Inhibition of N-methyl-D-aspartate-activated current by bis(7)-tacrine in HEK-293 cells expressing NR1/NR2A or NR1/NR2B receptors

In normal rat forebrain, the NR1/NR2A and NR1/NR2B dimmers are the main constitutional forms of NMDA receptors. The present study was carried out to determine the functional properties of the heteromeric NMDA receptor subunits and their inhibition by bis(7)-tacrine (B7T). Rat NR1, NR2A and NR2B cDNAs were transfected into human embryonic kidney 293 cells (HEK-293).The inhibition of NMDA-activated currents by B7T was detected in HEK-293 cell expressing NR1/NR2A or NR1/NR2B receptors by using whole-cell patch-clamp techniques. The results showed that in HEK-293 cells expressing NR1/NR2A receptor, 1μmol/L B7T inhibited 30μmol/L NMDA- and 1000μmol/L NMDA-activated steady-state currents by 46% and 40%, respectively (P>0.05; n=5), suggesting that the inhibition of B7T on NR1/NR2A receptor doesn’t depend on NMDA concentration, which is consistent with a non-competitive mechanism of inhibition. But for the NR1/NR2B receptor, 1μmol/L B7T inhibited 30μmol/L NMDA- and 1000 μmol/L NMDA-activated steady-state currents by 61% and 13%, re-spectively (P<0.05; n=6), showing that B7T appears to be competitive with NMDA. In addition, simultaneous application of 1μmol/L B7T and 1000μmol/L NMDA produced a moderate inhibition of peak NMDA-activated current, followed by a gradual decline of the current to a steady state. However, the gradual onset of inhibition produced by B7T applied simultaneously with NMDA was eliminated when B7T was given 5s before NMDA. These results suggested that B7T inhibition of NMDA current mediated by NR1/NR2B receptor was slow onset, and it did not depend on the presence of the agonist. With holding potentials ranging from -50 to +50 mV, the B7T inhibition rate of NMDA currents didn’t change significantly, and neither did the reversal potential. We are led to conclude that the NR1/NR2B recombinant receptor can serve as a very useful model for studying the molecular mechanism of NMDA receptor inhibition by B7T.     

丹参酮IIA对CCl4诱导小鼠急性肝损伤的保护作用

目的 研究丹参酮IIA(tanshinone ⅡA, Tan ⅡA)对CCl4诱导小鼠急性肝损伤的抗氧化、保护作用及其可能的作用机制。 方法 将C57BL/6J小鼠随机分成正常组、CCl4组以及Tan ⅡA保护组(Tan ⅡA 20 mg/kg+CCl4),每组10只。腹腔注射CCl4构建小鼠急性肝损伤模型。计算各组小鼠的肝脏指数,检测血清AST和ALT活性,测定肝组织SOD活性及GSH、MDA含量,HE染色观察肝组织病理变化,免疫组织化学法和Western blot检测肝组织PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、Nrf2和HO-1蛋白表达水平。 结果 与CCl4组相比,Tan ⅡA保护组肝脏指数显著下降(P<0.01),血清AST(P<0.01)和ALT活性降低(P<0.05),肝组织SOD活性(P<0.01)及GSH含量升高(P<0.05),MDA含量降低(P<0.05),肝组织病理变化得到显著改善。同时,Tan ⅡA使肝组织p-PI3K和p-Akt表达水平明显升高(P<0.01),显著诱导Nrf2转位入核(P<0.01),促使其下游靶蛋白HO-1表达水平明显升高(P<0.01)。 结论 Tan ⅡA能够显著改善CCl4诱导的急性肝损伤,其机制可能与PI3K/Akt/Nrf2/HO-1信号通路有关。     

高温对细胞骨架的影响

肿瘤是一类严重危害人类健康的疾病，目前临床上针对肿瘤的治疗方法较多，主要包括放疗、化疗、介入等等。近20年来，随着相关研究的不断深入及热疗设备的开发研制，高温热疗在肿瘤治疗领域获得了迅猛发展，如采用温和性高温诱发肿瘤细胞死亡已成为目前最热门的研究课题之一。     

SOX12与肝细胞癌患者不良预后和免疫浸润的相关性研究

目的：通过加权基因共表达网络（weighted gene co?expression network analysis,WGCNA）与最小绝对收缩和选择算法（least absolute shrinkage and selection operator,LASSO）考察转录因子SOX12在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）发生发展中免疫浸润相关的预后价值。方法：利用基因表达（Gene Expression Omnibus,GEO）和肿瘤基因组图谱（The Cancer Genome Atlas,TCGA）数据库,采用Kaplan?Meier（K?M）生存曲线和单因素、多因素Cox回归分析SOX12基因表达在HCC中的临床价值。利用ESTIMATE和CIBERSORT算法研究SOX12基因表达与肿瘤免疫微环境的相关性。运用WGCNA和LASSO算法建立风险预后模型,进一步评估高低风险组中SOX12基因表达对HCC患病基因突变的影响。结果：在HCC肿瘤组织中,SOX12的表达显著升高,和年龄、性别、肿瘤等级、疾病分期有关,且与患者生存预后显著相关。在风险预后模型中,高风险组比低风险组的总生存率差。风险预后模型具有显著的预后预测效果,其1年、3年和5年的曲线下面积（area under curve,AUC）分别为0.823、0.811和0.824。高SOX12表达组中TP53基因突变比例（40％）明显高于低SOX12表达组（25%）,表明高低风险组中高低SOX12表达影响HCC患病基因突变的频率。结论：SOX12表达与HCC的免疫浸润和患病基因突变相关,提示其可能成为HCC患者预后评估的潜在靶标。     

高温对HeLa细胞张力原纤维和微管纤维的影响

目的 研究高温对肿瘤细胞张力原纤维和微管纤维的影响。方法 将HeLa细胞分成8组，置于不同温度(37，40，43和45℃)下，分别经不同时间(1h和2h)水浴处理后，倒置显微镜下观察其形态变化，然后用考马斯亮蓝R250显示其张力原纤维，SABC法显示其微管纤维。结果 当温度由40℃升至43℃的过程中，首先引起HeLa细胞张力原纤维的解聚，进而引起微管纤维的解聚，随着温度的升高和时间的延长，两者的变化逐渐趋同。而微管组织中心具有较强的保护作用。结论 温和性高温对HeLa细胞张力原纤维的影响可能强于微管纤维，两者都呈现出渐进式的解聚变化，这些变化都和高温导致的细胞毒性及凋亡有着非常密切的关系。     

热处理后HeLa细胞张力原纤维在不同时间段的变化比较

高温热疗能导致细胞骨架解聚、变短，而停止热疗后，又可以在一定程度上重新装配、再聚而延长，这是由细胞骨架的独特特性所决定的。其再聚又因加热的温度、时间和细胞种类等的不同而不一致，各种细胞骨架成分的恢复情况也不尽相同，显示它们具有不同的热敏感性。热疗后细胞骨架的变化和细胞内部的各种变化密切相关，细胞骨架的重排也是凋亡的一个必须过程。因此，本实验对热疗后人宫颈癌细胞系(HeLa)细胞张力原纤维变化作进一步的研究，为探求高温的作用机制提供更多形态学方面的依据。     

针推班解剖学成绩分析与教学改革探讨

针灸推拿学是我校医学与生命科学学院中医系本科专业新开设的一门学科。我教研室共承担了人体解剖学和穴位解剖学两门课程的教学任务。其中人体解剖学作为一门非常重要的基础课，是每一个刚踏进医学院校门的大学生都必修的；而穴位解剖学则是我室根据针灸推拿专业的特殊要求而新开的一门课。