黄芩苷体外对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌活性影响的研究

目的研究从中药黄芩干燥根中提取分离药效成分黄芩苷体外对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌活性的影响。方法以琼脂扩散法、液体稀释微孔板法检测黄芩苷对MRSA的抑菌环大小、最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC);以96孔酶标板结晶紫法检测黄芩苷对MRSA的最小生物膜清除浓度(MBEC)。结果与DMSO比较,黄芩苷与氯霉素(阳性对照药物)对MRSA的抑菌环半径显著增加(P0.01),与氯霉素比较,黄芩苷对MRSA的抑菌环半径显著缩小(P0.05);黄芩苷对MRSA的MIC为0.5mg/ml;MBC为1mg/ml;黄芩苷对MRSA的MBEC为0.5mg/ml。结论黄芩苷对MRSA有一定的抗菌、抑菌作用,其效应机制可能与其抑制细菌生物膜的形成有关。     

恒温扩增芯片法在下呼吸道感染病原体检测中的应用

目的 评价恒温扩增芯片法在下呼吸道感染病原体检测中的应用价值.方法 选取四川大学华西医院2021年1—6月下呼吸道疑似感染患者1432例作为研究对象,采用恒温扩增芯片法检测感染病原体阳性率并与细菌传统培养法检测结果进行比较分析.结果 研究对象采用恒温扩增芯片法检测出阳性例数为597例(阳性率为41.7％),采用细菌传统...     

流感病毒诱导的小鼠肺上皮细胞损伤及外泌体miRNA差异表达谱研究

目的:通过研究甲型流感病毒刺激后小鼠肺上皮细胞源性外泌体的微小RNA(miRNA)差异表达谱,探讨流感病毒诱导肺上皮细胞损伤的机制。方法:采用甲型流感病毒(MOI=0.2)诱导小鼠肺上皮MLE-12细胞,同时设空白对照组,通过CCK-8法检测不同诱导时间下的细胞活力,明确甲型流感病毒诱导细胞损伤的最佳条件。通过流式细胞术检测细胞凋亡水平,RT-qPCR和Western blot检测炎症反应相关因子的表达水平。采用超速离心法提取甲型流感病毒诱导的MLE-12细胞上清液中的外泌体,并通过透射电镜、纳米颗粒跟踪分析、Western blot及高通量单细胞测序检测外泌体形态、粒径、浓度、膜标志蛋白表达及其miRNA差异表达谱。结果:CCK-8实验结果显示,MOI=0.2的甲型流感病毒干预8 h的MLE-12细胞活力抑制率最为符合本研究需要。以该条件干预细胞,凋亡率(24.11%±0.17%)显著升高;甲型流感病毒核蛋白(NP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的mRNA和蛋白表达水平均显著升高。透射电镜观察到提取的外泌体为圆形的囊泡状;纳米颗粒跟踪分析检测到甲型流感病毒感...     

麻杏石甘汤通过外泌体miR-1249-5p靶向SLC4A1抑制流感病毒细胞级联损伤效应研究

目的 探究麻杏石甘汤通过外泌体miR-1249-5p靶向溶质载体家族4成员A1(solute carrier family 4 member 1,SLC4A1)抑制流感病毒诱导的肺上皮细胞损伤-巨噬细胞极化的级联损伤效应的作用机制。方法 以肺上皮细胞为研究对象,采用CCK-8检测麻杏石甘汤含药血清的安全剂量和对流感病毒刺激肺上皮细胞治疗剂量,NanoSight鉴定肺上皮细胞源外泌体的粒径和浓度,qRT-PCR检测外泌体中miR-1249-5p基因表达。以与肺上皮细胞源外泌体共培养的巨噬细胞为研究对象,采用qRT-PCR检测巨噬细胞中miR-1249-5p、SLC4A1和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路相关基因表达;Western blotting检测巨噬细胞中SLC4A1和NF-κB通路相关蛋白表达;流式细胞术和qRT-PCR检测巨噬细胞M1/M2极化表型。结果 CCK-8结果显示,10%和20%的麻杏石甘汤含药血清对肺上皮细胞无细胞毒性,显著抑制流感病毒诱导的肺上皮细胞损伤(P<0.05、0.01);NanoSight检测各组肺上皮细胞源外泌体...     

