二氧化氯灭活水中脊髓灰质炎病毒的机制

目的探讨二氧化氯对脊髓灰质炎病毒核酸和衣壳蛋白的损伤在病毒灭活中作用,阐明二氧化氯灭活脊髓灰质炎病毒机制。方法观察不同质量浓度（0．1、0．2、0．4、0．8、1．2mg／L）和不同作用时间（0、1、2,4、8和12min）二氧化氯对脊髓灰质炎病毒的作用,用大片段逐步步移RT-PCR（10ng-overlapping RT-PCR）分析二氧化氯对病毒全基因组的损伤,用ELISA分析病毒衣壳蛋白的损伤,通过细胞培养检测病毒感染性。结果脊髓灰质炎病毒衣壳蛋白对二氧化氯抵抗力强于核酸;基因组各部分对二氧化氯抵抗力强弱存在差异;二氧化氯对PV1 5’-NCR124-679nt区域的损伤与PV1的灭活一致。结论二氧化氯主要通过破坏脊髓灰质炎病毒核酸而不是衣壳蛋白来灭活病毒;病毒基因组5’-NCR内二级结构区域的破坏对脊髓灰质炎病毒具有致死效应。     

细菌生物被膜菌群间遗传物质的转移

细菌在环境中多以生物被膜的形式存在.细菌间的基因水平转移能使细菌在短时间内产生新的基因型菌株,改变物种特征以适应环境的变化.从生物强化策略和生物被膜的结构特点来讲,在生物被膜菌群中细菌的基因水平转移更具优势和特点.     

氯灭活水中脊髓灰质炎病毒机制的研究

目的探讨氯对脊髓灰质炎病毒核酸和衣壳蛋白的破坏在灭活病毒中的作用,并对病毒基因组受损区域进行定位,阐明氯灭活脊髓灰质炎病毒的机制。方法以不同剂量(0.1、0.5、1.0、1.5和2.0mg/L)的有效氯对脊髓灰质炎病毒作用不同时间(0、15、30、45和60min),采用大片断逐步步移PCR(long-overlapping PCR)分析氯对病毒全基因组的损伤,以ELISA技术分析氯对病毒衣壳蛋白的破坏,以细胞培养检测病毒感染性。结果脊髓灰质炎病毒各部分对氯的抵抗力强弱存在如下关系:病毒衣壳>基因组蛋白编码区>基因组5′端非编码区(noncoding region,NCR)>基因组3′端NCR>poly A尾;脊髓灰质炎病毒的polyA尾和3'端NCR破坏可造成病毒的感染性下降,但不能完全灭活病毒;5′端NCR的破坏与病毒感染性的消失一致,损伤区域主要位于富含二级结构的区域。结论氯主要通过破坏脊髓灰质炎病毒核酸而非衣壳蛋白灭活病毒;病毒基因组5′NCR内二级结构区域的破坏对脊髓灰质炎病毒具有致死效应。     

云南白药水提取物抑制铜绿假单胞菌AlgR2-AlgR1双组份调控系统磷酸化研究

目的：研究亚致死剂量的云南白药水提取物（Aquatic Extract of Yunnan Baiyao,AEYB）对铜绿假单胞菌（Pseudomonas Aeruginosa,PA）AlgR1-AlgR2双组份调控系统的磷酸化、海藻酸盐的生物合成及生物膜形成的影响。方法：通过放射性同位素标记方法研究AEYB对AlgR1-AlgR2磷酸化的影响;采用real-time PCR分析YBX海藻酸盐合成酶基因algD转录的影响;用咔唑法和结晶紫法分别对海藻酸盐和静态生物膜进行定量测定。结果：AEYB并不抑制AlgR2的自磷酸化,但能抑制AlgR2的磷酸基团向AlgR1转移,从而抑制AlgR1的磷酸化。AEYB可显著下调algD基因的转录,并抑制alginate的合成,最终减少PA静态生物膜的形成。结论：云南白药可通过抑制AlgR1-AlgR2系统的磷酸化的途径来减少PA的alginate的生物合成,对PA生物膜的形成具有抑制作用。     

粤西地区产ESBLs肺炎克雷伯菌的临床分布特点及耐药性分析

目的 分析粤西地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌(KPN)的临床分布特点及耐药机制,以指导临床合理使用抗菌药物.方法 运用全自动微生物分析仪鉴定细菌,采用K-B纸片扩散法进行药敏试验及ESBLs的表型筛选和确证试验;采用SPSS13.0分析数据.结果 268株KPN产ESBLs菌株的检出率为30.59％,产ESBLs阳性菌株组耐药率明显高于阴性菌株组;标本的最主要来源为痰液(60.82％);临床分布以重症监护科和呼吸内科最常见,分别占38.43％、13.43％;感染者以老年人为主(52.24％);对氨苄西林耐药率最高(98.51％),其次哌拉西林为76.49％,对头孢霉素类、氨基糖苷类、喹诺酮类、磺胺类和大环内酯类抗菌药物的耐药率在29.10％～64.18％;对哌拉西林/他唑巴坦和头孢派酮/舒巴坦的耐药率分别为19.78％、15.67％,对美罗培南和亚胺培南最敏感.结论 粤西地区产ESBLs KPN耐药形势严峻,产ESBLs与KPN的耐药性关系密切,亚胺培南是本地区治疗产ESBLs KPN感染的首选药物.     

