adverse drug reaction,ADR）与护理应对策略.方法 对门诊输液厅发生ADR的38例患者的临床资料进行分析.结果 成人输液厅发生的ADR以抗生素类为主,共26例（64.42%）,其中又以青霉素、头孢类为主,共17例（44.74%）,其他抗生素依次为喹诺酮类8例（21.05%）,大环内酯类1例（2.63%）.中成药及其他药物发生ADR分别为10例（26.32%）和2例（5.26%）.输液后0～10 min发生ADR共25例（65.79%）,非工作时间发生ADR共23例（60.53%）.结论 加强成人输液厅ADR报告和监测工作、分析有价值的信息,提高护理人员对ADR的预防意识和处理技能可以保证安全用药和减少护理差错事故.     

cAMP应答元件结合蛋白与内皮细胞的研究进展

cAMP应答元件结合蛋白（cAMPresponse element binding protein,CREB）是第一个被发现通过磷酸化起调控作用并作为细胞内第二：信使的转录因子,它能调节包括内皮细胞在内的多种细胞一系列生命活动,如细胞增殖、分化、生存和凋亡等。本文就CREB结构、部分生物学功能及其参与的内皮细胞功能进行相关综述。