移植自聚合肽纳米纤维材料与RhoA-siRNA复合物修复脊髓损伤

背景:脊髓损伤后RhoA表达增高是神经再生困难的主要原因之一,本课题在前期研究证明自聚合肽纳米纤维材料能较好地促进脊髓损伤后结构与功能修复的基础上,构建了自聚合肽纳米纤维材料与RhoA-siRNA复合材料用于修复脊髓损伤。目的:探讨自聚合肽纳米纤维材料介导siRNA干扰RhoA表达促进脊髓损伤修复。方法:54只昆明小鼠随机数字表法分为4组。假手术组仅作脊髓暴露,其他3组在切除1mm脊髓组织制备全横断脊髓损伤模型后,分别于损伤腔内填充生理盐水、自聚合肽纳米纤维支架或含有RhoA特异性siRNA复合物。通过FAM标记检测siRNA转染效率;免疫组化检测RhoA表达;免疫组化和定量分析检测再生神经纤维;行为学检测评定后肢功能恢复。结果与结论:移植FAM标记的含有RhoA特异性siRNA复合物后,在脊髓内的神经纤维及大脑皮质运动区神经元胞体内均可检测到FAM荧光信号,提示siRNA可从复合材料中释放到组织中并成功导入靶细胞。与SAPNS组和生理盐水组相比,含有RhoA特异性siRNA复合物和自聚合肽纳米纤维支架组可显著降低RhoA在神经元的表达,提高脊髓损伤区内NF阳性神经纤维的密度,促进后肢功能的恢复。结果提示通过自聚合肽纳米纤维支架的介导,含有RhoA特异性siRNA复合物能有效干扰RhoA表达,从而促进脊髓损伤的修复。     

多因子联合诱导脂肪组织源性干细胞分化为神经元样细胞

背景:国内均可见有探讨脂肪干细胞向神经元诱导分化的相关研究报道,但运用差速贴壁法纯化脂肪组织源性干细胞,多因子联合诱导脂肪组织源性干细胞分化为神经元样细胞的研究鲜有报道。目的:观察多因子联合诱导和分步诱导方案诱导大鼠脂肪组织源性干细胞体外分化为神经元样细胞的可行性。方法:取SD雄性大鼠腹股沟和附睾脂肪垫脂肪组织,酶消化法分离、差速贴壁法纯化脂肪组织源性干细胞。免疫荧光细胞化学法鉴定脂肪组织源性干细胞(CD44,CD49d,CD106);"鸡尾酒"式神经元诱导培养基对脂肪组织源性干细胞进行诱导分化,并用免疫荧光细胞化学法鉴定(Nestin和NeuN)分化结果。结果与结论:大鼠腹股沟和附睾脂肪垫脂肪组织内分离、原代培养的脂肪组织源性干细胞形态均一,呈长梭形,细胞核椭圆形,核仁明显,细胞质染色浅,呈旋涡状克隆样生长;CD44和CD49d阳性表达而CD106阴性;诱导培养基内培养6h后脂肪组织源性干细胞呈锥体形或不规则,有短而细的指状突起;24h后多数细胞显示类神经元的形态学特征,且Nestin和NeuN阳性。提示肪组织源性干细胞在多因子"鸡尾酒"式培养基内可向神经元方向分化。     

不同靶细胞在基因治疗中枢神经损伤中的应用

近年来基因治疗逐步运用到CNS损伤及再生的研究中 ,获得理想的靶细胞是CNS基因治疗的一个关键问题。一般认为能用于基因修饰并植入CNS内进行基因治疗的理想靶细胞应具备以下几个要素 :容易被修饰、具有表达和分泌转基因产物的能力、具有在体外及移植后在宿主内生存的能力 ,以及基因修饰前已经具有促神经元生长的固有特性等等。目前运用于CNS基因治疗的靶细胞主要是雪旺细胞、成纤维细胞、星形胶质细胞、神经干细胞和成肌细胞。本文对这些靶细胞本身在中枢神经再生方面的作用、在基因治疗研究中的应用情况以及各自的优缺点等问题进行了综述     

移植神经干细胞促进脊髓全横断大鼠结构与功能修复的研究

目的 探讨移植神经干细胞对脊髓全横断性大鼠部分结构与功能修复的影响。方法 在脊髓全横断处移植神经干细胞60d后，在横断处下方3mm注射荧光金逆行标记轴突再生的上运动神经元，用免疫组织化学检测神经干细胞在宿主内的分化，同时用体视学方法观测脑干红核和大脑皮质感觉运动区内锥体细胞层的神经元密度变化。用BBB评分法和爬网格法观测大鼠后肢运动功能的恢复等。结果 移植的神经干细胞能在宿主内存活并向前后方向迁移到脊髓内，部分神经干细胞分化为GFAP、NF-200和GAP-43阳性细胞。移植神经干细胞后在红核和感觉运动区内锥体细胞层可见有被荧光金标记的神经元胞体，脊髓横断处附近脊髓组织的溃变程度减轻，红核及躯体感觉运动区内神经元密度高于未移植组，大鼠后肢的自主运动功能明显好于未移植组。结论 神经干细胞移植入损伤脊髓后能分化为神经元及神经胶质细胞，能减轻脊髓的继发性损伤，保护受损伤的神经元，促进运动功能的恢复。     

