麦氏弧菌多位点序列分型方法的建立与应用

目的建立针对麦氏弧菌的多位点序列分型（MLST）方法,评价该方法的分型效果,并对收集的麦氏弧菌进行MLST分析。方法筛选出7个管家基因（ftsZ、gapA、mreB、gyrB、purM、recA、ropA）,设计特异引物,在17株麦氏弧菌中PCR扩增管家基因序列。 用DnaSP 6.12.03软件和Split tree 4.0软件评价基因多态性、中性进化和基因重组情况;根据7个管家基因的序列差异获得对应的序列分型（ST）型别,用BioNumerics 7.1软件对不同ST型别构建最小生成树和聚类图,并用eBURST 3.0软件计算克隆复合体（CCs）。结果所选的管家基因具有足够多的等位基因位点、序列差异和足够高的分辨率;7个管家基因的Split tree对所有麦氏弧菌的聚类一致;中性试验结果显示,7个管家基因在进化过程中受遗传漂变的影响较小。 MLST将17株麦氏弧菌分成14个ST型别,大多数菌株（64.70%）均单独形成一个ST型别,其中ST007形成了可能的优势克隆群。 这些菌株之间存在相对较远的遗传距离,在垂直传播上呈现出潜在的地域聚集性。结论本研究建立的麦氏弧菌的MLST方法能分析麦氏弧菌的种群结构和遗传进化关系。     

药店品牌营销战略三路径

药店品牌营销战略最主要是解决药店如何立足于现在,通过最有力的品牌营销方式和组合,在未来不断保持和增强品牌竞争力和影响力的问题。有三大路径可以推动药店品牌营销战略：     

一株同时携带SGI1和SXT/R391耐药基因岛的奇异变形杆菌

目的分析1株人源奇异变形杆菌CA151922的2个耐药相关基因岛SGI1和SXT/R391的基因结构和耐药基因。方法聚合酶链式反应（PCR）检测SGI1和SXT/R391基因岛特异性整合酶基因,采用二代测序方法测定CA151922基因组。 分别以SGI1和SXT/R391基因岛的参考序列,从基因组序列中提取基因岛片段并组装。 在线预测并注释开放读码框（ORFs）。 基因岛的同源序列通过在线工具BLASTn获得,采用cd-hit获得非冗余的同源基因,利用R语言构建同源基因的聚类进化关系树。 利用微量肉汤稀释法进行耐药表型检测。结果奇异变形杆菌CA151922同时含有SGI1（SGI1-B）和SXT/R391（ICEPmiJpn1）2个耐药相关基因岛。 SGI1-B和ICEPmiJpn1与已知序列相似性分别为97% ~ 99%和96% ~ 99%。 SGI1-B和ICEPmiJpn1携带的耐药基因种类有所差异,但两者携带不同的编码β-内酰胺酶的基因。CA151922为多耐药菌株,耐药达18种,与基因岛耐药基因有关的耐药表型为氨苄西林和磺胺类药物,提示菌株耐药表型不完全由该耐药岛内的耐药基因决定。结论首次在奇异变形杆菌中发现,同时携带SGI1和SXT/R391耐药相关基因岛, 增加了菌株耐药的复杂性和严重性,提示应加强对多耐药菌株耐药相关基因岛的监测。     

中国福氏志贺菌优势序列型ST91获得SRL和Tn7多重耐药岛分析

目的分析中国福氏志贺菌优势序列型ST91(sequence type 91)中志贺菌耐药岛(Shigella resistance locus,SRL)和Tn7耐药岛的分布及变化情况。方法对包括14种血清型(1a[7株],1b[1株],1d[1株],2a[5株],2b[1株],3a[3株],3b[1株],4a[1株],4av[1株],4b[1株],X[9株],Xv[25株],Y[2株]和Yv[1株])和7种ST型(ST91[50株],ST109[1株],ST18[3株],ST142[1株],ST143[1株],ST103[2株],ST16[1株])的59株中国福氏志贺菌基因组中SRL、Tn7耐药岛的编码基因及核酸序列进行分析,并与参考菌株2002017和YSH600的SRL和Tn7岛进行比较。结果所有50株中国分离的福氏志贺菌ST91菌株,1株ST109和1株ST142菌株均携带SRL和Tn7岛。1株ST18菌株仅携带2个耐药岛的3个耐药基因。其他ST型菌株均未发现耐药岛。与参考菌株2002017相比,9株ST91菌株的SRL耐药岛发生了插入或缺失。其中,7株ST91菌株缺失了编码四环素耐药性的tet基因;1株ST91菌株缺失了编码β-内酰胺酶的oxa-1和编码氯霉素乙酰转移酶的cat基因;1株ST91的SRL岛上插入了1个编码广谱β-内酰胺酶的blaTEM-1基因。所有50株ST91、1株ST109和1株ST142菌株携带的Tn7岛的核酸序列和编码基因与参考菌株相比未发现差异。结论福氏志贺菌ST91型中国分离菌株均携带SRL和Tn7耐药岛。在SRL岛上发生了基因的插入和缺失。处于进化早期的ST18菌株,在获得耐药岛的过程中可能发挥了重要作用。     

