黑色浅灰链霉菌次级代谢产物杀螺活性及其作用机制初步研究

目的　评价放线菌黑色浅灰链霉菌（Streptomyces nigrogriseolus XD 2⁃7）代谢产物储存稳定性及其分离纯化产物实验室杀螺活性,并初步探讨其杀螺作用机制。方法　制备黑色浅灰链霉菌发酵上清液,将其于-20 ℃、4 ℃和28 ℃无光照条件下放置10 d后,测定其72 h浸杀灭螺效果;将发酵上清液置于100 ℃水浴中煮沸30 min后恢复至室温,测定其72 h浸杀灭螺效果;用浓盐酸和氢氧化钠调节发酵上清液pH值为4.0、6.0和9.0,室温下静置12 h,再调节发酵上清液pH至7.0,测定其72 h浸杀灭螺效果。用大孔树脂、硅胶和十八烷基硅烷键合硅胶依次对黑色浅灰链霉菌发酵产物进行4次分离纯化,将最终分离纯化产物配置成10.00、5.00、2.50、1.25 mg/L和0.63 mg/L浓度药液,测定其72 h浸杀灭螺效果。各实验设立空白对照组以脱氯水处理,阳性对照组以0.10 mg/L氯硝柳胺处理。采用高效液相色谱法测定经纯化代谢产物浸泡后钉螺软体组织中三磷酸腺苷（adenosine triphosphate, ATP）和二磷酸腺苷（adenosine diphosphate, ADP）含量。结果　黑色浅灰链霉菌发酵上清液在-20 ℃、4 ℃和28 ℃无光照条件下放置10 d后,原液及稀释10、50倍药液浸杀钉螺72 h,钉螺死亡率均为100.00%（30/30）;经100 ℃煮沸30 min后,原液及稀释10、50倍药液浸杀钉螺72 h,钉螺死亡率均为100.00%（30/30）。发酵上清液在pH值为4.0、6.0条件下存储12 h后浸杀钉螺72 h,钉螺死亡率均为100.00%（30/30）;在pH值为9.0条件下存储12 h后浸杀钉螺72 h,钉螺死亡率为33.33% (10/30,[χ2] = 30.000,P < 0.05)。发酵上清液最终分离纯化产物100.00%（30/30）杀死钉螺所需最低浓度为1.25 mg/L。以0.10 mg/L和1.00 mg/L浓度最终分离纯化产物处理钉螺后,钉螺软体组织中ATP水平较对照组显著降低（F = 7.274,P < 0.05）,ADP水平与对照组差异无统计学意义（F = 2.485,P > 0.05）。结论　黑色浅灰链霉菌代谢产物中杀螺活性成分可在-20 ℃、4 ℃和28 ℃条件下稳定储存10 d,且耐热、耐酸而不耐碱,其杀螺机制可能是使钉螺能量代谢发生紊乱而死亡。     

芳香吡咯类化合物杀灭日本血吸虫尾蚴活性及对鱼类急性毒性研究

目的　探讨芳香吡咯类化合物杀灭日本血吸虫尾蚴活性及对鱼类的急性毒性。方法　以4⁃苄基⁃5⁃（三氟甲基）⁃1H⁃吡咯⁃3⁃腈为先导化学法合成并表征一系列芳香吡咯类化合物。将合成的化合物配制成10.00、1.00、0.10、0.01 mg/L浓度的药液作用于10 ~ 30条新鲜逸出的日本血吸虫尾蚴,观察并分析其30 min内在各药液中存活情况;以0.10、0.01 mg/L氯硝柳胺水溶液为阳性对照,以含1%二甲基亚砜（DMSO）的脱氯水为空白对照。将10条斑马鱼暴露于浓度分别为0.50、0.25、0.12、0.06、0.03 mg/L的各化合物药液,连续观察72 h斑马鱼在药液中的存活情况;以0.15、0.30 mg/L氯硝柳胺水溶液为阳性对照,以含1% DMSO的脱氯水为空白对照。结果　成功合成7种芳香吡咯类化合物。0.01 mg/L化合物102、104和106作用30 min均杀灭全部尾蚴,化合物105和化合物107无杀蚴活性。空白对照组未见血吸虫尾蚴死亡; 0.10 mg/L氯硝柳胺处理10 min后尾蚴全部死亡,但0.01 mg/L氯硝柳胺未能杀死血吸虫尾蚴。0.03 mg/L浓度化合物101、104和105处理72 h未导致斑马鱼死亡,化合物102、103和106作用12 h可导致全部斑马鱼死亡。0.50 mg/L化合物104作用72 h未导致斑马鱼死亡,空白对照组未见斑马鱼死亡,0.30 mg/L氯硝柳胺处理24 h后斑马鱼全部死亡。结论 　 0.01 mg/L化合物104作用30 min可杀灭全部日本血吸虫尾蚴, 0.50 mg/L作用72 h未导致斑马鱼死亡,可以作为杀蚴剂候选化合物。     

