低强度脉冲超声联合脂肪间充质干细胞源性外泌体促进内皮细胞的血管生成

目的 探讨低强度脉冲超声（LIPUS）联合脂肪间充质干细胞（ADSCs）源性外泌体（ADSCs-Exos）对内皮细胞血管生成能力的影响。方法 取SD大鼠腹股沟处脂肪,采用酶消化法分离培养得ADSCs,并对ADSCs表面分子进行鉴定。收集第3代ADSCs上清液提取外泌体,通过透射电子显微镜（TEM）、纳米粒子跟踪分析（NTA）、蛋白免疫印迹技术（Western blot）鉴定。将人脐静脉内皮细胞（HUVECs）按照不同处理方式分为：对照组、外泌体组、LIPUS组及LIPUS+外泌体组,采用CCK-8实验、划痕实验及小管形成实验检测不同处理对HUVECs增殖、迁移及成管能力的影响。。结果 ADSCs-Exos为形态一致的茶托样囊泡,表达标志性蛋白CD9和Tsg101,所测样品直径97.8%集中在118.8±80.8nm,证明提取的样品直径符合外泌体大小。（此特征表现为什么？）。CCK-8实验显示LIPUS+外泌体组OD值为1.882±0.138,均明显高于外泌体组、LIPUS组及对照组（0.646±0.034、0.631±0.027、0.462±0.036）,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。划痕实验显示LIPUS+外泌体组细胞迁移率为（87.7±4.5）%,均明显高于外泌体组（43.0±5.1）%、LIPUS组（34.7±2.3）%及对照组（25.1±2.0）%,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。小管形成实验 显示LIPUS+外泌体组HUVECs成管能力均高于其他组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论 LIPUS联合ADSCs-Exos可有效促进血管内皮细胞的增殖、迁移及成管,增强血管生成能力。