牛分枝杆菌mpb51-mpb70融合基因的原核表达与抗原活性初步鉴定

目的 通过获得牛分枝杆菌保护性抗原MPB51、MPB70的融合蛋白MPB51-MPB70,以提高单一蛋白的抗原性。方法 采用重叠拼接PCR技术将牛分枝杆菌mpb51与mpb70基因融合,获得融合基因mpb51-mpb70,克隆至pMD19中,构建重组质粒pMD-51-70。酶切、纯化后连接至pET28a(+)中,构建重组表达质粒pET-51-70。通过SDS-PAGE和Western blotting分析、鉴定融合蛋白的表达及抗原性。以间接ELISA比较MPB51、MPB70、MPB51-MPB70的抗原性。结果 表达、纯化了45 ku的融合蛋白MPB51-MPB70,并与牛结核血清发生特异性反应,且比单一蛋白反应性强。结论 成功地获得了具有良好抗原性的牛分枝杆菌融合蛋白MPB51-MPB70。     

结核活载体疫苗的研究进展

目前,用于预防结核病的疫苗仍然是卡介苗(BCG),免疫效果不理想,原因颇为复杂;随着结核耐药菌株的出现,加上艾滋病感染与发病的增加,导致结核病发病人数逐年增多,所以研制新型结核病疫苗迫在眉睫。本文对近几年结核活载体疫苗的研究成果进行总结,为后续研究提供参考。