2株不同序列分型耐黏菌素大肠埃希菌耐药机制分析

目的探讨2株黏菌素耐药大肠埃希菌的耐药机制。方法采用Vitek 2 Compact全自动微生物鉴定药敏系统鉴定细菌及检测常见抗菌药物敏感性,并检测菌株是否产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs);用三维试验检测菌株是否产AmpC酶;用微量肉汤稀释法测定菌株对黏菌素的最低抑菌浓度(MIC);用PCR及测序检测耐药基因;多位点序列分型(MLST)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株的分子分型和同源性;接合试验和S1酶切脉冲场凝胶电泳(S1-PFGE)对菌株的质粒特征进行分析。结果2株菌均对碳青霉烯类药物敏感,对黏菌素耐药,其中N408对头孢类药物耐药;PCR扩增和测序分析显示2株菌均携带mcr-1基因,且N408和N433分别携带blaCIT和blaTEM-1基因;2株菌质粒接合试验均成功,接合子均检测到mcr-1基因;MLST分析显示N408为ST453型,N433为ST8900型,PFGE显示为不同条带。S1-PFGE显示N408有2个质粒,N433有1个质粒。结论本地区已出现携带mcr-1基因黏菌素耐药大肠埃希菌,且可通过质粒在不同菌株间水平播散,应引起临床的重视,加强此类菌株的检测。     

铜绿假单胞菌III型分泌系统相关毒力基因在抗菌药物中表达差异的研究

目的 分析临床分离铜绿假单胞菌Ⅲ型分泌系统(type III secretion system, T3SS)毒力基因exoS、exoU在抗菌药物中表达的差异性，以期为患者选择合适的抗感染治疗方案及预后评估提供依据。方法 选取南昌大学第二附属医院2017年1月-2017年12月临床分离的铜绿假单胞菌72株，采用Vitek2 Compact全自动微生物鉴定仪进行细菌鉴定及药敏，采用PCR法检测分离菌株T3SS特异性片段popB和相关毒力基因exoS、exoU表达情况；收集患者临床信息，了解毒力基因表达与细菌耐药性的关系。结果 72株铜绿假单胞菌中4种基因型exoS+/exoU-、exoS-/exoU+、exoS+/exoU+和exoS-/exoU-，分别为56.94%、26.39%、4.17%和12.50%，其中痰液、血液标本中检出率最高的基因型为exoS+/exoU-，分别为57.50%(23/40)和70.00%(7/10)。分析药敏结果显示，亚胺培南、氨基糖苷类和氟喹诺酮类耐药的分离株中携带exoU基因的耐药率显著高于携带exoS基因的耐药率，具有统计学意义(P<0.05)；其中携带exoU基因的总菌株为22株，其对亚胺培南、庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星、左氧氟沙星及环丙沙星的耐药率分别为45.45%、45.45%、50.00%、50.00%、40.91%和40.91%；携带exoS基因的总菌株为44株，其对以上药物的耐药率分别为4.55%、6.82%、4.55%、18.18%、11.36%和18.18%。结论 我院临床分离的铜绿假单胞菌毒力基因以exoS+/exoU-基因型为主；铜绿假单胞菌携带exoU基因时，显示出对亚胺培南、氨基糖苷类和氟喹诺酮类抗菌药物具有更高的耐药性。     

肺炎链球菌感染的临床特征与耐药性分析

目的对我院肺炎链球菌分离株的分布特点及耐药率变迁进行分析,为临床治疗提供病原学依据。方法对2014-2018年南昌大学第二附属医院送检标本采用VITEK-2 Compact鉴定分析仪,VITEK MS质谱仪、Optochin试验及胆汁溶菌试验对细菌进行鉴定;用AST-GP68药敏卡及纸片扩散法对抗菌药物进行体外药敏试验,并用E-test进行青霉素补充药敏试验,使用WHONET5.6软件分析临床特征和耐药性。结果共分离获得448株肺炎链球菌,标本主要来源于痰液标本(63.17%),脓液标本(27.68%)和血液标本(3.79%);收集标本中儿童组(14岁)、老年组(60岁)和14～60岁组患者肺炎链球菌分离率分别为7.36%、51.79%和40.85%;此外,春冬季检出率明显高于夏秋季,其中春、夏、秋、冬季检出率分别为30.14%、18.30%、18.97%和32.59%;分析药敏结果显示,肺炎链球菌对复方新诺明、四环素和红霉素的5年平均耐药率最高,分别为55.48%、69.56%和90.66%,对左氧氟沙星(2.05%)、头孢曲松(9.97%)和美罗培南(13.47%)的5年平均耐药率较低,未发现泰利霉素、莫西沙星、万古霉素和利奈唑胺耐药株;依据非脑膜炎口服给药折点判读显示,我院近5年分离的肺炎链球菌对青霉素耐药率均≥25.00%,不同年份肺炎链球菌对临床常见抗菌药物的耐药率略有差别。结论我院肺炎链球菌主要来源较广,以痰液为主,老年人为主要易感人群,感染好发于春冬季;肺炎链球菌对青霉素耐药性较严重,对左氧氟沙星、头孢曲松及美罗培南敏感性较高,未发现泰利霉素、莫西沙星、万古霉素和利奈唑胺耐药株。     

土地戈登菌致血流感染1例

<正>土地戈登菌(Gordonia terrae)是一种需氧、无动力、生长缓慢的革兰阳性杆菌,弱抗酸染色阳性,其广泛存在于自然界及医院环境中[1]。随着检测技术的提高,国内外有关土地戈登菌引起人类感染的报道逐渐增多,可引起脓肿、腹膜炎、血流感染和导管相关性血流感染等疾病[2]。本文报道1例白血病化疗期间发热的患者,其血培养中分离出土地戈登菌。     

抗金黄色葡萄球菌富丝氨酸重复蛋白SraPL-Lectin抗体在鼠巨噬细胞抗感染中的功能研究

目的：阐述anti-SraPL-Lectin单克隆抗体在鼠巨噬细胞吞噬杀伤金黄色葡萄球菌过程中的功能。方法：PCR扩增sraP相应基因片段,并克隆至pET28a表达载体,用0.1mM IPTG诱导表达,镍柱纯化重组蛋白,经Western Blot分析anti-SraPL-Lectin单克隆抗体的特异性,采用qPCR检测巨噬细胞炎症因子诱导表达水平,CCK8检测金黄色葡萄球菌的增殖抑制率,涂板计数巨噬细胞上清和裂解液中金黄色葡萄球菌菌落数。结果：Anti-SraPL-Lectin单克隆抗体不仅能与不同截短类型的SraP重组蛋白结合,而且能与金黄色葡萄球菌LAC细胞壁蛋白发生特异性的结合;Anti-SraPL-Lectin单克隆抗体能下调鼠巨噬细胞促炎因子（TNFα,IL-1β,IL-12p40）的表达并上调抑炎因子(IL-10)的表达。庆大霉素和anti-SraPL-Lectin单克隆抗体共同作用下,未见LAC出现明显的增殖。Anti-SraPL-Lectin单克隆抗体能降低巨噬细胞上清中金黄色葡萄球菌的载量。结论：Anti-SraPL-Lectin单克隆抗体与金黄色葡萄球菌形成免疫复合物能减轻巨噬细胞的炎症反应,促进巨噬细胞对金黄色葡萄球菌的清除。