丹参酮IIA通过调控自噬抑制乏氧诱导的肝内胆管细胞癌侵袭能力的研究

目的:探讨在乏氧状态下,丹参酮ⅡA对肝内胆管细胞癌(intrahepatic cholangiocarcinoma,ICC)自噬的调控,以及对侵袭能力的影响及其机制。方法:通过1%O_2培养建立肝内胆管细胞癌ICC-9810细胞乏氧状态,应用丹参酮ⅡA干预细胞后,通过划痕试验检测ICC-9810细胞迁移能力,趋化试验及侵袭试验检测细胞的趋化与侵袭能力;转染p GFP-LC3质粒后,应用荧光显微镜观察LC3融合蛋白及自噬小体在ICC-9810细胞中的表达情况,蛋白质印迹法检测ICC-9810细胞中的HIF-1α、自噬相关蛋白LC3Ⅱ/I和Beclin1表达差异。结果:在乏氧环境下,ICC-9810细胞运动能力增强(1.75±0.3)倍,趋化能力增加79.6%,侵袭力增强1.36倍,细胞自噬水平明显升高,丹参酮ⅡA干预后ICC-9810细胞自噬水平下调,HIF-1α、LC3Ⅱ/I和Beclin1蛋白表达水平分别降低3.9倍,2.4倍和1.1倍,侵袭能力下降4.7倍。结论:丹参酮ⅡA可以通过下调自噬,抑制肝内胆管癌细胞在乏氧条件下异常增高的侵袭力。     

应用组织芯片检测原发性肝细胞癌中Hedgehog信号通路的表达

目的：了解Hh通路在HCC的表达情况。方法：将44例原发性肝细胞癌组织及其相应的癌旁肝组织制成含88个微组织的组织芯片，采用免疫组织化学方法分别检测了Hh信号通路中Shh、Ihh、Ptch-1和Gli-2在两种组织中的表达情况，并分析其与HCC临床病理组织学的相关性。结果：在HCC组织中Shh、Ptch-1和Gli-2表达阳性率分别为63．6％、45．5％和68．2％，高于癌旁肝组织（P〈0．05）。在不同分化组和转移组中，Gli-2的阳性表达率差异具有显著性（P〈0．05）。结论：组织芯片技术可高效、平行地进行肿瘤分子病理研究；Hh信号通路的过度激活参与了HCC的发生，可能成为HCC治疗的潜在新靶标。     

原发性肝细胞癌组织Shh和Ptch-1与Gli-2表达及生物学意义的研究

目的:探讨原发性肝细胞癌(HCC)Sonic hedgehog信号通路信号肽Shh、膜受体Ptch-1和核转录因子Gli-2的表达及其生物学意义.方法:将44例HCC组织及其相应的癌旁肝组织制成含88个微组织的组织芯片,采用免疫组织化学方法分别检测了Shh、Ptch-1和Gli-2在两种组织中的表达情况.结果:在HCC组织中,Shh与Ptch-1阳性率(63.6%和45.5%)均显著高于癌旁肝组织(36.4%和25.0%),P均<0.05.Gli-2在HCC中表达阳性率(68.2%)显著高于癌旁肝组织(38.6%),P<0.01;且与HCC的组织学分级以及侵袭性相关,P均<0.05;与肿瘤大小和HBV感染无关.结论:增强的Gli-2活性导致细胞异常增殖,其所引起的Shh信号通路的过度激活可能促进HCC的发生和发展.     

耳穴贴压联合强阿片类药物治疗中、重度癌痛50例疗效观察

目的 观察耳穴压豆在中、重度癌痛治疗中的减毒增效作用.方法 将100例中、重度癌痛患者随机分为两组,每组50例,对照组予奥施康定口服治疗,治疗组在对照组基础上给予耳穴压豆,7天后观察两组镇痛缓解率、用药剂量及恶心、呕吐、便秘的发生率和程度.结果 两组各程度疼痛镇痛率比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);两组各程度疼痛镇痛药用量比较,治疗组少于对照组(P＜0.05);治疗组恶心、呕吐及便秘总发生率低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 耳穴压豆联合强阿片类药物治疗中、重度癌痛临床确切,并能减少阿片类药物用量,有效降低消化系统毒副反应.     

