植物挥发油快速起效抗抑郁潜能探讨

现有抗抑郁药物临床起效缓慢,因此需要研发快速起效抗抑郁药物。植物挥发油显示具有快速起效抗抑郁潜能,首先,挥发油气味芳香能够直接刺激嗅神经,脂溶性高易于透过血脑屏障,挥发性强适合鼻腔脑靶向和吸入给药,能够快速调节脑功能,具有快速起效抗抑郁潜能;其次,抗抑郁活性植物挥发油化学和药理研究进展揭示了挥发油抗抑郁化学物质基础、抗抑郁效果及可能作用机制;再者,考察植物挥发油抗抑郁活性成分对快速起效抗抑郁靶点作用,发现植物挥发油化学成分能拮抗NMDA受体活性,提示植物挥发油具有快速起效抗抑郁靶点机制潜能;最后,探讨通过整合抗抑郁挥发油特性、快速起效抗抑郁靶点机制和给药方式,充分发挥植物挥发油快速起效抗抑郁优势,为新药研发提供方向。     

一种改良的5-羟色胺转运体活性化合物高内涵筛选方法

[目的]建立一种改良的5-羟色胺转运体(SERT)活性化合物高内涵筛选(HCS)方法,包括构建稳定转染h SERT细胞株和优化SERT活性化合物HCS条件。[方法]应用聚乙烯亚胺(PEI)将质粒h SERT-pc DNA3转染入HEK293细胞,采用遗传霉素(G418)筛选获得稳定转染细胞系,以实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹(Western blotting)方法分别从转录和翻译水平验证h SERT表达,采用SERT荧光底物4-(4-二甲氨基)苯基-1-甲基吡啶(APP+)在高内涵系统上验证SERT摄取功能并优化其检测条件,应用选择性SERT抑制剂Fluoxetine和SERT增强剂Tianeptine验证SERT HCS方法可靠性。[结果]经PEI转染和G418筛选获得了稳定转染h SERT-HEK293细胞株。与HEK293细胞相比,h SERT-HEK293细胞中h SERT m RNA和蛋白表达量均显著性增加,APP+摄取实验表明h SERT-HEK293细胞摄取APP+显著性增加,并可被Fluoxetine特异性抑制。实验优化了高内涵检测APP+摄取实验中APP+浓度、孵育时间、数据分析方法等条件。Fluoxetine显著地抑制h SERT-HEK293对APP+的摄取,Tianeptine显著地增强h SERT-HEK293对APP+的摄取,证实此HCS方法的可靠性。[结论]本研究首次优化了应用APP+检测SERT活性的HCS条件,显著提高了SERT荧光检测方法灵敏度,并首次证实此HCS方法适用于SERT促进剂筛选,因此,建立了一种改良的SERT活性化合物HCS方法。     

递增负荷运动下血乳酸丙酮酸的动态变化规律及乳酸阈机制探讨

背景:作者曾提出:“运动中有氧产能过程与当时耗能过程不匹配是代谢发生转变的原因;而丙酮酸转化成乳酸的直接作用是防止丙酮酸在胞浆内堆积,防止其堆积对糖酵解产能过程的抑制,以保证酵解过程的快速供能;这一步生化反应的机制是对畅通糖代谢酵解途径供能速率的调节”的假说。目的:观察补充吸氧对代谢转变有无影响,分别从人体和动物水平上探讨乳酸阈强度(代谢转变时)下代谢转变的机制,验证人体和动物结果的一致性。设计:随机对照观察。单位:河北师范大学体育学院,廊坊师范学院体育系。对象:受试者为24名体育专业本科男生,体质量为(58±4)kg,身高为(175±6)cm,年龄(21±2)岁,二级运动员12人,无等级学生12人;雄性SD大鼠30只。方法:整体实验于2006-04/06河北师范大学体育学院运动生理机能实验室完成。24名学生分为二级运动员组和无等级训练组,各12名,进行递增负荷功率自行车运动;选取30只SD大鼠随机分为负重游泳训练组15只,无负重游泳适应组15只,负重游泳训练组进行递增负荷游泳运动。首先确定人体组与大鼠组各自的代谢转变强度,后在正常吸空气与补充吸氧条件下重复其前一阶段运动。分别在重复运动前及递增负荷运动到乳酸阈强度下,测定人体及大鼠的静脉血氧分压、丙酮酸、乳酸含量。人体组每2min递增负荷50W,大鼠组每2min递增负荷是体质量的1%,直至不能坚持为止。选择递增负荷运动方法,让体内代谢逐步由有氧向无氧代谢过度,确定过度点即乳酸阈强度。通过静脉血氧分压、丙酮酸、乳酸含量的前后对比和补充与否对各指标有无影响,以及人体和动物的结果是否一致,以证明假说的信度和效度。主要观察指标:人体组和大鼠组乳酸阈强度下及补充吸氧前后的静脉血氧分压、丙酮酸、乳酸含量。结果:受试者24名和30只大鼠全部进入结果分析。①人体受试者(两组)和30只大鼠(两组)在递增负荷运动中每级负荷2min末取血所得到的乳酸曲线,明显反映出了血乳酸拐点所对应的代谢转变强度及训练水平的差异,有训练者的血乳酸拐点明显置后。②在乳酸阈强度下,不论是否吸氧,人体组和大鼠组的血乳酸含量与氧分压之间均不相关[(3.61±0.56),(5.43±0.55)mmol/L;(4.46±0.86),(7.80±0.27)kPa,r=0.31,0.31,P>0.05],整个测试过程人体组血氧饱和度均不低于98%;而两组受试血乳酸与血丙酮酸含量之间差异均有非常显著性意义[丙酮酸:(1.04±0.16),(0.91±0.37)mmol/L,P<0.001]。③人体组和大鼠组在重复运动前及乳酸阈强度下,丙酮酸平均值分别是(0.97±0.17),(1.04±0.16)mmol/L;(0.93±0.25),(0.91±0.37)mmol/L。两组受试重复运动前与乳酸阈强度时的血丙酮酸含量差异均无显著性意义(P>0.05)。结论:运动中由有氧向无氧代谢转变时体内不缺氧,补充吸氧对代谢的转变没有影响;丙酮酸不易通过肌细胞膜而乳酸可以通过。实验结果支持丙酮酸转化成乳酸的直接作用是防止丙酮酸在胞浆内堆积的观点。