中药复骨方对糖皮质激素致骨质疏松骨折大鼠骨代谢及骨密度的影响

目的 观察中药复骨方对糖皮质激素致骨质疏松骨折模型大鼠骨代谢及骨密度的影响.方法 将48只SD大鼠随机分为基础组、模型组及治疗组各16只.基础组仅给予肌内注射生理盐水1 mg/kg,模型组和治疗组予肌内注射地塞米松1 mg/kg,1次/d,3次/周,用药8周建立糖皮质激素性骨质疏松（GIOP）模型.第8周末对3组大鼠手术造成单侧股骨闭合性骨折,骨折处采用金属内固定,复制GIOP骨折模型.术后第2天开始治疗组中药复骨方药液灌胃,持续8周.检测大鼠血清钙（Ca）、磷（P）、碱性磷酸酶（ALP）、骨钙素（BGP）指标,采用双能X线吸收法（DXA）测量大鼠股骨骨密度.结果 骨折术前,模型组大鼠骨密度值为（0.219±0.013）g/cm2,基础组骨密度值为（0.283±0.015）g/cm2,模型组骨密度值明显低于基础组（t=12.8970,P＜0.05）.实验16周末,治疗组股骨全长骨骨密度为（0.265±0.014）g/cm2,高于模型组（t=9.8403,P＜0.05）.实验12周末,治疗组大鼠血清Ca为（2.35±0.19） mmol/L、P为（2.47±0.23） mmol/L、ALP为（196.74±25.38） U/L及BGP为（1.33±0.25） μg/L,与模型组比较均显著升高,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 中药复骨方可显著提高GIOP骨折大鼠股骨骨密度,升高GIOP骨折大鼠血清Ca、P、ALP及BGP活性,促进骨形成,有助于GIOP骨折的愈合.     

中药复骨方对糖皮质激素性骨质疏松大鼠骨折愈合的影响

目的观察中药复骨方对糖皮质激素性骨质疏松(GIOP)大鼠骨折愈合的影响。方法将64只SD大鼠随机均分为4组:基础组、模型组、治疗组和对照组。4组大鼠均建立GIOP骨折动物模型。术后基础组和模型组给予蒸馏水灌胃,治疗组以复骨方药液灌胃给药,对照组以伤科接骨片药液灌胃,持续8周。观察各组股骨骨密度、血清碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(BGP)变化,比较各组骨组织形态计量学参数和生物力学测量结果。结果治疗组、对照组大鼠血清ALP、BGP活性、股骨BMD均高于模型组;模型组大鼠股骨骨小梁面积百分数(TbAr%)、骨小梁数量(TbN)、平均骨小梁厚度(TbTh)均较基础组下降,骨小梁分离度(TbSp)较基础组增高;治疗组、对照组的TbAr%、TbN、TbTh均高于模型组,TbSp低于模型组;治疗组和对照组的最大载荷、最大挠度及最大应力高于模型组;以上各组数据模型组与基础组、治疗组与模型组间各项结果比较差异有显著性(P0.05),治疗组与对照组各项结果比较差异无显著性(P0.05)。结论中药复骨方能够提高GIOP骨折大鼠的BMD,升高ALP、BGP活性,改善骨结构,增强骨强度,促进骨生成。复骨方对模型大鼠骨组织计量学和生物力学的影响与伤科接骨片作用相似,其有助于促进GIOP大鼠骨折的愈合。     

复骨方促进糖皮质激素性骨质疏松大鼠骨折愈合作用的研究

目的探讨中药复骨方对糖皮质激素性骨质疏松（GIOP）大鼠骨折愈合的促进作用。方法将48只SD大鼠随机分为三组,各16只。前8周实验中,基础组仅给予肌内注射生理盐水1mg /kg,模型组和治疗组肌内注射地塞米松1mg／kg,1次／d,3次,周,建立GIOP动物模型。第8周末对三组大鼠手术造成单侧股骨闭合性骨折,骨折处采用金属内固定,建立GIOP骨折动物模型。术后第2天开始,基础组和模型组给予蒸馏水10mL／kg灌胃,治疗组以复骨方药液灌胃给药,持续8周。观察各组股骨骨密度（BMD）变化,影像学观察骨折愈合情况,比较各组骨组织形态计量学参数和生物力学测量结果。结果治疗组股骨全长骨BMD高于模型组。差异有统计学意义（t=11．2532,P＜0．05）。模型组大鼠股骨骨小梁面积百分数（TbAr％）、骨小梁数量（TbN）、平均骨小梁厚度（TbTh）均较基础组下降,骨小梁分离度（TbSp）较基础组增高,差异有统计学意义（t=3．5885、7．4488、9．0512、10．0270,P＜0．05）;治疗组TbAr％、TbN、TbTh均高于模型组,TbSp低于模型组,两组各指标比较差异有统计学意义（t=2．3329、5．3328、5．9512、10．9590,P＜0．05）。模型组的最大载荷、最大挠度及最大应力均较基础组降低,差异有统计学意义（t=3．8944、5．3915、4．4739 ,P＜0．05）;治疗组的最大载荷、最大挠度及最大应力均高于模型组,差异有统计学意义（t=2．9251、3．7628、6．6926,P＜0．05）。结论中药复骨方可提高GIOP骨折大鼠的BMD,改善骨微结构,提高骨生物力学性能。中药复骨方对GIOP骨折的愈合有促进作用。     

