补肾开窍方通过抑制IRE1/XBP1内质网应激通路发挥对帕金森病模型大鼠的神经保护作用

【目的】探讨补肾开窍方对6-羟基多巴(6-OHDA)诱导的帕金森病(PD)模型大鼠的神经保护作用及可能机制。【方法】将60只SD大鼠随机分为6组,即假手术组、模型组、石菖蒲挥发油组、龟板组、补肾开窍方组、IRE1抑制剂组,每组10只。采用大鼠左脑立体注射6-OHDA法建立PD大鼠模型。造模结束后,石菖蒲挥发油组大鼠给予30 mg/kg石菖蒲挥发油灌胃,龟板组大鼠给予3.77 g/kg龟板液灌胃,补肾开窍方组给予3.77 g/kg龟板液、30 mg/kg石菖蒲挥发油灌胃,IRE1抑制剂组大鼠给予15 mg/kg STF-083110腹腔注射,每日2次,给药30 d。高效液相色谱(HPLC)法测定纹状体内单胺类神经递质多巴胺(DA)的含量,流式细胞术测定中脑内酪氨酸羟化酶(TH)的表达率,蛋白免疫印迹(Western blot)法测定纹状体内葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/EBP家族同源蛋白(CHOP)、磷酸化需肌醇酶1(p-IRE1)和X盒结合蛋白1(XBP1)的表达。【结果】与假手术组比较,模型组大鼠的自主运动功能、平衡能力与协调性及感觉运动整合功能显著降低(P0.05),单胺类神经递质DA和TH表达显著降低(P0.05),内质网应激(ERS)指标GRP78、CHOP表达及纹状体内p-IRE1、XBP1表达均升高(P0.05)。补肾开窍方可使大鼠的行为学改善,增加脑内DA和TH含量,使ERS指标GRP78、CHOP表达降低,降低纹状体p-IRE1和XBP1水平[与IRE1抑制剂组比较无显著性差异(P0.05)]。【结论】补肾开窍方可能通过抑制ERS的IRE1/XBP1通路对6-OHDA诱导的PD模型大鼠产生神经保护作用。     

白花蛇舌草乙醇提取物调控DDR1对大鼠肝癌细胞增殖的影响

目的 探讨白花蛇舌草乙醇提取物对大鼠肝癌细胞增殖的影响及作用机制.方法 选取Wistar大鼠82只,采用小剂量二乙基亚硝铵(DEN)构建大鼠肝癌模型,在动物造模成功后随机分为模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,各20只.造模成功后1 d,模型组给予乙醇提取物溶剂1 mL/(100 g·d)灌胃处理8周,后三组分别给予90、180、360 mg/(kg·d)白花蛇舌草乙醇提取物灌胃处理8周.观察各组大鼠一般情况;常规检测各组大鼠血清ALT、AST水平;采用HE染色观察各组大鼠肝脏组织形态学变化;采用免疫组化染色法测算各组大鼠肝组织PCNA阳性细胞表达率;采用Western blotting法检测各组大鼠肝组织PI3K、Akt和DDR1蛋白.结果 模型组大鼠精神表现萎靡、毛发散乱,饮食量降低,低、中、高剂量组大鼠上述状态得到一定的改善.与模型组相比,低、中、高剂量组大鼠ALT和AST水平降低(P<0.05或<0.01).HE染色显示模型组大鼠肝组织多处坏死,伴有明显的形态异常;低、中、高剂量组大鼠肝组织坏死减轻,细胞变性程度减轻.与模型组相比,低、中、高剂量组PCNA阳性细胞率降低,PI3K、Akt、DDR1蛋白表达降低(P<0.05或<0.01).结论 白花蛇舌草乙醇提取物能够抑制大鼠肝癌细胞增殖,其机制可能与下调DDR1表达,抑制PI3K/Akt信号通路有关.     

炙马钱子对实验性兔脊髓损伤Tarlov评分的影响

目的观察炙马钱子对实验性兔脊髓损伤(SCI)模型Tarlov评分的影响,探讨治疗脊髓损伤的新方法。方法 18只兔造模成功,随机均分为对照组、低剂量组、高剂量组。低剂量组每天喂服两次马钱子胶囊,每次40mg;高剂量组每次80mg。对照组给予淀粉颗粒。各组动物分别于造模后6h、24h、3d、1周、2周、3周6个时间点进行下肢Tarlov评分。结果低剂量组在治疗2周后Tarlov评分(1.67±0.5)较对照组(0.67±0.8)升高(P<0.05),3周后Tarlov评分(2.00±0.6)与对照组相(0.50±0.8)比差异有显著性意义(P<0.01);在高剂量组,在治疗1周后Tarlov评分(1.66±0.5)与对照组相比(0.83±0.7)差异有统计学意义(P<0.05),2周评分(2.17±0.7)和3周评分(3.00±0.6)与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01);且3周后,高剂量组与低剂量组相比也有统计学意义(P<0.05)。结论大剂量炙马钱子对脊髓损伤有治疗作用。     

