解脲脲原体与新生儿感染

目的确定解脲脲原体（Ｕｕ）戌新生儿肺炎等感染的关系，方法用间接血弟试验（ＩＨＡ）检测妊娠晚期孕妇血清Ｕｕ抗体，并对胎盘做Ｕｕ分离培养，用酶联附试验（ＥＬＩＳＡ）检测部分胎儿脐血清Ｕｕ－ＩｇＭ抗体。并对孕妇血清Ｕｕ抗体阳性组和阴性组织新一儿感染情况进行比较。结果１６０名孕妇血清中８１例Ｕｕ抗体阳性，从其中１３例的胎盘中分离培养出Ｕｕ。用ＥＬＩＳＡ法检测５例胎盘Ｕｕ阳性的新生儿脐血Ｕｕ－ｌｇＭ，３例阳     

支原体感染的母婴传播和新生儿肺炎

支原体感染的母婴传播和新生儿肺炎郭章溉，郭素琼，吴连方，孙红妹，王丽红尿素支原体（Ｕｕ）是生殖道常见的支原体之一，国外文献报道Ｕｕ可上行侵袭妊娠子宫引起绒毛膜羊膜炎，导致自然流产、早产、低出生体重儿，胎膜早破和新生儿肺炎、脑炎。为了解我国孕妇Ｕｕ感染...     

肺炎支原体对大环内酯类抗生素耐药机制的研究近况

肺炎支原体是社区获得性肺炎的主要病原体。大环内酯类抗菌药物是治疗儿童肺炎支原体感染的首选药物。近年来我国耐大环内酯肺炎支原体比例有所下降,但仍处于高水平。耐药肺炎支原体感染造成患者发热时间、住院时间延长,并有更高的并发症发生率和抗生素治疗方案改变率,因此对肺炎支原体耐药机制的研究还需进一步深入。肺炎支原体对大环内酯类抗生素耐药机制主要与抗生素作用靶点突变、抗生素作用靶点修饰、药物主动外排、酶性失活有关。     

2015年春季无锡地区儿童肺炎支原体及呼吸道常见致病菌的分析

目的 了解无锡地区下呼吸道感染住院患儿肺炎支原体耐药情况及呼吸道常见致病菌的分布,为预防和治疗提供依据。方法 采用PCR法检测患儿咽拭子中的肺炎支原体及其耐药基因,采用real-time PCR法检测其他呼吸道常见致病菌。结果 共检测标本288例,检出病原菌59例,阳性检测率为20.5%。细菌检出率随年龄增长有下降趋势,<2岁儿童阳性检出率最高,且女性高于男性。病原菌构成比分别为:肺炎支原体28.8%(17/59),KP为30.5%(18/59),SA为20.3%(12/59),PA为20.3%(12/59),SE为15.3%(9/59),HI为10.2%(6/59),SP为5.08%(3/59),LP为5.08%(3/59),EC,CP,TB均为0例(0%)。其中肺炎支原体大环内酯类耐药率为88.2%,10例存在合并感染。结论 无锡地区住院患儿下呼吸道感染的病原菌以肺炎支原体和肺炎克雷伯杆菌为主,且大环内酯类耐药率较高。     

肺炎支原体重组P1蛋白抗体研究

目的研制针对肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)主要粘附蛋白-P1蛋白的特异性抗体。方法用纯化后重组P1蛋白免疫BALB/c小鼠,获得多克隆抗体(Polyclonal Antibody,PcAb),通过传统的杂交瘤技术制备抗P1重组蛋白单克隆抗体(Monoclonal Antibody,McAb),采用ELISA和IFA法对单抗和多抗进行反应性和特异性检测。结果ELISA法检测P1重组蛋白抗原性显示,P1蛋白与Mp抗血清有较好的反应性,蛋白敏感性大于1ng/ml;在重组P1蛋白免疫小鼠获得的PcAb与Mp的反应中,检测到的抗体滴度可达到1∶1600;获得针对Mp重组P1蛋白的特异性McAbs2株,在ELISA检测中均与P1抗原有较好的反应特异性,抗体滴度可达到1∶800～1600;IFA结果显示,上述PcAb和McAbs均与Mp有较好反应性,与生殖支原体等无交叉反应。结论本研究选取的重组P1蛋白具有较好的免疫原性;其特异性PcAb和McAbs与Mp有较好的特异性,为临床Mp感染的抗原快速、早期诊断方法的建立打下了基础。     