神经干细胞与NT-3基因修饰雪旺细胞联合移植促进全横断脊髓损伤大鼠功能修复的实验研究

目的：探讨神经干细胞(NSCs)与神经营养素-3(NT-3)基因修饰雪旺细胞(SCs)联合移植对全横断脊髓损伤大鼠的后肢运动及神经传导功能修复的作用。方法：将：NSCs与NT-3基因修饰SCs或未基因修饰SCs联合移植，或NSCs单独移植到大鼠全横断性脊髓损伤处，60d后进行爬网格测验和BBB评分检测运动功能。第67d，进行皮质运动诱发电位(CMEP)和皮质感觉诱发电位(CSEP）检测脊髓的神经传导功能。结果：脊髓损伤大鼠后肢的运动功能及CMEP和CSEP的修复程度依次为NSCs与NT-3基因修饰SCs联合移植组，NSCs与未基因修饰SCs联合移植组，NSCs单独移植组和实验对照组。结论：NSCs与NT-3基因修饰SCs联合移植能够促进脊髓损伤后大鼠的后肢运动及神经传导功能的修复。     

MCAI应用于内脏神经解剖课的教学效果

目的：为探讨MCAI在人体解剖学教学中的效果。方法：在《内脏神经》解剖课中，把MCAI与传统的教学方式作了对照研究。结果：MCAI方式教学组的平均成绩和优良率明显高于传统方式的教学组，而不及格率则前明显低于后。结论：MCAI方式的教学在使学生及时地理解和掌握更多的知识方面优于传统方式的教学。     

临床医学专科局解教学的改革与实践

随着教育事业的迅速发展和教学改革的不断深入,我国的医学教育在课程设计、教学模式、教学内容、教学方法和教学手段等诸多方面进行了较全面的改革。发生了很大的变化,取得了可喜的成绩。然而,综观我国医学专科学校人体解剖学的教学现状,我们认为在局部解剖学的教学内容和教学方法上还存在着许多     

T-激肽原在大鼠腰骶髓及背根节的分布

<正> T-激肽原(T-kininogen,T-Kg)是属于血管舒缓素-激肽系统(Kallikrein-kininsystem,Kks)的蛋白多肽.为进一步探讨T-Kg在神经系统的定位和作用,本文应用免疫细胞化学ABC法,研究了T-激肽原在大鼠腰骶髓及L_(46)背根节的分布.研究发现T-激肽原分布于L_(46)背根节及腰骶髓灰质的第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅸ层神经元及脊髓白质的神经胶质细胞和神经纤维.结果提示:在背根节的感觉神经元、腰骶髓白质的神经胶质细胞和神经纤维以及灰质的第Ⅱ、Ⅲ、Ⅸ层神经元内T-Kg和Hkg、Lkg及Bk等可能共存.这进一步提示,在神经元和神经胶质细胞存在内源性的Kks.它们     

酒精对小鼠体质影响的初步研究

<正> 为了探讨酒精对动物机体的影响,本研究选用雄性(20～309)、雌性(20～26g)昆明小鼠各30只,雄性随机均分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,雌性随机均分为Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组.小鼠分别以纯水(Ⅰ、Ⅳ组)、5%酒精(Ⅱ、Ⅴ组)、1O%酒精(Ⅲ、Ⅵ组)为唯一饮料连续喂养60d后,戊巴比妥钠(40mg/kg,ip)麻醉取材.分别测量并计算每一动物的体重增加量、麻醉时间、以及全脑、大脑、小脑、肝脏和睾丸(雄性)的重量.结果显示:①随着酒精浓度提高,雄性小鼠的体重增加量变大(p<0.05),而雌性变小(p<0.05).②随着酒精浓度提高,雌、雄性小鼠的麻醉时间均缩短(p<0.05).③Ⅲ组小脑重量与Ⅰ、Ⅱ组相比显著变小(p<0.05).④与Ⅳ组肝脏的重量相比较,Ⅴ组减轻(p<0.05)而Ⅵ增重(p<0.01).⑤除上述变化外     

大鼠海马的血管构筑

用血管铸型法,动一静脉连续灌注法、组织化学DAB法和生物体视学方法研究大鼠海马的血管构筑,结果表明:大鼠海马由大脑后动脉的分支——海马纵动脉供血,后者发出数支耙状分支进入海马,根据分支分布部位可分为海马内,外侧横动脉,它们经逐级分支移行为毛细血管,供应海马各区及齿状回.海马内毛细血管的分布具有与海马皮质分层相对应的层次性.海马各区及齿状回毛细血管的长度密度为齿状回 >CA_3>CA_4>CA_2>CA_1.海马具有内侧及外侧两个静脉系统.本文对海马的血管构筑及其缺血敏感性和选择性损伤进行了讨论.