AF-HF001对正常大鼠离体心脏的正性肌力及心电作用

采用正常大鼠离体心脏模型,利用Langendorff离体灌流装置考察各浓度AF-HF001对大鼠离体心脏左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末期压(LVEDP)、左心室内压最大上升速率(+dp/dt_max)以及左心室内压最大下降速率(-dp/dt_max)的影响。结果表明:AF-HF001能够剂量依赖性地增强大鼠离体心脏LVSP、LVEDP及左心室最大变化速率,表明AF-HF001可对正常大鼠离体心脏产生正性肌力作用。同时结合分布于心尖、右心室游离壁、主动脉根部的检测电极检测AF-HF001的心电作用,结果显示AF-HF001在各灌流浓度下PR,QRS,QTc及心率等各项心电指标未改变,表明AF-HF001在保证增强心肌收缩力及产生更大心脏搏出量的同时也具备良好的安全性。本研究为AF-HF001的深入开发奠定了良好的基础。     

药物化学课程教学改革

药物化学改革对本课程内容、教学模式及教学方法做出进一步的改进,以增强学生对现代药学化学理论知识的全面深入理解,提高其对于药物创新的理性认识,同时强化实践环节。     

RP-HPLC-DAD法快速测定沙棘叶中6种黄酮成分

采用RP-HPLC-DAD法同时测定沙棘叶中6种黄酮的含量,包括:儿茶素、芦丁、杨梅素、槲皮素、山柰酚和异鼠李素。沙棘叶经石油醚脱脂后,由乙醇水溶液提取得沙棘叶黄酮粉末。样品经由Shimadzu C₁₈(150 mm×2.1 mm,5 μm)色谱柱分离,以甲醇-水(0.1%磷酸)(60∶40)为流动相,以1.0 mL/min的流速等度洗脱,柱温40 ℃,检测波长分别为:儿茶素208 nm,芦丁257 nm,杨梅素373 nm,槲皮素371 nm,山柰酚367 nm,异鼠李素371 nm;进样量为20 μL。10 min之内,各成分实现基线分离,6种黄酮成分在0.47~ 30.00 μg/mL范围内,线性均良好。通过精密度、稳定性和加样回收率等在内的方法学验证,证实方法稳定、准确。所建立的分析方法简便、快捷,可用于沙棘叶中6种黄酮含量的快速测定。     

含糖结构的抗糖尿病螺环化合物研究进展

糖尿病是严重危害人类健康的重大疾病之一。现有的药物存在耐药性、胃肠道反应等问题,亟待开发新型的抗糖尿病药物。本文综述了近年来具有抗糖尿病活性的含糖结构的螺环化合物研究进展,重点介绍了部分螺环化合物的合成方法、生理活性及其构效关系。     

新型抗血吸虫杂环化合物UPLC?QTOF?MS 分析方法的建立

目的 建立新型抗血吸虫杂环化合物噁二唑?2?氧化物杂环类似物F?2015?14的超高效液相色谱?四级杆飞行时间质谱（UPLC?QTOF?MS）分析方法。方法 小鼠血浆及组织样品经乙酸乙酯萃取,以C18色谱柱进行色谱分离,再经流动相为10%乙腈?0.1%（体积分数）甲酸溶液,梯度洗脱分离,采用超高效液相色谱?四级杆飞行时间质谱检测F?2015?14。 结果 小鼠血浆中F?2015?14在12.5 ~ 250 mg/mL范围内线性关系良好,相关系数为0.990,检出限为8.8 mg /mL;小鼠肝匀浆中F?2015?14在12.5 ~ 250 mg/mL范围内线性关系良好,相关系数为0.992,检出限为5.6 mg/mL。在加样量为12.5 mg/mL的小鼠血浆和肝匀浆样品中,UPLC?QTOF?MS的准确度和基质效应均在80% ~ 120%,日间、日内精密度均< 20%;在加样量为100、200 mg/mL的小鼠血浆和肝匀浆样品中,UPLC?QTOF?MS的准确度和基质效应均在85% ~ 115%,日间、日内精密度均< 15%。 结论 UPLC?QTOF?MS检测新型抗血吸虫杂环化合物噁二唑?2?氧化物（F?2015?14）具有较好的灵敏度及重复性,为抗血吸虫新药的研发奠定了基础。