重组人组织激肽释放酶基因转染人脐静脉内皮细胞

目的探讨重组人组织型激肽释放酶(HK)基因腺相关病毒载体(rAVV/HK)对体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)作用.方法将HK基因定向克隆入腺相关病毒质粒pAAV-MCS中,形成重组腺相关病毒(rAAV-HK)质粒,经聚合酶链反应(PCR)检测和DNA测序后,将rAAV-HK、pAAV-Helper和pAAV-RC 3种质粒通过脂质体共转染293细胞,包装成带有HK目的基因的重组rAVV/HK,采用β半乳糖苷酶原位染色法测定报告基因rAVV/LacZ在HT1080中的表达,间接计算病毒滴度,并观察转染基因在传代细胞中的表达.在相同的条件下体外分别培养HUVECs(对照组)和rAVV/HK转染的HUVEC(HK转染组)48 h,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测两组HUVECs HK mRAN的表达,并利用硝酸还原酶法和分光光度法分别检测两组HUVECs一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性.结果 rAVV/HK病毒滴度为6.2×107个/mL,LacZ基因能够在第一传代和第六代HT1080细胞内稳定持续表达.与对照组比,HK转染组HUVECs HK mRNA表达增加(P<0.001);而且HK转染组HUVECs细胞培养液中NO的含量和NOS活性明显增高,P值分别<0.01和<0.05.结论 HK基因通过重组腺相关病毒载体可成功转染体外培养的HUVECs,使其HK mRNA表达增加,NOS活性和NO含量升高,此结果为基因治疗人类血管内皮细胞异常提供客观依据.     

血管紧张素转换酶醛固酮合酶α-内收蛋白基因多态性与肾损害的关系

目的 研究血管紧张素转换酶(ACE)基因I/D、醛固酮合酶(CYP11B2)基因-344T/C和α-内收蛋白(α-adducin)基因460G/T多态性与肾损害的关系. 方法 应用聚合酶链式反应(PCR)和限制性片段长度多态性(RFI,P)技术检测604例血压正常者及1080例血肌酐(Cr)<2 mg/L高血压患者的ACE、CYPllB2、α-adducin基因多态性.用Cockcroft-Gault(CG)公式计算的内生肌酐清除率(Ccr)评价肾功能,分别将血压正常和高血压组分为肾功能正常组(Ccr≥60 ml/min)及肾损害组(Ccr<60 ml/min). 结果 经方差分析、列联x2和x2分割检验表明,ACE、CYPlIB2和基因各自的基因型分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡.血压肾功能正常、血压正常肾损害、高血压肾功能正常与高血压肾损害4组比较:血压正常肾损害组和高血压肾损害组年龄大于血压肾功能正常组和高血压肾功能正常组,分别为(72.7±11.4)岁、(70.5±10.1)岁与(57.4±11.1)岁和(58.0±10.1)岁(均为P<0.01),而血压正常肾损害组与高血压肾损害组、血压肾功能正常组与高血压肾功能正常组问比较,差异无统计学意义(P>0.05).ACE-DD基因型分布频率在高血压肾损害组最高为22.6%(57/252),α-adducin-TT基因型分布频率在血压肾功能正常组最低为13.3%(68/512),分别与其他3组比较,差异有统计学意义(均为P<0.01),其他3组基因型分布频率比较,差异无统计学意义(均为P>0.05).CYP11B2各基因型的分布频率4组比较,差异无统计学意义(均为P>0.05). 结论 随增龄,肾功能异常增加,ACE-DD基因型与高血压肾损害相关,α-adducin-TT基因型与高血压和肾损害均相关,但未发现CYP11B2基因多态性与肾损害的关系.     

噻嗪类利尿剂、氯沙坦及其复方制剂对高血压患者的血清尿酸水平的影响

目的 观察原发性高血压病(EH)患者高尿酸血症的流行情况,以及噻嗪类利尿剂、血管紧张素受体拮抗剂氯沙坦和氯沙坦+氢氯噻嗪6周降压治疗后EH患者血清尿酸(SUA)和电解质的变化.方法 收集福州4家医院近3年连续的EH患者共1080例,其中男女之比662:418,平均年龄(60.9±12.3)岁,治疗前后血压记录完整者1000例,肾功能和电解质完整者600例.结果 EH患者合并高尿酸血症的发生率为25.83%(279/1080),与EH组比较,EH合并高尿酸血症组患者体质指数、肌酐升高,内生肌酐清除率降低(P分别<0.05和0.01).降压治疗6周末69.40%(694/1000)患者收缩压<140 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),85.30%(853/1000)患者舒张压<90 mm Hg.不同降压药物治疗后SUA和血钾的变化:低剂量利尿剂组SUA平均升高(43.81±71.79)μmol/L(P<0.0001),氯沙坦组平均下降(44.96±90.63)μmol/L(P<0.01,100 mg组优于50 mg组),氯沙坦+氢氯噻嗪组平均下降(7.46±84.72)μmol/L,三组药物治疗后SUA之间的差异有统计学意义;低剂量利尿剂组血钾平均下降(0.30±0.44)mmol/L(P<0.01),与氯沙坦组[(0.06±0.43)mmol/L]和氯沙坦+氢氯噻嗪组[(-0.04±0.44)mmol/L]比较,差异也有统计学意义.结论 EH患者25.83%合并高尿酸血症;高血压合并高尿酸血症者有体质指数增加和肾功能损害趋势;低剂量噻嗪类利尿剂会加重SUA增高和低血钾,氯沙坦可剂量依赖性的降低SUA,而氯沙坦+氢氯噻嗪介于两者之间.     