内毒素对肝细胞Smac凋亡通路的影响

Smac作为重要的凋亡因子,可与凋亡抑制蛋白(IAP)结合,使其丧失抑制Caspase活性的作用,因此Smac在细胞凋亡的途径中有着极其重要的作用….我们采用D-氨基半乳糖氨建立大鼠肝衰竭模型和体外内毒素(LPS)刺激L02肝细胞,探讨促凋亡蛋白Smac对Caspase9和Caspase3的活性的影响.     

Gli2在原发性肝细胞癌中的表达及与Cyclin D1、p21的关系

目的 探讨原发性肝细胞癌(HCC)中 Gli2、Cyclin D1 和 p21 的表达及其意义.方法 采用组织芯片和免疫组织化学方法以及 RT-PCR 检测了 44 对 HCC 和相应癌旁肝组织中 Gli2 蛋白和 mRNA 的表达情况,应用 Western blot检测了 Cyclin D1、p21 蛋白在两种组织中的表达差异.结果 免疫组化染色与 RT-PCR 示 Gli2 在 HCC 组织中的阳性表达率为 68.2%,而癌旁肝组织为38.6%,两者差异具有极显著性意义(P<0.01),且 Gli2 与 HCC 的组织分化和门静脉转移相关.Cyclin D1 蛋白在 HCC 中的表达显著高于癌旁肝组织(P<0.05).且与 Gli2 的表达呈正相关;而 p21 蛋白在癌旁肝组织中的表达显著高于 HCC,但与 Gli2 无明显相关性.结论 Gli2 过度激活可能通过上调 Cyelin D1 的表达而使肝癌细胞异常增殖,参与 HCC 的发生和发展.     

Hedgehog信号通路与Snail在肝癌细胞系中的表达及意义

目的 探讨Hedgehog(Hh)信号通路在各种肝癌细胞系中的表达及其与Snail蛋白的关系.方法 用RT-PCR检测了Hh信号通路分子Shh、Ihh、Ptch-1、Smo、Gli-1、Gli-2、Gli-3 mRNA在4种肝癌细胞系HepG2、Hep3B、SMMC-7721、Huh-7和永生化肝细胞系L02中的表达情况,应用Western blot检测了Snail蛋白在SMMC-7721和L02细胞中的表达差异.结果 RT-PCR结果显示Hedgehog信号通路分子mRNA在肝癌细胞株中呈高表达,并以Shh信号为主;Gli-2在SMMC-7721细胞中表达最显著,而在正常肝细胞株L02中表达最弱,两者差异显著(P<0.01).Snail蛋白在SMMC-7721细胞中的表达显著高于L02细胞(P<0.05),且与Gli-2的表达呈正相关(P<0.05).结论 Hh信号通路可能通过Gli-2上调Snail的表达,增强肝癌细胞增殖力和侵袭力,促进肝细胞癌的发生和发展.     

丹参酮ⅡA抑制奥沙利铂诱发周围神经病变大鼠神经生长因子的表达

目的 观察丹参酮ⅡA对奥沙利铂诱发周围神经毒性大鼠的神经生长因子的抑制作用。方法 30只健康Wistar大鼠随机分成3组,对照组、模型组、丹参酮防治组。除对照组外,其余各组均予以腹腔注射奥沙利铂（20 mg/kg）造模。防治组在造模前3天至造模后第7天持续给药;并利用神经电生理仪检测大鼠机械性痛阈和冷刺激性疼痛,Western blot检测脊髓背角神经中神经生长因子（nerve growth factor,NGF）的表达。结果 造模后6 h大鼠机械性痛阈较对照组降低,冷刺激缩足时间缩短（P<0.05）,并随着观察时间的延长,痛阈值明显下降,在72 h达到最低并一直持续1周;第7天检测各组大鼠脊髓背角神经元中NGF表达情况,模型组较对照组明显降低;应用丹参酮ⅡA干预后,与模型组相比,大鼠机械性痛阈明显回升,对冷刺激耐受时间延长,NGF表达量明显增高（P<0.05）。结论 丹参酮ⅡA可能是通过提高NGF的表达,发挥防治奥沙利铂诱导的周围神经病变的作用。