沙眼衣原体与解脲支原体感染的临床分析

目的了解本地区泌尿生殖系统沙眼衣原体(CT)和解脲支原体(UU)感染的总体情况,为临床早期防治提供实验室依据。方法采用实时荧光定量PCR(QR-PCR)技术对2013年1月至2015年10月于该院门诊、体检或住院送检的34 433例泌尿生殖道标本进行CT、UU核酸检测与分析。结果 34 433例标本中,检测出CT阳性1 103例,阳性率3.2%,UU阳性10 164例,阳性率29.52%,CT+UU联合感染阳性836例,阳性率2.43%;其中,女性患者标本中检出UU阳性率为53.55%,明显高于男性(11.24%),女性CT检出率为5.15%,高于男性(1.71%),差异有统计学意义(P0.01);CT、UU感染的年龄段主要集中在年龄≥21~30岁,其构成比为57.99%;其次为年龄≥31~40岁者,占36.76%;20岁以下和51岁以上者仅占0.66%,组间比较差异有统计学意义(P0.01)。结论本地区泌尿生殖系统以CT、UU的单独感染为主,UU感染居多,感染人群主要集中在青壮年,因此应用QR-PCR对青壮年特别是育龄期男女进行CT、UU筛查,对临床早期诊治有重要的指导意义。     

成都市新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症筛查分析

目的 了解成都地区新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症的发病分布情况.方法 采用NADP＋氧化还原酶法,对11 085例（男6 440例,女4 645例）就诊患儿进行红细胞中G6PD活性的定量检测.结果 在11 085例受检者中,检出G6PD缺乏者677例,总检出率6.1%.其中男婴545例,占男婴检查人数的8.46%（545/6 440）;女婴132例,占女婴检查人数的2.84%（132/4 645）.结论 成都地区G6PD缺乏症检出率较高,应在新生儿期常规开展G6PD检测,及早诊断,采取有效防范措施,预防由G6PD缺乏引起的新生儿高胆红素血症及核黄疸的发生.     

儿童噬血细胞性淋巴组织细胞增生综合征13例实验室诊断分析

目的分析儿童噬血细胞性淋巴组织增生综合征(HLH)实验室诊断指标的改变及其原因,帮助临床快速准确的诊断。方法回顾性分析2011年1月至2013年3月该院收治的13例HLH患者的实验室诊断资料。结果 HLH首发症状常为发热,肝、脾及淋巴结肿大,继而全血细胞减少,肝功能及凝血功能不同程度异常,骨髓组织细胞增多,可见噬血组织细胞。外周血细胞二系减少者占23.1%,三系减少者占69.2%,三酰甘油(TG)升高者占69.2%,血清铁蛋白(SF)升高者占100.0%,乳酸脱氢酶(LDH)升高者占100.0%,丙氨酸氨基转移酶(ALT)升高者占69.2%,纤维蛋白原(FIB)下降者占76.9%。结论对不明原因持续高热,肝、脾及淋巴结肿大,外周血细胞二系或三系降低患儿均应进行HLH的一系列相关检查如肝功能、血脂、血凝、细胞免疫学及骨髓细胞形态学等初步诊断和判断预后,有条件者应进一步进行分子生物学检测以确诊。     

构建和鉴定PTEN基因的shRNA重组腺病毒表达载体

目的构建PTEN特异性shRNA重组腺病毒表达载体,为应用基因沉默技术进行缺血性脑损伤的基因治疗奠定基础。方法将前期构建的PTENshRNA特异性真核表达载体pGenesil-1-shRNA的表达启动子U6连同shRNA亚克隆至穿梭质粒pAdTrack,酶切及DNA测序鉴定后,将含PTEN基因的重组穿梭质粒pAdTrack-U6-shRNA经PmeI线性化后转化入pAdEasy-1感受态细菌。pAd-U6-shRNA质粒经PacI线性化后转染293细胞,包装重组腺病毒Ad-U6-shRNA,并进行PCR鉴定、病毒滴度测定及Westernblotting检测受感染海马神经元细胞内PTEN蛋白的表达。结果证实pAdTrack-U6-shRNA及pAd-U6-shRNA质粒构建正确,收获病毒后PCR及DNA测序结果证明Ad-U6-shRNA包被成功,受腺病毒感染海马神经元细胞内PTEN蛋白表达明显降低。结论成功构建了PTEN基因的shRNA重组腺病毒载体Ad-U6-shRNA,为应用基因沉默技术研究PTEN对缺血性脑损伤后的神经保护作用奠定了基础。     

妇女儿童医院临床血液学室间质评结果分析

目的探讨成都市妇女儿童中心医院临床血液学室间质评效果,进一步提高临床检验质量水平。方法回顾分析该院2012-2016年卫生部全血细胞计数、凝血试验、网织红细胞计数及血细胞形态学室间质评结果,统计各项目回报成绩、形态学图谱分布情况及回报结果符合率,同时分析数据偏移,了解实验室存在的问题。结果全国质评活动中,全血细胞计数平均成绩为100.0%,凝血试验除2016年第2次结果填写错误外,其余成绩均为100.0%,形态学正确率为89.2%,网织红细胞计数除2012年未参加外均通过。结论成都市妇女儿童中心医院临床血液学室间质评结果较满意,仍存在不足需及时改进。通过对室间质评结果的具体分析,对避免相同问题的再次出现以提高实验室检验质量水平有积极作用。     

