《寄生虫检验学》课程教学改革的初步研究

《寄生虫检学》是医学检验专业的一门专业主干课．为更好地发挥教师和学生救与学的积授性．创造良好的教学效果．我们对“往的教学方式进行了改革．精心进行课堂教学设计．大力采用多媒体教学手段．理论教学与实验操作紧密结合．增加学生动手操作内容．对考试方式也进行改进。     

检测家蝇抗菌肽基因diptericin时间表达模式的实时荧光定量方法的建立

目的建立荧光染料(SYBR Green I)实时荧光定量PCR(real-timePCR)方法检测的家蝇抗菌肽基因diptericin时间表达模式方法。方法基于已克隆出的diptericin基因,利用软件Prmier5.0设计上下游引物,对未诱导,诱导后2h、4h、8h、12h、24h、36h、48h及不同发育阶段的家蝇三龄幼虫进行real-timePCR设计引物,然后利用10倍系列稀释含有目的基因的质粒,进行实时荧光定量PCR反应,制作标准曲线。结果未刺激的三龄幼虫diptericin基因表达量非常低,与诱导后2h的相比,差1个数量级,诱导后2h开始缓慢上升,12h后达到最高峰,24h后缓慢下降,36h后回到诱后2h的水平,在家蝇三龄幼虫的卵、1龄及2龄期的表达量非常低,3龄期达到最高峰。结论实时荧光定量PCR检测家蝇抗菌肽基因diptericin的方法具有特异性好、灵敏度高,为进一步探讨家蝇抗菌肽生物活性,研究新的抗菌药物打下初步基础。     

太极拳锻炼对乳腺癌术后患肢功能恢复的影响及机制探讨

目的 观察太极拳锻炼对乳腺癌术后患肢功能恢复的影响,并探讨其治疗机制。 方法 采用随机数字表法将85例乳腺癌术后患者分为对照组（38例）及太极拳组（47例）。2组患者术后均给予常规康复训练,太极拳组于手术10 d后辅以24式太极拳锻炼,每天早、晚各锻炼1次,每次约20 min。于术后10 d、40 d及100 d时采用Constant-Murley量表(CMS)对患者肩功能恢复情况进行评定;同时于上述时间点抽取患者晨起外周血,检测T细胞亚群CD4+、CD8+以及热休克蛋白-90α(HSP-90α)和血管内皮生长因子（VEGF）含量。 结果 术后40 d时2组患者CMS各项目评分均显著改善（P<0.05）,并且太极拳组CMS关节活动度及日常生活能力评分［分别为（24.79±4.11）分和（10.23±3.49）分］均显著优于对照组水平（P<0.05）,术后100 d时太极拳组CMS各项目评分均显著优于对照组水平（P<0.05）。术后100 d时太极拳组CD4+、CD4+/CD8+和HSP-90α检测结果［分别为(36.18±7.15)%、（1.40±0.18）和(46.23±9.78)ng/ml］均显著优于对照组水平(P<0.05)。 结论 太极拳锻炼适用于乳腺癌术后患者上肢功能康复,其治疗机制可能与太极拳拳理以及太极拳圆弧形、螺旋形动作特点有关。     

弓形虫速殖子入侵对宿主细胞窖蛋白-1的表达变化

胞膜窖Caveolae,又称细胞膜穴样凹陷,是细胞表面特异性的内陷微区,Caveolin-1是其的标记蛋白.Caveolae结构和caveolin蛋白在多种细胞生理功能方面如细胞信号转导、胆固醇转运、内吞和肿瘤抑制等发挥着重要作用.在动脉硬化、肌营养不良和Alzheimer'S综合征等多种疾病中均发现存在caveola...     

疟原虫环子孢子蛋白的研究进展

环子孢子蛋白(circumsporzoite protein,CSP)是疟原虫成熟子孢子表面的锚定蛋白,约含400个氨基酸,由N端保守I区、种属特异性的中央重复区和C端保守Ⅱ区构成。CSP在疟原虫的迁移、靶细胞入侵和增殖过程中发挥重要作用。近年研究显示,CSP在疟疾疫苗和靶向给药系统中具有良好的应用前景。本文对疟原虫CSP的结构特征、功能及其应用前景作一综述。     

日本血吸虫病免疫酶染色试验、双面胶纸条法环卵沉淀试验和常规法环卵沉淀试验的现场比较

应用免疫酶染色试验(IEST)、双面胶纸条法CO-PT(DGS-COPT)和常规法COPT(CV-COPT),以单盲法比较试验了120例粪便检查阳性血吸虫病人、120例经用吡喹酮治疗3～4年及≥5年血吸虫病人和120名健康人。IEST的敏感性和特异性为91.7和95.8％.两种COPT的敏感性和特异性分别为81.7～82.5％和96.7～97.5％,无显著性差异。三种血清学方法比     