评述篇 炒作:平价新主张

2003年5月,总部设在江西的开心人大药房挺进上海;哈尔滨的宝丰、湖南的益丰也先后在2004年5月和10月进入沪市。而在此前后,老百姓、芝林、市民、九龄、老吉春堂、康力等平价大药房也都汇聚黄浦江畔,给上海医药零售市场带来巨大冲击。 这些平价大药房在进入上海之初,或进入后相当长一段时间内,都格外借助于媒体(主要为报纸)进行卓有成效的公关新闻宣传。不过,当这种公关新闻的强度和频率都超出常态时,我们就可以称之为"新闻炒作"。     

请尊重消费者的选择权

都在讲“一切以消费者需求为导向”,从工业、商业到零售,无一例外。尤其是零售,因为在终端界面与消费者直接接触,更有“视顾客为上帝”的口号。以药店终端销售药品为例,我们可以来看看“视顾客为上帝”的口号是如何被扭曲的。关于药店与厂商或代理商联合搞驻店营业员销售为主的终端拦截或反拦截。大家知道,在“多方面、多层次满足消费者需求”导向下,药店经营——尤其是一些中、大型药店,都会在终端界面陈列一些不同价位、档次的同类(名)产品。顾客进店,往往是还未来得及专业咨询,终端拦截营业员即径直上前推荐自己的产品。往往是顾客想要的…     

鉴定单增李斯特菌四个进化家系及两个亚系的多PCR方法的建立

目的利用多重PCR（multiplexPCR）技术,建立针对单增李斯特菌4个进化家系（LineageⅠ,LineageⅡ、LineageⅢ、LineageⅣ）及2个亚系（LineageⅢA、LineageⅢC）的鉴定方法。方法以InlA、Lmo0733、Lmo0038、Lmo0735和LmaA作为靶基因设计引物,建立同时鉴别LineageⅠ、LineageⅡ、LineageⅢA、LineageⅢC和LineageⅣ菌株的多重PCR反应体系,并对387株单增李斯特菌进行了所属进化家系及亚系的鉴定。结果387株单增李斯特菌可用本方法进行所属家系和亚系的分型,包括LineageⅠ246株、LineageⅡ123株、LineageⅢA4株、LineageⅢC13株和LineageⅣ1株。结论本方法能准确鉴定单增李斯特菌的4个进化家系及2个亚系的菌株,可用于食品、临床标本中单增李斯特菌的楠原学诊断和疫情暴发时的溯源调查。     

条条大路通罗马——药店品牌塑造途径

药店品牌形象，绝不是药店经营者自以为怎么样的问题。比如许多药店，动辄喜欢以“打造××品牌形象”自居，实际上，药店形象总是在药店经营者有意无意的行为中形成的，或者说，它虽然是企业有所作为的表现，但它必须经由消费者的感知、体验并得到内心的认可，才可能真正确定。     

我国平价药房的市场意义

本文对平价药房这一新型零售业态的市场意义进行了初步总结。明确指出平价药房对于医改、价格竞争、供应链锻造与药品零售市场良性竞争环境的形成等,具有重要的市场意义。特别是对于降低包括医院在内的医药市场的零售价格,平价药房功不可没。同时,也指出了平价药房扩张发展过程中应注意的3大问题,解决好这些问题对于形成平价药房良好的市场扩张模式、促成零售市场竞争环境的良性化意义重大。     

真实有多难

真实常常会被掩饰。当我们试图用某种或某些方法来弄清消费者真正的需求是什么的时候,我们经常会得到一些错误的书面表述,而我们又把这样的一些书面表述作为最基础的数据来确定我们的市场营销方式。所以我们的市场营销经常会出错,“强力射出的箭”,离靶心有相当的偏差。被掩饰的真实还不止消费者的需求。譬如说专业调研公司受托做市场调研,选择什么样的对象、用多少样本才能真实地反映情况,那也真是仁智各见。策划包装呢?明摆着的把差的说好、把好的说成顶好,你还能指望它给你真实的、原初的东西吗?所以,就这个策划包装的商业时代而言,真实…