亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性及血浆同型半胱氨酸水平与脑血管病的关系

目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性及同型半胱氨酸(Hcy)水平与脑血管病的关系.方法应用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)技术分析223例脑血管病患者及100名正常对照者的MTHFR基因多态性,同时应用高效液相色谱法(HPLC)测定其血浆Hcy水平.结果 MTHFR基因677位T等位基因携带频率脑血管病组(48.9%)显著高于正常对照组(30.5%,P<0.05),在脑出血患者组(53.3%)与脑梗死患者组(47.2%)之间差异无显著性(P>0.05);脑血管病组血浆Hcy水平[(20.01±8.89) μmol/L]显著高于对照组[(9.12±3.19) μmol/L,P<0.05],而脑出血患者组[(21.71±7.72) μmol/L]与脑梗死患者组[(19.35±8.51) μmol/L]间差异无显著性(P>0.05);各组中MTHFR TT型、TC型血浆Hcy浓度明显高于CC型.结论 MTHFR C677T突变可引起血浆Hcy水平升高,从而增加患脑血管病的危险度.     

检测细胞内细胞因子的生物素-链霉亲和素免疫细胞化学法的建立及初步应用

目的建立检测细胞内细胞因子的生物素-链霉亲和素免疫细胞化学法(BSA-ICC)并作临床初步应用.方法从健康人外周血单个核细胞(PBMC)中富集CD4细胞,加入莫能霉素,用不同浓度的佛波醇酯(PMA)和钙离子载体(A23817)诱导CD4细胞不同时间,比较其胞内表达白细胞介素-2(IL-2)/白细胞介素-4(IL-4)的细胞百分率,确定最适诱生条件;用不同稀释度的IL-2McAb、IL-4McAb、不同浓度的生物素化羊抗鼠IgG(bio-SAM IgG)和辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(HRP-SA)作棋盘配比试验,确认McAb、bio-SAM IgG和HRP-SA的最适浓度,根据上述结果建立了检测细胞内细胞因子的BSA-ICC法.用所建方法检测20名健康献血员、16例妇科良性疾病和18例妇科恶性肿瘤患者CD4细胞中表达IL-2/IL-4细胞的百分率.结果诱导CD4细胞胞内表达IL-2和IL-4的细胞最高百分率的PMA和A23817浓度分别为100 μg/L和2.0 μmol/L,诱导高峰时间分别为5和7 h,BSA-ICC法中所用IL-2McAb、IL-4McAb最适稀释度分别为1∶ 20和1∶ 40,bio-SAM IgG和HRP-SA浓度分别为10～15 μg/ml和15 μg/ml.20名健康献血员、16例妇科良性疾病和18例妇科恶性肿瘤患者CD4细胞中分泌IL-2的细胞百分率分别为(45.90±4.39)%、(37.28±2.67)%和(25.19±3.49)%,分泌IL-4的细胞百分率分别为(10.5±1.50)%、(9.94±1.06)%和(16.13±2.50)%,IL-2+CD4+/IL-4+CD4+比值分别为3.65±0.94、3.55±0.76和1.27±0.26.结论所建方法可用于T辅助(Th)细胞亚型的测定,从而判断Th细胞的极化状态.妇科恶性肿瘤患者Th细胞功能失衡极化,呈Th2反应,可能与恶性肿瘤的发生有关.     

结直肠癌C-erbB-2基因启动子CpG岛甲基化状态及其与C-erbB-2蛋白表达的关系

目的了解结直肠癌组织C—erbB-2基因启动子区CpG岛甲基化状态、C-erbB-2蛋白表达水平及两者之间的关系。方法取经病理确诊的43例结直肠癌组织和相应癌旁组织，分别用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）和免疫组织化学法（IHC）检测C-erbB-2启动子区CpG岛的甲基化和C-erbB-2蛋白表达水平。结果癌组织和癌旁组织中C—erbB-2启动子区CpG岛甲基化率分别为44．2％和74．4％，差异具有统计学意义（P=0．004）。癌组织和癌旁组织中C—erbB-2蛋白过度表达率分别为67．4％和27．9％，差异具有统计学意义（P=0．000）。C—erbB-2蛋白表达水平与肿瘤分期相关。结直肠癌组织C—erbB-2启动子区CpG岛甲基化状态与C—erbB-2蛋白表达水平呈显著相关（r=0．331，P=0．03）。结论结直肠癌中C—erbB-2基因启动子区CpG岛的低甲基化可能在C—erbB-2蛋白过度表达中起一定作用，有望成为有用的肿瘤分子诊断标记和治疗靶点。     

快速检测尿微量白蛋白的半定量金免疫渗滤法的研究

目的　建立一种伴有质控点的金免疫渗滤法 ,用于半定量检测人尿中的微量白蛋白。方法　应用自制的 2株抗人白蛋白单克隆抗体 ,其中一株包被在固相膜上 ,另一株与胶体金结合 ,组成金免疫渗滤试剂。膜上另包被 2种浓度的人白蛋白 ,用于测定时的定量质控。结果　本法经人白蛋白标准液测定 ,结果判定可分为 <30、30～ 10 0、10 0～ 2 0 0、>2 0 0mg/L 4个半定量区 ;12 6例经散射免疫浊度定量测定白蛋白浓度的临床尿标本用于本法的对比测定 ,结果符合性良好。结论　本法具有半定量和质控的特点 ,结果可靠 ,适用于糖尿病、高血压等并发肾病的早期诊断 ,方法简便、快速 ,特别适合中、小医院和门诊部使用。     

