遗传性高铁血红蛋白血症患者NADH-细胞色素b_5还原酶基因点突变的检测和基因诊断

为了探讨中国遗传性高铁血红蛋白血症患者的基因突变类型和建立相应的基因诊断方法，从已发现的１例Ⅰ型患者的外周血白细胞中提取ＲＮＡ，应用反转录ＰＣＲ法分析了Ｃｙｔｂ５ＲｃＤＮＡ的全部编码序列的９２１ｂｐ片段。结果显示：Ｃｙｔｂ５ＲｃＤＮＡ基因的第５７位密码子存在有Ａｒｇ→Ｇｌｎ（ＣＧＧ→ＣＡＧ）的错义突变。针对这一突变，用套式ＰＣＲ的方法对已有的３个家系共６名患者进行了基因诊断。结果表明其中两个家系的患者均有此位点的突变，５名患者３名为纯合子，２名为杂合子；而另一家系的患者未检测到，推测可能存在有其它突变类型。提示中国人遗传性高铁血红蛋白血症患者致病的分子基础，并建立了相应的基因诊断方法。     

中国人遗传性高铁血红蛋白血症研究进展

１　概述　　高铁血红蛋白血症是指血中高铁血红蛋白（ｍｅｔｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ）水平超过血红蛋白总量１％时的临床状态。按原因分为获得性和遗传性两大类。获得性高铁血红蛋白血症最常见,多为摄入某些氧化（还原）性药物或毒物时的一过性表现。遗传性高铁血红蛋白血症（ｈｅｒｅｄｉｔａｒｙｍｅｔｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎｅｍｉａ,ＨＭ）绝大部分为ＮＡＤＨ细胞色素ｂ５还原酶（ＮＡＤＨｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅｂ５ｒｅｄｕｃｔａｓｅ,ｂ５Ｒ）的遗传缺陷所致,呈常染色体隐性遗传,故又称隐性先天性高铁血红蛋白血症（ｒｅｃｅｓ…     

外源性野生型P16ink4a基因在兔损伤动脉壁的表达

目的：研究转染外源性野生型Ｐ１６＾ｉｎｋ４ａ基因逆转录病毒重组质粒对兔颈总动脉壁损伤后再狭窄形成的抑制作用。方法：构建野生型Ｐ１６＾ｉｎｋ４ａ基因的复制缺陷型逆转录病毒重组质粒,经包装细胞包装后取得高滴度病毒液,并以此病毒转染后即刻的兔颈总动脉。应用膜杂交和原位杂交技术检测损伤动脉壁的外源性Ｐ１６＾ｉｎｋ４ａ基因表达,并通过病理学等方法观察动脉内膜增生情况及管腔狭窄程度,结果：逆转录病毒重组质粒可     

中国人遗传性高铁血红蛋白血症二个家系所见 Cytb5R 基因 Arg~(57)→Gln 突变

目的：探明遗传性高铁血红蛋白血症ＮＡＤＨ－细胞色素ｂ５还原酶（Ｃｙｔｂ５Ｒ）缺陷的分子机制。方法：用逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法，克隆３个遗传性高铁血红蛋白血症家系Ｃｙｔｂ５Ｒ９２１ｂｐ的ｃＤＮＡ编码序列，并用限制性酶切ＰＣＲ产物分析３个家系的基因组ＤＮＡ。结果：２个家系存在Ａｒｇ５７→Ｇｌｎ突变，３个家系均未发现Ｇｌｕ２２２→Ｇｌｙ突变。结论：Ａｒｇ５７→Ｇｌｎ突变是中国人遗传性高铁血红蛋白血症的致病原因之一。     

体外转染野生型p16基因对兔血管平滑肌细胞生长的抑制作用

目的 :研究体外转染外源性野生型 p16基因对兔血管平滑肌细胞生长的影响。　　方法 :构建野生型 p16基因的重组逆转录病毒载体 ,并体外转染兔血管平滑肌细胞 ,应用 Northern blot及 Westernblot检测外源 p16基因的表达 ,并用四唑盐 ( MTT)法及流式细胞仪检测其对细胞生长的抑制作用。　　结果 :逆转录病毒载体可有效地将外源性 p16基因导入平滑肌细胞 ,表达 P16蛋白 ,并显著抑制血管平滑肌细胞的生长使细胞滞留于 G1 期。　　结论 :体外转染外源性野生型 p16基因可有效抑制血管平滑肌细胞的生长。     

转移基因体内表达的时空特异调控

转移基因体内表达的时空特异调控黄长晖，傅继梁转基因小鼠作为一种在活体内研究特定基因功能的有用工具在发育遗传学、免疫学和医学遗传学等生命科学领域的应用愈来愈广泛，关于转移至体内的外源基因（简称转移基因）在特定组织或器官中的特异性表达，以及发育过程中特定...     

一种新的NADH-细胞色素b5还原酶基因C203Y突变

我中心从９０年代初起共对５个家庭的１５例遗传性高铁血红蛋白血症（ＲＣＭ）患者的ＮＡＤＨ细胞色素ｂ５还原酶（Ｃｙｔｂ５Ｒ）进行了生化、免疫学测试，并对其ｂ５ＲｃＤＮＡ基因进行了序列分析和限制性片段长度多态性分析，已发现并报道了两种基因突变类型（Ｒ５７...