原发性t(10;11)易位白血病CALM和AF10融合转录检测及其体外化疗敏感性分析

为了研究CALM和AF10融合转录在原发性t( 10 ;11)易位白血病形成和治疗中的作用 ,采用RT PCR技术检测了 5例原发性t( 10 ;11)易位白血病患者CALM AF10融合转录 ,体外MTT法检测了其白血病细胞体外化疗敏感性。结果表明 :在 5例原发性t( 10 ;11)易位白血病患者中检测到 5种分子量的AF10 CALM融合转录和 4种分子量的CALM AF10融合转录 ;MTT法显示 5例原发性t( 10 ;11)易位白血病患者的白血病细胞有 2例对体外化疗敏感 ( 60 % ) ,3 6例非t( 10 ;11)易位白血病细胞有 3 1例对体外化疗敏感 ( 86% ) ,统计分析有显著差异 (P <0 0 1) ,与临床治疗结果一致。化疗药物处理 72小时 ,t( 10 ;11)白血病细胞的凋亡率为 ( 16.3 7± 2 .5 6) % ,而非t( 10 ;11)白血病细胞的为 ( 3 3 .75± 5 .5 9) % ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论 :CALM AF10是t( 10 ;11)易位白血病的常见特点之一 ,可能与该白血病发生密切相关 ,且t( 10 ;11)易位白血病患者预后较差。     

亚砷酸对白血病K562/A02细胞的作用及机制

目的研究亚砷酸对白血病多药耐药细胞株K562/A02细胞的作用及对多药耐药基因1（mdr1）、P糖蛋白（P-gp）和血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响,探讨亚砷酸逆转白血病多药耐药（MDR）的作用机制。方法将K562/A02细胞与不同浓度的亚砷酸（0、0.5、2.0、5.0μmol/L）共同孵育,分别在24、48、72h时,用Wrights染色法观察K562/A02细胞形态,流式细胞术（FCM）检测凋亡细胞,MTT法检测细胞增殖活性,RT-PCR法检测mdr1mRNA的表达,免疫组织化学法观察P-gp表达,并用ELISA法检测VEGF的浓度。结果随着亚砷酸作用浓度和时间的增加,K562/A02细胞的数目减少,并出现凋亡形态学改变,FCM显示随着作用浓度和时间的增加,细胞凋亡率逐渐上升;从作用48h组开始,mdr1mRNA及P-gp的表达出现显著降低（P〈0.05）,mdr1mRNA条带颜色较空白对照组明显变浅,mdrl/GAPDH灰度比值下降,此时,P-gp的灰度值上升,且随亚砷酸作用浓度和时间的增加,mdr1mRNA条带颜色进一步变浅,表达水平进一步下降;ELISA法检测表明从0.5μmol/L作用24h组开始,VEGF浓度即下降至405.02pg/mL（P〈0.05）,相同作用时间下以5.0μmol/L组较其它浓度组下调VEGF的作用最为显著。结论亚砷酸呈药物浓度-时间依赖性抑制K562/A02细胞增殖,诱导其凋亡,下调VEGF表达,有效抑制了mdrlmRNA的产生和P-gp的合成。     

应用RT-PCR和荧光原位杂交监测急性早幼粒细胞白血病微小残留白血病

目的应用RT-PCR和荧光原位杂交技术(FISH)检测急性早幼粒细胞白血病(APL)患者体内PML-RARα融合基因的表达,监测患者体内微小残留白血病的情况。方法采用全反式维甲酸(ATRA)和三氧化二砷(As2O3)联合治疗APL,运用RT-PCR和FISH技术检测和分析APL患者体内诱导缓解后及巩固维持治疗后PML-RARα融合基因。结果 46例APL患者PML-RARα融合基因均为阳性,其中34例患者在诱导化疗结束达完全缓解后检测,25例(73.5%)患者基因检测呈阴性,9例(26.5%)患者RT-PCR和/或FISH检测阳性,融合基因阳性和阴性复发APL的预测值分别为44.4%和4.3%;31例再经ATRA及As2O3巩固及维持治疗后,27例患者达到分子生物学缓解,无复发病例,4例融合基因阳性患者,3例复发APL,其复发APL的阳性预测值为75%。结论 RT-PCR和FISH技术是非常有效的监测APL患者体内微小残留白血病的实验方法,其对疾病的诊断、治疗及预后评估具有重要临床价值。     

RNA干扰PCGF4/Bmi-1抑制白血病K562细胞系增殖

目的:利用RNAi方法针对PCGF4/Bmi-1基因,抑制其在慢性髓性白血病K562细胞中的过表达,观察K562细胞的增殖性改变。方法:RT-PCR检测PCGF4/Bmi-1基因在K562中的表达情况。利用Invitrogen公司RNAi慢病毒表达载体系统,构建针对PCGF4/Bmi-1基因慢病毒RNAi表达载体。转染K562细胞,瞬时干扰PCGF4/Bmi-1基因的表达,实时定量PCR检测干扰前后基因表达变化。利用生长曲线测定干扰载体转染前后细胞生长速度变化。结果:PCGF4/Bmi-1慢病毒RNAi表达载体成功地构建,并建立瞬时干扰PCGF4/Bmi-1基因的K562细胞系。实时定量PCR检测,PCGF4/Bmi-1基因在K562细胞系中过表达被显著抑制。生长曲线测定,PCGF4/Bmi-1基因干扰后细胞增殖明显变慢。结论:干扰PCGF4/Bmi-1基因,降低该基因表达后能明显减低细胞的生长速度。     