多种生长因子诱导小鼠胚胎干细胞分化为胰岛素分泌细胞

背景:以往研究已证明胚胎干细胞可被诱导分化为胰岛素分泌细胞,但诱导时间较长,大部分需要1个月左右.目的:体外联合应用激活素A、全反式维甲酸、碱性成纤维细胞生长因子和烟酰胺4种生长因子,观察能否在较短的时间内将小鼠胚胎干细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞.设计:细胞观察实验.单位:上海市内分泌及代谢病研究所,上海交通大学医学院附属瑞金医院.材料:实验于2004-10/2006-02在上海市内分泌研究所完成.清洁级孕12.5～14.5d龄昆明小白鼠2只,由上海斯莱克实验动物有限公司提供,动物质量合格证号2004A034,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准.小鼠胚胎干细胞株由法国里昂CNRSUMR5641实验室张昌贤教授提供.激活素A为R&D公司产品;全反式维甲酸,烟酰胺由Sigma公司提供;碱性成纤维细胞生长因子由Gibco公司提供.方法:取孕鼠胚胎,除去头部和内脏,将剩余组织剪碎,胰酶消化后制备细胞悬液,取上层离心重悬,按3×108L-1接种培养,传2～3代时作为滋养层细胞.将鼠胚胎干细胞接种到新鲜滋养层上,加入含白血病抑制因子的knockout DMEM培养基,常规培养两三天后按1:3～1:6传代,当细胞与细胞之间分开时加入含血清的培养液终止消化,离心弃上清,制成单细胞悬液按2.5×104密度接种,加入不含白血病抑制因子的培养液,24～48h后收集形成的胚胎体,铺于Matrigel铺底的培养皿中.胚胎体贴壁后,在含有100μg/L激活素的10% FBS/DMEM中培养24h,再将培液换为10% FBS/DMEM培养6~8h作为间隔,然后把分化的胚胎体在含10-6mol/L全反式维甲酸的10% FBS/DMEM中培养24h,在含10μg/L碱性成纤维细胞生长因子的10% FBS/DMEM中培养3～5d,在含N2、 B27、1μg/L层粘连蛋白、10μg/L碱性成纤维细胞生长因子、10mmol/L烟酰胺的DMEM/F12培液中培养3～5d.诱导结束后,采用双硫腙染色、免疫荧光染色、RT-PCR检测分化细胞胰岛素的表达.主要观察指标:[1]胚胎干细胞的诱导情况.[2]双硫腙染色及免疫荧光染色.[3]RT-PCR检测.结果:[1]滋养层上的小鼠胚胎干细胞呈集落状态贴壁生长,集落边缘清晰,细胞之间的界限不明显.胚胎体形成后转至matrigel板上2d即贴壁.激活素A和全反式维甲酸间歇诱导后,碱性成纤维细胞生长因子培液中的细胞大部分变为上皮细胞样;经含N2、B27、层粘连蛋白、碱性成纤维细胞生长因子、烟酰胺的DMEM/F12培液作用后,细胞形成小的簇状结构.[2]诱导生成的胰岛素分泌细胞经双硫腙染色呈暗红色,免疫荧光染色呈红色,均为阳性反应.[3]经激活素A、全反式维甲酸、碱性成纤维细胞生长因子、烟酰胺四种生长因子诱导2周后,分化细胞不表达Insulin 1mRNA,表达Insulin 2, Pdx1, Nkx6.1, Nkx2.2, PP, LAPP, Glutt2, Somastatin, Hnf3 β及Neuro D mRNA.结论:体外联合应用激活素A、全反式维甲酸、碱性成纤维细胞生长因子和烟酰胺4种生长因子,能够将小鼠胚胎干细胞成功诱导分化为胰岛素分泌细胞,且诱导时间缩短至2周.     