贝类GI型扎幌样病毒荧光定量PCR检测

目的 建立贝类中GI型扎幌样病毒的荧光定量PCR检测方法 .方法 通过用聚乙二醇6000(PEG6000)对贝类中扎幌样病毒进行浓缩,用序列比对软件设计出针对GI型扎幌样病毒保守序列的通用引物与探针,建立GI型扎幌样病毒荧光定量PeR检测方法 .结果 浓度为106～104,103,102～101拷贝/μL的GI扎幌样病毒检出率分别为3/3,1/3,0/3,因此,常规逆转聚合酶链反应(RT-PCR)最低检出限为103拷贝/μL.此荧光定量PCR方法 对贝类中GI型扎幌样病毒检测高度特异,最低检出限可达102拷贝/μL,比常规RT-PCR的低1个数量级,即灵敏度高10倍,线性范围为102～106拷贝/μL,标准曲线的相关系数为0.998 8.结论 本研究建立了GI型扎幌样病毒的荧光定量PCR检测方法 ,可用于贝类中GI型扎幌样病毒污染状况及其突发事件的快速定量检测.     

构建survivin shRNA重组载体及靶向下调PC3细胞survivin mRNA的表达

背景：survivin基因特异性表达于肿瘤和胚胎组织,与肿瘤细胞的分化增殖、浸润转移以及多药耐药密切相关。 目的：构建靶向survivin基因的shRNA重组质粒表达载体,转染前列腺癌细胞PC3,验证该载体能否下调细胞survivin基因mRNA水平。 方法：以survivin基因为靶点设计具有短发夹结构的shRNA序列,经退火成互补双链后克隆入pENTR/U6建立重组表达载体pENTR/U6-SUR;转化E.coli TOP10菌株,挑取阳性菌落进行菌落PCR和测序鉴定;将重组质粒转染前列腺癌细胞株PC3细胞,RT-PCR检测重组质粒对细胞survivin基因mRNA水平的抑制效果。 结果与结论：将设计合成的shRNA序列经退火后克隆至pENTR/U6载体中,菌落PCR可扩增出目的条带,测序结果证实插入片段为所需序列;pENTR/U6-SUR重组质粒转染后PC3细胞survivin基因mRNA表达水平显著下降,且24 h比48 h作用更明显。成功构建了靶向survivin基因的shRNA质粒表达载体,并证实该载体显著下调了PC3细胞中survivin基因mRNA水平。     

家蝇蛆粉对小鼠急性毒性及致突变性作用

目的探讨家蝇蛆粉对小鼠急性毒性和致突变性,以评价其安全性。方法将家蝇3龄幼虫超声破碎的内容物溶液制成干粉,余下的幼虫壳制成壳聚糖,两者按10∶1比例进行组合混匀,制成粉末状家蝇蛆粉。以昆明小鼠为实验对象,采用最大耐受量实验、骨髓微核实验和精子畸形实验,评价家蝇蛆粉对小鼠的急性毒性和致突变性作用。结果小鼠对家蝇蛆粉的最大耐受量为33.0 g/(kg.bw),未见毒性效应或不良反应;家蝇蛆粉2.8,5.5和11.0剂量组雄性小鼠的嗜多染红细胞微核率分别为0.12%,0.14%,0.14%,雌性小鼠的嗜多染红细胞微核率分别为0.14%,0.12%,0.16%,与溶剂对照组比较,差异无统计学意义(P0.05),小鼠精子畸形率分别为2.3%,1.6%,2.1%,与溶剂对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论家蝇蛆粉对小鼠无急性毒性和致突变性。     

荷叶、葛根和鱼腥草提取物体外抗肝癌及抗HBV活性研究

目的:研究荷叶、葛根和鱼腥草提取物的体外抗肝癌及抗HBV活性。方法:以HepG2.2.15细胞为模型,MTT法检测三种中药对细胞增殖的影响;光学显微镜观察药物对细胞形态的影响;流式检测细胞的凋亡情况;ELISA法检测细胞上清中HBsAg和HBeAg的含量。结果:三种中药给药浓度为2000μg/m L时,对细胞的增殖具有抑制作用;三种中药浓度达1000μg/m L时,可使细胞形态发生病理性改变,显著促进Hep G2.2.15细胞的凋亡;在125~1000μg/m L浓度范围内,三种中药提取物均可显著降低细胞上清中HBsAg和HBeAg的含量。结论:荷叶、葛根和鱼腥草提取物均具有体外抗肝癌和抗HBV活性。