血培养病原菌的临床分布及耐药性分析

目的分析该院血培养阳性菌株的构成及药敏情况,为临床治疗提供依据。方法对该院2014年1~8月3 342份血液标本进行培养,分离阳性病原菌进行鉴定及药敏试验。结果分离阳性菌101株,阳性率为3.02%,其中革兰阴性菌53株,占52.48%;革兰阳性菌38株,占37.62%;真菌4株,占3.96%。大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶阳性率分别为29.27%和33.3%。在凝固酶阴性葡萄球菌(MRSCN)和金黄色葡萄球菌(MRSA)中分别是68.42%和50.0%。结论目前该院血培养病原菌以革兰阴性菌为主,对分离菌株进行耐药监测可对临床抗菌治疗提供科学依据,降低病死率。     

以海马神经元为靶细胞Ad-Easy系统快速构建携带PTEN基因的重组腺病毒表达载体

摘要：目的：应用Ad-Easy腺病毒载体系统快速构建携带PTEN (Phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten)基因的重组腺病毒表达载体,为应用基因技术研究PTEN对缺血性脑损伤后的神经保护作用奠定基础。方法：采用RT-PCR法从大鼠海马神经元扩增获得目的基因PTEN, 克隆入pAdTrack-CMV穿梭质粒（含绿色荧光蛋白（Green fluorescence protein,GFP）基因）形成转移载体pAdTrack-CMV-PTEN,将其在大肠杆菌BJ5183内与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1同源重组;重组子酶切鉴定正确后转染HEK293细胞,PCR分析鉴定扩增情况及Western blot检测受腺病毒感染的海马神经元内PTEN蛋白的表达。结果：荧光显微镜检测到受腺病毒感染的HEK293细胞表达GFP,出现明显的细胞病变效应（Cytopathic effect,CPE）,经3轮扩增得到了病毒所需滴度。PTEN蛋白在受感染腺病毒神经元内表达显著增强。结论：利用Ad-Easy系统成功快速的构建了携带PTEN基因的腺病毒表达载体,为研究基因治疗缺血性脑损伤奠定了基础。     

血清ADA、CD4/CD8及RL在EBV-IM中的诊断价值

目的探讨血清ADA、CD4/CD8及RL在EBV-IM中的诊断价值。方法回顾性分析我院2019年1月至10月的116例EBV-IM患儿及同期62例EBV-IgM或EBV-IgG阳性但诊断非IM的患儿及30例正常体检儿童的ADA、CD4/CD8及RL实验室结果。结果 EBV-IM组患儿ADA和RL均明显高于正常对照组和EBV阳性非IM组（P <0.001）; CD4/CD8显低于正常对照组和EBV阳性非IM组（P<0.001）;血清ADA、CD4/CD8和RL诊断EBV-IM的最佳临界值分别为>31.4 U/L、≤0.4和>10%,特异度分别85.5%、95.2%和96.15%,灵敏度分别为:87.9%、81.7%和56.03%;ROC曲线下面积分别为0.884、0.939和0.81。结论 ADA在诊断EBV-IM上灵敏度最佳,CD4/CD8的ROC曲线下面积最高0.939,RL特异度最好,故ADA、CD4/CD8和RL进行综合诊断,才能更迅速准确地早期诊断和治疗。     

儿童急性淋巴细胞白血病MICM检测结果分析

目的了解儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的实验室特征,为临床分组、治疗和预后提供依据。方法对104例新诊断的ALL进行临床特征、形态学、免疫学、染色体核型分析和融合基因筛查等检验结果作相似性分析。结果新确诊的104例ALL最常见的是B-ALL,占91.4%,又以Common-B为主,占76.0%;男孩稍多于女孩(63∶41);发病年龄主要集中在1~10岁年龄段,占83.7%(87/104),外周血白细胞(WBC)计数在B-ALL和T-ALL有明显区别,差异有统计学意义(P0.05)。染色体核型分析检出率为71.05%,在B-ALL各分组和T-ALL中比较,差异无统计学意义(P0.05),但以Common-B为主,占88.9%。融合基因筛查共检出28例占26.90%,其中以Common-B中出现的TEL-AML1为主,占17.30%。结论临床上ALL以B-ALL中的Common-B最常见,外周血WBC计数可作为ALL诊断分型和预后判断的重要筛查指标,染色体核型分析和融合基因筛查在ALL的诊断、治疗和预后中有重要作用。     

下调PTEN对血管性痴呆大鼠海马神经元CREB的调节作用

目的探讨PTEN基因对血管性痴呆大鼠海马神经元CREB表达的影响机制。方法 30只大鼠随机分为正常组、AdR-siPTEN干预组、AdRFP阴性对照组,海马CA1区局部注射AdR-siPTEN腺病毒后2 d,采用双侧颈总动脉永久性结扎(2-VO)法建立血管性痴呆模型,4 w后应用HE染色检测神经元的损伤,RT-PCR和免疫组织化学检测CA1区Akt、CREB mRNA的表达。结果海马部位有PTEN基因红色荧光蛋白表达,并有PTEN基因的mRNA表达量明显下降(P0.01);HE染色显示,AdR-siPTEN组海马神经元损伤和变性程度明显轻于AdRFP阴性对照组大鼠;RT-PCR和免疫组化染色结果显示,与AdRFP组相比,AdR-siPTEN治疗组CA1区Akt、CREB的mRNA和蛋白表达水平显著升高(P0.05)。结论下调PTEN基因可通过Akt增加CREB的表达,从而改善血管性痴呆大鼠神经元突触可塑性,达到减轻神经元损伤、提高学习记忆和神经保护的目的 。