VX-680抑制肝癌HepG2细胞恶性表型的分子机制研究

目的探究VX-680对肝癌HepG2细胞恶性表型的影响及其分子机制。方法取肝癌细胞系HepG2细胞进行培养,分别给予0μmol/L、4μmol/L、8μmol/L、16μmol/L浓度VX-680进行处理,采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法、平板克隆法、4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)法、体外HUVEC小管形成实验检测肝癌HepG2细胞增殖、凋亡及血管生成等生物学行为,分别采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、Western Blot法测定细胞磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)、血管内皮生长因子(VEGF)基因mRNA、蛋白表达情况。结果①VX-680各浓度处理组细胞增殖抑制率显著高于对照组(P<0.05),克隆形成数显著低于对照组(P<0.05),随着浓度的升高,增殖抑制率、克隆形成数升高或降低幅度加大(P<0.05)。②DAPI染色实验示,各浓度VX-680作用下细胞可见不同程度凋亡,随浓度升高细胞凋亡数增多,组间比较差异具统计学意义(P<0.05)。③小管生成实验结果显示,与0μmol/L VX-680组比较,4μmol/L、8μmol/L、16μmol/L浓度VX-680作用下小管形成数逐渐减少,随着浓度的升高,小管生成数减少,差异具统计学意义(P<0.05)。④RT-PCR、Western-blot实验显示,随着处理浓度的升高,细胞PI3K、Akt、VEGF基因mRNA、蛋白表达均显著降低,差异具统计学意义(P<0.05)。结论VX-680可抑制肝癌HepG2细胞增殖、凋亡及血管生成作用,且存在明显的剂量效应,这一作用机制可能与其抑制PI3K/Akt通路的活性及VEGF的表达相关。