阿米洛利对高转移肺癌细胞侵袭能力和uPA 系统的影响*

目的:观察阿米洛利对人高转移肺癌细胞 PGCL3 体外侵袭能力和尿激酶型纤溶酶原激活物（urokinase-type plasminogen activator,uPA ）系统的影响。方法:不同浓度（25 μmol/L、50 μmol/L 和100μmol/L）的阿米洛利作用于PGCL3 细胞6h 后,用Transwell 小室法检测对细胞侵袭能力和运动能力的影响。阿米洛利作用 24 h 后,用发色底物法检测对细胞分泌的 uPA 和纤溶酶原激活物抑制剂-1（plasminogen activator inhibitor- 1,PAI-1）活性的变化。RT-PCR 检测阿米洛利对细胞uPA 、尿激酶型纤溶酶原激活物受体（urokinase-type plasminogen activator receptor ,uPAR）和PAI-1 mRNA 表达的影响。Western blot 检测阿米洛利对细胞uPA 、细胞外调节蛋白激酶2（extracellular regulated protein kinase 2,ERK 2）和ras蛋白表达情况的影响。结果:侵袭实验和运动实验结果均显示,经
阿米洛利处理后,穿膜细胞数明显减少,在100μmol/L 时,对侵袭和运动的抑制率分别为（37 .7±4.1）%和（64 .9±4.9）%,与对照组相比具有显著性差异（P<0.01 ）。同时,细胞分泌的 uPA 和PAI-1 活性降低,当浓度达到 100μmol/L 时,差异具有统计学意义（P<0.05 ）。从25 μmol/L 开始,阿米洛利就可显著抑制PAI-1 mRNA 的表达,当达 100μmol/L 时可明显下调uPA mRNA 的表达,但各浓度对uPAR mRNA的表达均无影响。随着阿米洛利浓度的增加,uPA 蛋白表达量逐渐减少,但对 ras和ERK 2 蛋白表达量无明显影响。结论:阿米洛利能够抑制高转移肺癌细胞PGCL3 的侵袭和运动,其作用机制与抑制uPA 和PAI-1 的活性和表达有关,有成为抗肿瘤转移药物的潜力。      

二甲基阿米洛利对高转移性肺癌细胞侵袭能力的影响及其作用机制

目的:研究二甲基阿米洛利(dimethyl amiloride, DMA)对人高转移性肺癌PGCL3细胞体外侵袭能力的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:肺癌PGCL3细胞经DMA处理后,用Transwell小室法检测其对细胞侵袭和运动能力的影响,发色底物法检测DMA对细胞分泌的尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator, uPA)和纤溶酶原激活物抑制剂1(plasminogen activator inhibitor-1, PAI-1)活性的影响,RT-PCR检测DMA对细胞uPA、尿激酶型纤溶酶原激活物受体(urokinase-type plasminogen activator receptor, uPAR)和PAI-1 mRNA表达的影响,Western印迹法检测细胞外调节蛋白激酶2(extracellular regulated protein kinases 2,ERK2)和ras蛋白表达的变化.结果:DMA能抑制PGCL3细胞的体外侵袭和运动能力,下调uPA、uPAR和PAI-1的mRNA表达,上调ras蛋白的表达;高浓度时DMA可降低细胞分泌的uPA活性,但对分泌型PAI-1活性和ERK2蛋白表达无影响.结论:DMA能抑制高转移性肺癌PGCL3细胞的侵袭和运动,其作用机制可能与抑制uPA系统的表达有关.     

阿米洛利对PGCL3细胞增殖的抑制作用及其机制

目的:研究阿米洛利对人高转移巨细胞肺癌细胞PGCL3增殖的抑制作用,并探讨其可能的作用机制.方法:人肺癌细胞PGCL3经阿米洛利处理后用MTT法检测药物对细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测药物对PGCL3细胞周期的影响:Western blot检测药物对细胞的CyclinB1蛋白表达和细胞分裂周期基因25B(cell divide cycle 25B,Cdc25B)蛋白活性的影响.结果:PGCL3细胞经阿米洛利处理后,时间和剂量依赖性抑制细胞增殖,阻滞细胞于G2/M期,下调CyclinB1蛋白表达,降低Cdc25B蛋白活性.结论:阿米洛利对PGCL3细胞的增殖具有抑制作用,其作用机制与抑制细胞周期相关蛋白的表达和活性有关.     

二甲基阿米洛利对人肺癌细胞增殖及细胞周期相关蛋白的影响

目的 研究二甲基阿米洛利(dimethyl amiloride,DMA)对人高转移巨细胞肺癌细胞PGCL3增殖的作用及对细胞周期相关蛋白的影响.方法 不同浓度的DMA作用于PGCL3细胞,用MTT法检测对细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测DMA对PGCL3细胞周期的影响;Western blot检测DMA对细胞p21、cyclinA、细胞周期依赖激酶2(cell cycle depend on kinase 2,CDK2)、cyclinB1和细胞分裂周期基因25B(cell dividecycle 25B,Cdc25B)蛋白表达以及CDK2和Cdc25B蛋白活性的影响.结果 DMA可抑制PGCL3细胞的增殖,并呈时间和浓度依赖性.DMA阻滞细胞于G2/M期和S期,上调p21蛋白表达,下调cyclinB1蛋白表达,降低CDK2和Cdc25B蛋白活性,但对cyclinA、CDK2和Cdc25B蛋白表达水平无影响.结论 DMA可抑制人肺癌细胞增殖,并改变某些细胞周期相关蛋白的袁达和活性,这可能是其抑制肿瘤的机制之一.