呼吸道肺炎克雷伯菌耐药性与 CTX-M 型 ESBLs 的研究

目的：探讨来源于呼吸道肺炎克雷伯菌(KP)耐药性与CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的关系。方法采用PCR 扩增和测序分析检测 KP 质粒和染色体上的 CTX-M 型 ESBLs 基因;采用纸片扩散法检测抗菌药物敏感性;使用χ2检验分析相关数据。结果有 CTX-M-1群酶和 CTX-M-25群酶检出,CTX-M 型 ESBLs 的总检出率为39.02%(48株),其中质粒和染色体上同时携带 CTX-M-1群酶的检出率为26.02%(32株)。β-内酰胺类抗菌药物头孢唑林、氟喹诺酮类抗菌药物左旋氧氟沙星、磺胺类抗菌药物复方磺胺甲恶唑等在 CTX-M 型 ESBLs 阳性组的耐药率明显高于阴性组(P <0.05)。结论在来源于呼吸道的 KP 中,在质粒和染色体上同时携带 CTX-M-1群酶基因最常见,CTX-M 型 ESBLs 与 KP 对某些抗菌药物产生耐药性关系密切。     

细胞壁锚定蛋白编码基因SasX 与金黄色葡萄球菌耐药性的相关性研究

目的 探讨细胞壁锚定蛋白编码基因SasX 与金黄色葡萄球菌耐药性的相关性。方法 PCR扩增SasX 基因;运用琼脂稀释法检测抗菌药物的最小抑菌浓度;采用卡方检验和确切概率法分析数据。结果 SasX 基因的检出率为28.75%（92株）,其中在MRSA和MSSA中的检出率分别是33.15%（61株）和22.79%（31株）;SasX 基因在ICU和痰液中的检出率分别为42.05%（37株）和26.94%（45株）。ICU等的SasX 基因阳性株构成比均明显比阴性株高（P ＜0.05）,但在MRSA中,神经外科和呼吸内科的SasX 基因阳性株构成比却明显比阴性株低（P ＜0.05）;头孢西丁等在SasX 基因阳性株中的耐药率明显高于阴性株（P ＜0.05）;在MRSA中,阿米卡星、复方新诺明等在SasX 基因阳性株中的耐药率明显高于阴性株,而在MSSA中,仅阿米卡星、红霉素在SasX 基因阳性株中的耐药率明显高于阴性株（P ＜0.05）。结论 SasX 基因阳性金黄色葡萄球菌更容易产生耐药性（对MRSA影响更大）。SasX 基因在各个临床科室和各种标本中的检出情况各异,应个体化处理。     

纳米氧化铝在多重耐药质粒RP4接合转移过程中对细菌形态学的影响

目的探讨纳米氧化铝(平均粒径为20nm)对液相条件下多重耐药质粒RP4接合转移的影响,并从形态学角度初步探讨其影响机制。方法接合供体菌为大肠杆菌HB101(RP4),受体菌为Salmonella aberdeen Kauffmann 50312(strR),供、受体菌液均为109cfu/ml(浓度比为1∶3),纳米Al2O3浓度分别为0.005、0.05、0.5、5、50mmol/L,25℃静止接合8h后计算转接合子数,然后采用透射电镜和激光扫描共聚焦显微镜进行形态学研究。结果RP4的接合转移随着纳米Al2O3浓度的升高具有上升趋势。5mmol/L和50mmol/L纳米Al2O3组接合率分别为空白对照组的150倍和40倍,差异均有统计学意义。透射电镜观察结果表明,空白对照组只能观察到单个供、受体菌接合,5mmol/L和50mmol/L纳米Al2O3组能观察到多个细菌同时发生接合的情况;50mmol/LAl2O3组一些细菌观察不到完整的细胞膜结构,该损伤可能是引起50mmol/L纳米Al2O3组接合率低于5mmol/L纳米Al2O3组的原因。激光扫描共聚焦显微镜观察结果提示纳米Al2O3能损伤细菌的细胞膜,细胞膜的损伤程度与进入细菌的纳米Al2O3的浓度呈正相关。结论纳米Al2O3能够促进接合子的产生,其影响机制可能是因为纳米Al2O3能够改变细胞膜通透性,间接影响接合过程,或者直接促进接合基因的表达所致。     

一起多细菌引起的食物中毒调查

2004年9月14～15日，天津市某高校发生群体食物中毒疫情，我们组成调查组深入现场进行调查，根据流行病调查和实验室检验，并结合临床症状确认该起食物中毒是由多种细菌协同引起的。现将结果报告如下。