心肌钙蛋白R在急性心肌梗塞时的诊断临界值探讨

目的应用临床诊断性能（ROC）曲线，探讨急性心肌梗死（AMI）时心肌损伤标记物心肌钙蛋白T（cTnT）在不同时间内的临床诊断临界值。方法测定非AMI患者和AMI患者入院后2h内、24h内、48h内的血浆或血清cTnT、浓度，通过临床诊断性能ROC曲线特性分析cTnT在AMI不同时间内的临床诊断临界值。结果非AMI患者cTnT、的浓度不随时间发生变化，而AMI患者的cTnT浓度随时间呈动态变化，且不同时间内的诊断临界值不同，即入院2h内、24h内和48h内其初筛临界值分别为0．031μg／L、0.039μg／L和0．030μg／L；最佳临界值分别为0．038μg／L、0．045μg／L和0．038μg／L;确诊临界值分别为0．046μg／L、0058μg／L和0．056μg／L；其ROC曲线下面积（AUC）分别为0．970、0．975和0．938。结论AMI患者的cTnT浓度随时间呈动态变化，不同时间内cTnT的临床诊断临界值不同。     

微流控芯片电泳测定血清小而密低密度脂蛋白及临床应用价值

目的建立微流控芯片电泳分离血清小而密低密度脂蛋白(sdLDL)的方法并探讨其临床应用价值。方法利用自制的微流控芯片,选择Tricine缓冲液为电泳缓冲液,SDS作为添加剂,电泳分离经硝基苯并噁二唑-C6-酰基鞘胺醇(NBD C6-ceram-ide)预染的脂蛋白,激光诱导荧光技术检测。结果大而轻低密度脂蛋白(lLDL)、sdLDL、极低密度脂蛋白(VLDL)和高密度脂蛋白(HDL)在3 min内得到有效分离。冠心病(CHD)组,sdLDL检出率显著高于正常对照组(P<0.01)。CHD患者血清经连续3次分析,sdLDL出峰时间和峰面积相对标准差分别为2.18%和2.94%。sdLDL阳性组TG水平增高,HDL-C水平降低,均与阴性组存在显著差异(P<0.01和P<0.05)。CHD患者sdLDL与三酰甘油(TG)、载脂蛋白B(apoB)呈正相关(r=0.82和0.79,P<0.0001)。结论微流控芯片电泳可望成为sdLDL的常规分析手段,用于CHD危险性的评估。     

13167例住院患者24小时死亡时间分布研究及对策

目的:通过对13167例住院患者24 h死亡时间的统计,分析患者总体死亡时间变化规律,分析其中3个系统疾病患者死亡时间变化规律,提出预见性护理对策。方法:将1963年到2009年报道的13167例住院患者死亡时间进行搜集并按病种分类,绘制13167例、呼吸系统、心血管系统、脑血管系统住院患者24 h死亡时间分布图。结果:13167例住院患者总体死亡时间高峰出现在3时至7时;呼吸系统患者死亡时间高峰出现在19时至8时;心血管系统患者死亡时间高峰出现在4时至11时;脑血管系统患者死亡时间高峰出现在6时至11时。结论:13167例各系统住院患者死亡时间集中于下半夜;呼吸系统患者死亡时间高发时段还包括上半夜;心脑血管系统患者死亡高发时段包括上午,其中脑血管系统患者在下午还出现死亡的小高峰。     

品管圈活动在减少病区药房调剂差错件数中的应用

目的：通过品管圈活动,减少病区药房调剂差错件数,降低患者用药风险。方法将品管圈方法应用到病区药房发药中,分析病区药房调剂差错的主要原因,拟定相应对策并实施,对实施结果进行评价与讨论。结果该院病区药房发药差错件数由每周41．33件降至每周18件,改善幅度达56．45％。结论品管圈活动对于发现和解决病区药房调剂差错有效。通过开展品管圈活动可减少病区药房调剂差错件数,提高药学部对临床的服务水平,同时可提高药师团队解决实际问题的能力与团队协作能力。     

PDCA循环管理法在手术室新人护士培训中的应用

自2005年10月以来,我们运用PDCA循环管理法对手术室新人护士进行培训,取得满意效果.现报告如下.     

护理干预在预防泌尿外科腔镜手术患者术中低体温的效果分析

目的:总结并归纳护理干预对泌尿外科腔镜手术患者术中低体温的作用效果.方法:从我院2014年9月～2017年9月,选取120例进行泌尿外科腔镜手术患者作为研究对象,以计算机表法分为两组,观察组以及对照组各60例,对照组使用常规护理,观察组采用保温护理,以两组患者在手术中的体温以及手术情况作为主要评价标准,对两种干预手段的护理效果进行评估.结果:在观察组,使用保温护理后,各项数值与对照组相比,呈现较小的状况,而且两者之间相差较大,而P<0.05,数据从统计结果思考,具有参考价值.结论:保温护理可以有效预防泌尿外科腔镜手术患者术中体温较低的情况,并且具有更高的护理效果,有效地控制体温下降幅度,可以被推广应用.