红细胞补体受体1浓度测定对系统性红斑狼疮的临床意义

目的应用对红细胞补体受体1(ECR1)分子容量检测的实验方法,研究其对系统性红斑狼疮(SLE)的临床价值。方法戊二醛固定红细胞,将3×109的红细胞定量“液相包被”于V型板中,依次加入抗ECR1单抗碱性磷酸酶标记的第二抗体及可溶性底物显色,移显色液于比色孔,405nm比色,计算其吸光度A值。结果正常健康人ECR1分子数明显高于SLE患者(P<0.01)。结论本方法能准确测定ECR1分子的浓度及表达的差异性,其变化与SLE的发生发展及转归有明显的相关性,故对该疾病的诊断及疗效的评价有重要的临床价值。     

6-磷酸葡萄糖异构酶及抗CCP抗体等检测对类风湿关节炎的诊断价值

目的 评价抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、6-磷酸葡萄糖异构酶(GPI)、类风湿因子(RF)对类风湿关节炎(RA)的诊断价值. 方法 检测148例RA患者组、126例其他自身免疫性疾病患者组和110例正常对照组血清中RF(速率散射比浊法)、抗CCP抗体(ELISA法)和GPI(ELISA法),比较分析其检测结果一致性和对RA的诊断效率. 结果 RA患者组抗CCP抗体和GPI的平均浓度显著高于自身免疫病患者组和正常对照组(P＜0.05),抗CCP和GPI对RA诊断的特异性高于RF(P＜0.05).2种或3种指标联合检测对RA诊断的敏感性减低,但其特异性高于单项检测指标(P＜0.05). 结论 抗CCP抗体和抗GPI均是RA敏感而特异性血清学指标,两者与RF综合分析,有助于RA的早期诊断,并提高RA的诊断效率.     

骨髓微环境细胞形态学与再生障碍性贫血病理分型及疗效的关系

为了探讨再生障碍性贫血(再障)发病机理、分型与治疗的关系,我们采用骨髓小粒展片法分析36例再障患者骨髓微环境(Bmm)形态学的改变,明确其病理分型,予以分组治疗,取得初步疗效。     

维甲酸对急性早幼粒细胞性白血病抗凝和纤溶系统的影响

目的：比较急性早幼粒细胞性白血病（APL）及其他类型急性白血病（AL）患者抗凝和纤溶系统的变化及维甲酸（ATRA）治疗对APL患者抗凝和纤溶系统的影响。方法：观察42例AL治疗前及11例APL治疗前后抗凝、纤溶指标的变化。结果：APL发病时血清α1抗胰蛋白酶（α1－AT）、血浆D－二聚体（D－D）升高，血浆抗凝血酶Ⅲ（AT－Ⅲ）降低、α2－抗纤溶酶（α2－PI）、纤溶酶原活性（PLG：A），纤维蛋白原含量（FG）降低，且与其他类型AL及正常组比较差异有显著性，经ATRA治疗后各项指标逐渐恢复正常。结论：APL存在较其他类型AL更为明显的抗凝和纤溶性增强，ATRA治疗能纠正这种异常，且在治疗早期即可减轻患者的出血症状。     

t(10;11)白血病5例报告

我们分析了5例t(10；11)易位白血病患者血液标本，采用RTPCR技术检测了CALM／AF10融合转录。该研究有助于认识白血病发生，且对t(10；11)易位白血病患者预后具有一定作用．现报告如下。     

维甲酸对急性早幼粒细胞性白血病抗凝和纤溶系统的影响

目的比较急性早幼粒细胞性白血病(APL)及其他类型急性白血病 (AL)患者抗凝和纤溶系统的变化及维甲酸 (ATRA )治疗对APL患者抗凝和纤溶系统的影响。方法观察 42例AL治疗前及 11例APL治疗前后抗凝、纤溶指标的变化。结果APL发病时血清α1抗胰蛋白酶 (α1 AT)、血浆D 二聚体 (D D)升高 ,血浆抗凝血酶Ⅲ (AT Ⅲ )降低、α2 抗纤溶酶 (α2 PI)、纤溶酶原活性 (PLG :A )、纤维蛋白原含量 (FG)降低 ,且与其他类型AL及正常组比较差异有显著性。经ATRA治疗后各项指标逐渐恢复正常。结论APL存在较其他类型AL更为明显的抗凝和纤溶活性增强 ,A TRA治疗能纠正这种异常 ;且在治疗早期即可减轻患者的出血症状