2011年夏季北京地区儿童腹泻病原菌监测结果分析

目的监测分析2011年夏季北京地区儿童腹泻主要病原菌,为该地区儿童腹泻病原的快速诊断与防治提供依据。方法收集2011年夏季在该院感染消化科就诊的腹泻患儿粪便标本,提取粪便标本DNA,设计特异性引物建立PCR方法对易导致儿童腹泻的最常见的3种病原菌进行检测,部分阳性结果测序验证,并与以往腹泻病原菌监测结果进行比较分析。结果在259例腹泻患儿中,总病原菌的检出率为69%,其中致腹泻型大肠杆菌属检出率为64%,志贺菌属检出率为15%,沙门菌属检出率为4.2%;男女儿童致病菌检出率、各年龄组间和急慢性腹泻天数比较差异均无统计学意义。本监测结果显示,致腹泻型大肠杆菌属是目前北京市引起儿童夏季腹泻的主要病原菌,其次为志贺菌属。结论 (1)2011年夏季北京地区引起儿童腹泻的主要肠道病原菌种类发生了明显的变化,以致腹泻性大肠杆菌属为主。(2)该研究建立的快速PCR法可检测多种儿童腹泻易感病原菌。     

肺炎支原体P1黏附因子主要抗原表位的表达及其临床应用研究

目的 探索肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)P1蛋白作为抗原成分在临床血清抗体检测中的应用.方法 通过生物信息学分析P1基因主要抗原决定簇,选择其分值较高的部位进行原核表达、纯化,并进行Western blot鉴定,用纯化后的蛋白免疫小鼠,评价其免疫原性,同时用其作为抗原,采用ELISA方法检测肺炎支原体患儿血清抗体并与全菌体抗原进行比较.结果 成功构建了pET-28C-P1-534原核表达载体,经表达、纯化后获得了相对分子质量为26×103的融合蛋白;Western blot检测其能与Mp阳性血清发生特异性反应;利用纯化的重组蛋白免疫小鼠,能诱导小鼠产生特异性免疫应答,抗体滴度可达 1∶2000;用此蛋白作为抗原成分检测患儿血清,其敏感性和特异性分别为85.00%及97.67%.结论 重组表达的P1-534蛋白具有良好的免疫原性,作为新的抗原成分其敏感性和特异性优于全菌体抗原,为肺炎支原体抗原成分及其蛋白保护作用的研究奠定了基础.

Abstract：

Objective To study the application of P1 adhesin protein epitopes in diagnosis of Mycoplasma pneumoniae(Mp) infected patient. Methods The major epitope(P1-534) of P1 adhesin protein were predicted by ProPred and ANTIGENIC according to its primary structure. The high value fragment was cloned into a constructed recombinant vector. The gene was induced to express fusion protein in E. coli host strain BL21(DE3) and the fusion protein was identified by Western blot. BALB/c mice were immunized with purified protein to test its immunogenicity. Then the purified protein was used as antigen to test the serum of Mp infected patient by ELISA, and compared with the Mp whole cell antigen. Results The P1-534 protein was successfully expressed and purified. ELISA data showed that P1-534 protein could elicit high levels of IgG in immunized mice, the sensitivity and specificity of P1-534 were determined to be 85.00% and 97.67%, while the Mp whole cell antigen were 72.50% and 74.42%. Conclusion The results conformed that the recombinant epitope has certain immunogenicity,and its sensitivity and specificity are better than Mp whole cell antigen. P1-534 protein can be used as an antigen for immunodiagnosis of Mp infection.     

单克隆抗体反向间接血凝试验检测支原体

培养细胞感染支原体仍然是某些实验室的严重问题,感染率达6％-26％或更高。猪鼻支原体(M·hyorhinis).口腔支原体(M·orale),精氨酸支原体(M·arginini)和莱氏支原体(M·Laidlawii或Acholeplasma Laidlawii)占感染细胞支原体的95％以上,其中猪鼻支原体感染率最高,占检出支原体的30％～39％。诊断支原体感染采用包括分离培养、DNA染色、血清学方法及DNA探针、PCR等方