VKORC1-1639G／A基因多态性与华法林应用剂量关系的研究

目的探讨维生素K环氧化物还原酶复合物1基因（VKORC1）-1639G／A多态性对中国汉族人华法林应用剂量的影响。方法应用PCR—RFLP法检测129例长期口服华法林的患者和198例健康对照者VKORC1-1639G／A多态性，比较VKORC1不同基因型间平均华法林剂量。结果病例组VKORC1-1639AA、AG、GG基因型频率分别为74．4％（96／129）、23．3％（30／129）、2．3％（3／129），等位基因A和G频率分别为86％和14％。病例组与健康对照者VKORC1-1639G／A多态性分布差异无统计学意义（P〉0．05）。VKORC1-1639不同基因型患者所需华法林平均剂量差异有显著统计学意义（P〈0．（301），AA型剂量[（1．444±0．282）mg／INR]显著低于AG型[（1．629±0．258）mg／INR，P=0．002]和GG型患者[（2．031±0．087）mg／INR，P=0．017]。结论中国人华法林应用剂量偏低可能与VKORC1-1639AA型占多数有关。     

经冠状动脉造影证实的冠心病患者的胰岛素抵抗现象

为了探讨胰岛素抵抗和冠心病之间的关系，本文测定了25名血压正常的、经冠状动脉造影证实的冠心病患者和13名正常人的血脂及口服糖耐量后血糖、胰岛素等指标。发现冠脉造影组口服糖耐量后血清胰岛素、胰岛素／血糖比值较正常组显著升高，并且口服糖耐量120分钟的高胰岛素分泌、LDL水平与冠状动脉狭窄严重程度显著正相关。说明冠心病患者中也存在胰岛素抵抗现象，它一方面通过影响血脂代谢，另一方面直接参与了冠心病的形成。口服糖耐量后120分钟高胰岛素分泌及LDL水平是冠状动脉狭窄严重程度的重要预警因子。     

经冠状动脉造影证实的冠心病患者的胰岛素抵抗现象

为了探讨胰岛素抵抗和冠心病之间的关系。本文测定了２５名血压正常的、经冠状动脉造影证实的冠心病患者和１３名正常人的血脂及口服糖耐量后血糖、胰岛素等指标。发现冠脉造影组口服糖耐量后血清胰岛素、胰岛素分泌、ＬＤＬ水平与正相关。说明冠心病患者中也存在胰岛素抵抗现象，它一方面通过影响血脂代谢，另一方面直接参与了冠心病的形成，口服糖耐量后１２０分钟高胰岛素分泌及ＬＤＬ水平是冠状动脉狭窄严重程度的重要预警因子。     

血小板膜受体P2Y12基因多态性与原发性高血压血瘀证的相关性研究

目的探讨血小板膜受体P2Y12基因G52T、-T744C多态性与原发性高血压（EH）血瘀证易感性的关系。方法选择福建省汉族人群EH血瘀证患者216例,EH非血瘀证患者220例,血压正常对照者193例。抽取受试者外周静脉血,提取DNA,采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性（PCR—RFLP）检测P2Y12基因G52T、-T744C多态性类型。结果3组间G52T的GG、GT和TT基因型分布频率差异无统计学意义（x2=2．041,P=0．728）,-T744C的TT、TC和CC基因型分布频率差异有统计学意义（x2=10．500,P=0．033）;经进一步誓分割检验显示,EH血瘀证组TC／CC基因型分布频率（43．1％）高于EH非血瘀证组（30．9％）和健康对照组（33．2％）,差异有统计学意义（X2=7．598,P=0．006）。多因素Logistic回归分析显示,以健康对照组为参照系,TC／CC基因型人群是患EH血瘀证的独立危险因素;调整相关混杂因素后,TC／CC基因型人群患EH血瘀证的相对危险度是1．518,95％可信区间（95％CI）为1．011～3．025,P=0．042。结论P2Y12基因TC／CC型可能是汉族人群EH血瘀证发病的易感危险因素之一。     

病例196:64岁男性高血压合并肺栓塞

正2018年第9期(截稿日期2018年8月1日)患者,男性,64岁,退休职工,于2014年11月因"反复胸闷2周"为主诉入院。现病史:入院前2周步行时突然出现胸闷,位于心前区,伴面色苍白、大汗,立即坐地休息,3～5min后好转。无胸痛、晕厥,无发绀、咯血、呼吸困难,无恶心、呕吐。2周来胸闷多次发作,程度减轻,未再出现面色苍白、大汗。既往史:3年前发     

ACE、CYP11B2、α-adducin基因多态性与高血压患者血压昼夜节律变化

目的研究血管紧张素转换酶（ACE）、醛固酮合成酶（CYP11B2）,α-内收蛋白（（α-adducin）基因多态性与高血压患者血压昼夜节律变化的关系。方法根据动态血压昼夜节律变化,将238例高血压患者分为杓型与非杓型两组,分析ACE、CYP11B2、α-adducin基因不同基因型在杓型血压组和非杓型血压组的分布;统计学处理用卡方检验和方差分析。结果杓型组与非杓型组ACE基因多态性的分布存在显著差异,P〈0.05;杓型组以II型的分布频率为主,而卡方分割表明非杓型组ID＋DD基因型的分布高于杓型组（P〈0.01）;而CYP11B2、α-adducin基因多态性与高血压患者血压节律变化无关联。结论ACE（I/D）基因多态性与高血压患者昼夜血压节律变化有关,携带D等位基因的患者可能更易发生夜间血压升高。