龟鹿二仙胶对少弱精子症小鼠的保护作用及机制研究

目的：研究龟鹿二仙胶对少弱精子症模型小鼠的保护作用及其机制。方法：50只KM小鼠随机分为正常组(Control)、模型组(Model)、左卡尼汀组(L-car)、龟鹿二仙胶低剂量组(GLEXJ-L)和龟鹿二仙胶高剂量组(GLEXJ-H),每组10只，正常组注射等剂量生理盐水，其余各组按照75 mg/kg的剂量给予环磷酰胺进行腹腔注射，连续3 d,建立少弱精子症模型。模型建立后，各组按照临床等效剂量给予相应药物或等量生理盐水灌胃4周，观察各组动物一般情况；记录动物体质量、脾脏和睾丸质量，并计算脾指数和睾丸指数；取附睾进行精子数量和活动率计算；HE染色观察各组动物睾丸和脾脏病理变化；免疫组化法定位各组动物睾丸组织ZO-1、TGF-β3、Smad1和Smad4蛋白并检测其表达水平；ELISA法检测各组小鼠血清中黄体生成素(LH)和睾酮(T)的水平。结果：与正常组比较，模型组小鼠睾丸组织中生精细胞变性，数量减少，排列紊乱；睾丸指数、脾脏指数、精子数量和活动率、血清T水平和ZO-1蛋白表达水平显著降低(P<0.05),LH水平显著升高(P<0.05);与模型组比较，左卡尼汀组、龟鹿二...     

CD4+T细胞在流感病毒感染诱发细胞因子风暴及急性肺损伤中的研究进展

CD4⁺T细胞作为细胞免疫的主要武器，在控制和清除感染方面起着至关重要的作用，是机体抵抗感染性疾病的重要屏障。流感病毒感染引起的呼吸道感染性疾病具有极高的传染性、发病率及病死率，其感染机制较为复杂，尚未得到全面阐述。机体在流感病毒感染后诱发的旺盛免疫反应被称为“细胞因子风暴”，与过激的促炎细胞因子和广泛的组织损伤有关，最终可能导致急性肺损伤。因此，本文总结目前研究进展，重点阐述了CD4⁺T细胞在流感病毒感染诱发细胞因子风暴的作用机制及急性肺损伤中的影响，为后续研究提供相关思路及理论指导，以期为流感病毒引起的疾病带来新的有效诊疗方法。     

基于铁死亡途径探讨龟鹿二仙胶治疗少弱精子症的作用及机制

目的 通过网络药理学和体内外实验研究，探讨铁死亡在龟鹿二仙胶治疗少弱精子症中的作用。方法 通过TCMSP数据库、HERB数据库、PubChem数据库和Swiss数据库获取龟鹿二仙胶的活性成分和作用靶点，Genecard数据库和FerrDb数据库检索铁死亡基因，GEO数据库获取少弱精子症差异基因，三者取交集构建蛋白互作网络，进行基因本体（gene ontology,GO）功能和京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）通路富集分析。使用H2O2刺激小鼠睾丸支持细胞构建氧化应激损伤模型，并用龟鹿二仙胶含药血清干预损伤模型细胞，观察细胞形态，检测细胞活性氧（reactive oxygen species,ROS）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）、总铁和亚铁离子含量，透射电镜观察细胞超微结构，qRT-PCR和Western blotting检测细胞谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)和酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(acyl-CoA synt...     

Toll样受体4在A型流感病毒诱导的小鼠肺部炎症中的作用机制

目的：通过研究A型流感病毒（influenza A virus, IAV）诱导的野生型（wild-type, WT）和Toll样受体4(Toll-like receptor 4, TLR4)敲除型（TLR4del）C57BL/6小鼠肺部炎症差异，探讨TLR4在IAV诱导的肺部炎症中的作用机制。方法：设立WT组和TLR4del组，用IAV滴鼻感染WT小鼠和TLR4del小鼠以构建小鼠肺炎模型，每组各48只。分别在感染0、1、3、5、7和9 d处理动物。常规法检测小鼠体质量，计算肺指数、脾指数和胸腺指数。使用苏木精-伊红（hematoxylin-eosin, HE）染色法检测不同时间点各组小鼠肺组织病理变化。ELISA实验检测小鼠支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β, IL-1β)、IL-6和IL-8的含量，探讨不同时间点各组小鼠炎症因子的分泌情况。RT-qPCR、免疫组化和Western blot检测肺组织中TLR4、髓样分化因子88(myeloid differentiation ...