T淋巴细胞、炎性因子及心肌酶对脓毒症严重程度的评估价值研究

目的探讨脓毒症患者T淋巴细胞、炎性因子及心肌酶对疾病严重程度的评估价值。方法收集2015年9月—2017年9月北京市怀柔区妇幼保健院收治的脓毒症患者82例,根据病情程度分为一般性脓毒症组37例、严重性脓毒症组28例及脓毒性休克组17例,另选同期来我院行健康体检的健康者60例作为对照组。检测82例脓毒症患者及体检健康者入组时T淋巴细胞、炎性因子及心肌酶指标变化情况。结果一般性脓毒症组、严重性脓毒症组及脓毒性休克组入组时CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+水平均低于对照组(P0.05);严重性脓毒症及脓毒性休克组CD3+、CD4+及CD8+水平均低于一般性脓毒症组(P0.05)。一般性脓毒症、严重性脓毒症及脓毒性休克组入组时血清降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平均显著高于对照组(P0.05);严重性脓毒症及脓毒性休克组PCT、CRP及TNF-α水平均明显高于一般性脓毒症组(P0.05);脓毒性休克组PCT及TNF-α水平均明显高于严重性脓毒症组(P0.05)。一般性脓毒症、严重性脓毒症及脓毒性休克组入组时天冬氨酸转氨酶、乳酸脱氢酶、心肌型肌酸激酶同工酶、肌酸激酶水平均显著高于对照组(P0.05);严重性脓毒症及脓毒性休克组各心肌酶指标水平均明显高于一般性脓毒症组(P0.05);脓毒性休克组各心肌酶指标水平均明显高于严重性脓毒症组(P0.05)。结论 T淋巴细胞水平越低、炎性因子及心肌酶水平越高,脓毒症患者的病情越严重,T淋巴细胞、炎性因子及心肌酶有望成为临床评估脓毒症病情严重程度的标志物。     

脂联素基因突变-11377C/G检测方法建立及与2型糖尿病关系的研究

目的建立脂联素基因（aPM1）-11377C/G点突变的检测方法,探讨aPM1-11377C/G点突变单核苷酸多态性（SNP）与血清脂联素（APN）水平及2型糖尿病（T2DM）的相关性。方法构建含aPM1-11377C/G点突变的野生型和突变型质粒标准品,采用等位基因特异性PCR（ARMS-PCR）方法,结合荧光探针（TaqMan Prob）,通过对引物3′端正配与错配扩增效率差别的比较,建立ARMS-TaqMan检测aPM1-11377C/G点突变的方法。同时,分别对156例（男87/女69）糖尿病患者（T2DM组）和89例（男21/女68）健康对照者（NC组）的aPM1-11377C/G基因频率,以及APN、各种生化指标以及临床基本资料进行检测和调查。结果 T2DM组APN水平显著低于NC组（P〈0.05）。aPM1-11377位点CC、CG、GG基因的APN水平呈趋势性降低（P〈0.001）。T2DM组与对照组间的aPM1-11377位点CC、CG、GG基因频率差异有显著性（P〈0.05）。T2DM组的aPM1-11377 G等位基因频率显著高于NC组（24.36%vs.19.11%,P〉0.05）。结论 ARMS-TaqMan方法检测aPM1-11377C/G基因点突变具有准确、经济和适合高通量检测的特点。aPM1-11377C/G多态性与血清脂联素水平和T2DM相关。     

脂联素启动子基因多态性和脂联素水平与高血压及并发症的相关性研究

目的观察血清脂联素（APN）水平及APN基因启动子区域单核苷酸多态性（SNP）频率与高血压（HP）及其合并症间的相关性，探讨脂联素基因（aPM1）多态性与HP及合并症间的遗传危险因素。并确立一种高效、准确、经济的检测APN基因实用筛查方法，供临床检测应用。方法对单纯HP组（1组）、HP合并T2DM（HP-T2DM）组（2组）、HP合并冠心病（H-CHD）组（3组）、HP合并肾病（HP-NE）组（4组）和对照组（5组）分别测定空腹血清APN及生化指标。采用变性高效液相色谱（DHPLE）技术，筛选APN基因多态性位点。结果在APN基因（aPM1）启动子区-11377位点存在单核苷酸多态性（GG、GC、CC）。GG、GC、CC基因频率在HP组和对照组间有显著性差异（P〈0．05），aPM1的SNP-11377位点G等位基因频率在HP组明显高于对照组（Χ^2=6．71，OR=0．65，P=0．031）。血清APN水平与HDL呈正相关（r=0．497，P=0．006）．通过对实验条件优化，在采用DHPLC技术检测APN基因多态性位点时发现，本实验检测柱温以60℃最佳。结论血清APN水平与血清HDL之间呈正相关，表明APN也可能是心血管的保护因子。aPM1启动子区SNP-11377C／G多态性与HP及并发症的发生和HP患者体型肥胖形成机制有相关性，提示SNP-11377C／G多态性可能增加HP的遗传风险。     

脂联素启动子基因多态性与2型糖尿病及并发症的相关性研究

目的 观察脂联素(APN)启动子基因单核苷酸多态性(SNP)频率与2型糖尿病(T2DM)及其合并症间的相关性,探讨脂联素基因(aPM1)突变是否是T2DM遗传的危险因素.并确立一种高效、准确、经济的检测APN基因实用筛查方法,供临床检测应用.方法 对单纯T2DM49例(男28例,女21例)、T2DM合并高血压(T2DM-HP)90例(男51例,女39例)、T2DM合并冠心病(T2DM-CHD)33例(男15例,女18例)、T2DM合并肾病(T2DM-NE)41例(男18例,女23例)患者和健康对照组58名(男30名,女28名),测定空腹血清生化指标.采用变性高效液相色谱(DHPLC)技术,筛选APN基因多态性位点.结果 在APN基因(aPM1)启动子区扩增的片段与基因库中登陆的APN GeneID:9370序列相比,存在点突变(-11377G/C).GG、GC、CC基因频率在T2DM组和对照组分别为:5.16%、42.25%、52.58%和3.40%、32.75%、63.85%.T2DM患者aPM1 的SNP-11377位点G等位基因频率明显高于健康对照组(x2=6.818,OR=0.55,P=0.033).从T2DM基因型分组临床资料比较可见,-11377G/C基因型与T2DM患者的收缩压(P=0.035)、体重指数(BMI)(P=0.010)、腹围(P=0.013)和腰臀比(P=0.015)显著相关.通过对试验条件优化,在采用DHPLC技术检测APN基因多态性位点发现,本试验检测柱温以60℃最佳.结论 aPM1启动子区SNP-11377C/G多态性与T2DM及并发症的发生和T2DM患者体型肥胖形成机制有相关性,提示SNP.11377C/G多态性可能增加T2DM的遗传风险.