IL-2和IFN-γ等免疫调节剂对人PBMC表达CD2抗原的影响

采用人PBMC为实验体系,用本中心建立的生物素 链霉亲和素免疫细胞化学法CD2+ 细胞增长试验对IL 2 和IFN γ等9 种免疫调节药物进行活性鉴定,并用流式细胞仪加以验证。结果表明,IL 2 、IFN γ和TNF 等重组细胞因子制剂均对人PBMC表达CD2 抗原有强促进作用,CD2+ 细胞增长率在100 % 左右,LMZ、转移因子、核酪以及胸腺肽等生物制品的作用稍逊,CD2+ 细胞增长率在50 % ～70% ,不同厂家生产的胸腺肽制剂对CD2 抗原表达显示不同程度的促进作用,地塞米松则有抑制CD2 抗原表达的作用,据此认为CD2+ 细胞增长试验在筛选和鉴定免疫制剂中具有良好的应用价值     

流式细胞术检测抗中性粒细胞抗体方法的建立及临床初步应用

目的建立适用于临床的流式细胞术（FCM）检测抗中性粒细胞抗体（ANA）的方法,并作临床初步应用。方法采用FCM,以前向散射和侧向散射参数区分全血标本中的淋巴细胞和粒细胞,设定粒细胞门,用CD16b-藻红蛋白（PE）和CD177-别藻蓝蛋白（APC）单克隆抗体分别检测中性粒细胞中表面表达CD16b和CD177抗原细胞的百分率。用所建方法检测健康对照32名,确定参考范围,以此作为判断受检者血液中抗CD16b或CD177抗体存在与否的依据。检测外周血白细胞（WBC）总数〈4.0×109/L且中性粒细胞绝对计数（ANC）〈2.8×109/L的59例患者的CD16b和CD177百分率,并对其中中性粒细胞表达CD16b和/或CD177百分率低于参考范围（即判为相应抗体阳性）的患者给予激素治疗,观察疗效。结果健康人群中性粒细胞中表达CD16b和CD177的百分率分别为98.36%±1.53%和74.95%±11.07%,据此分别确定了健康人群中性粒细胞表达CD16b和CD177的参考范围分别为CD16b〉95.36%、CD177〉53.25%（即〉x珋-1.96s）。59例患者中有23例（39.0%）ANA阳性,其中ANC〈2.0×109/L患者的ANA阳性率（50.0%）远高于ANC〉2.0×109/L患者（27.6%）。ANA阳性患者经激素治疗后,WBC和ANC上升。结论 FCM检测抗中性粒细胞CD16b和CD177抗体是自身免疫性中性粒细胞减少症（AIN）实验简便、快捷的诊断方法,有助于AIN的诊断、鉴别诊断和疗效判断。     

幼婴的免疫力和免疫接种

1997年11月17～19日在法国昂西召开了关于幼婴免疫力的国际研讨会,会议由法国Mérieux基金会和世界卫生组织联合主办。研究免疫系统发育的专家、参与婴儿疫苗研制和评价的儿科专家和疫苗制造业代表聚集一堂讨论了新生儿免疫系统的发育和幼婴免疫接种的策略。现将会议内容综合报道如下。     

抗细胞因子自身抗体

输注重组细胞因子可导致患者产生抗细胞因子自身抗体,T细胞免疫耐受的消失是健康个体含有高亲和力抗细胞因子自身抗体的原因,从而导致输注IgG制品者体内含有多种抗细胞因子自身抗体,造成细胞因子治疗失效.细胞因子疫苗可用于抗细胞因子治疗.临床上值得关注的是,抗细胞因子抗体会干扰某些细胞因子的测定,某些抗细胞因子抗体水平可判断免疫炎性疾病的预后.     

绝经期女性脑梗死患者雌激素水平与血脂关系研究

目的 研究绝经期女性脑梗死患者血清中雌二醇(E2)、血脂含量变化,探讨雌激素对缺血性脑血管疾病的关系。方法 取78名绝经期女性脑梗死患者和62名对照组患者空腹静脉血,测定血清E2、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋门胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白-AI(Apo-AI)及载脂蛋白B100(Apo-B100)。结果脑梗死组E2水平(12.86pg/ml)低于对照组(25.59pg/ml),有显著差异(P<0.01)。脑梗死组TG、TC、LDL-C、Apo-B100显著高于对照组(P分别<0.01、0.01、0.01、0.05),脑梗死组HDL-C显著低于对照组(P<0.01),脑梗死组ApoA-I与对照组相比无显著性差异(P>0.05)。雌激素水平与TG、TC、LDL-C、Apo-B100呈显著负相关(r分别为-0.63、-0.44、-0.57、-0.30,P<0.01),与HDL-C呈显著正相关(r=0.53,P<0.01)。结论 雌激素水平降低可导致血脂谱异常改变,从而促进动脉粥样硬化,低雌激素水平可能是缺血性脑血管病发生的危险因素之一。     

化工企业工人上岗前几项免疫学指标检测结果

化工企业工人上岗前几项免疫学指标检测结果上海市化工职业病防治研究所职业病科陆新华，沈国芳，陶蕴玲，金惜雯上海市静安医化所免疫室朱晴晖，段玲琴，陆俊茜职业病普查是积极开展职业病防治工作的重要手段。但是，因缺乏上岗前的健康资料，特别是缺乏临床检验项目结果...