非病毒载体介导pBMP-2转染MC3T3-E1细胞的体外成骨分化研究

目的 :探讨非病毒载体Gen Escort TM II介导质粒骨形态发生蛋白2(p BMP-2)转染对MC3T3-E1细胞增殖和体外成骨分化的影响。方法:以非病毒载体Gen Escort TM II介导报告基因质粒增强型绿色荧光蛋白(p EGFP)转染MC3T3-E1细胞,优化转染条件,荧光显微镜和流式细胞仪评价转染效率。p BMP-2转染MC3T3-E1细胞后,MTT法检测细胞增殖情况,染色法检测碱性磷酸酶(ALP)和茜素红S(ARS)的表达,Real-time PCR分析成骨细胞标志基因ALP、骨涎蛋白(BSP)、Runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙素(OCN)和骨桥蛋白(OPN)的表达。结果 :Gen Escort TM II介导p EGFP转染MC3T3-E1细胞后,转染效率达35.02±4.42,MTT结果示基因转染对细胞增殖无影响(P>0.05)。p BMP-2转染组的ALP、ARS表达较p EGFP转染组和未转染组显著,同时Real-time PCR检测结果示,转染后6 d,p EGFP转染组和未转染组相比,p BMP-2转染组的成骨基因ALP、BSP、Runx2、OCN、OPN的表达量差异有显著性意义(P<0.05)。结论:非病毒载体Gen Escort TM II介导BMP-2转染MC3T3-E1细胞可诱导其向成骨方向分化。     

镁离子激活自噬促进大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的体外实验观察

目的:探讨镁离子对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)成骨分化的影响及其相关的机制.方法:以成骨诱导培养液(含镁离子0.8 mmol/L)为对照组,在此培养液中依次添加100、200、400μmol/L镁离子作为实验组(Mg 100、200、400μmol/L组).培养大鼠BMSCs,应用MTT法检测镁离子对细胞代谢活性的影响,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和对-硝基苯磷酸盐法检测细胞ALP蛋白的表达,茜素红染色和半定量分析检测细胞外基质钙盐的沉积情况,实时荧光定量分析检测ALP、骨钙素(osteocalcin,OCN)、骨桥素(osteopontin,OPN)、BMP-2及镁转运蛋白1(MagT1)基因的相对表达量,激光共聚焦观察OCN、LC3蛋白的表达水平,Western Blot检测OCN蛋白、自噬相关蛋白的表达水平,自噬双标腺病毒转染观察细胞自噬流情况,荧光素酶法检测细胞内ATP浓度.结果:1、4、7 d时,实验组Mg 100、200、400μmol/L对大鼠BMSCs的增殖活性无显著影响(P>0.05);实验组Mg 100、200、400μmol/L ALP染色和茜素红染色较对照组深染,ALP蛋白分泌和ARS基质矿化均较对照组增加,其中Mg 100μmol/L组较对照组有显著性差异(P<0.01);7 d时,实验组Mg 100、200、400μmol/L的ALP、OCN、OPN、BMP-2和MagT1基因相对表达均较对照组上调,其中Mg 200μmol/L组表达量最高(P<0.01);4 d时,实验组Mg 100、200、400μmol/L OCN蛋白免疫荧光染色较对照组均有一定程度增强,其中Mg 200μmol/L组OCN蛋白荧光染色最强;Mg 200μmol/L组LC3蛋白荧光染色增强,呈斑点状分布;4 d时,实验组Mg 100、200、400μmol/L OCN和LC3Ⅰ/Ⅱ蛋白表达提高,Mg 200μmol/L组的蛋白条带染色最深、灰度值比最高.1 d时,AdPlus-mCherry-GFP-LC3B转染后Mg 200μmol/L组双荧光共表达成斑点状分布;3、6 d时,实验组Mg 100、200、400μmol/L细胞内ATP浓度较对照组均下降,且差异具有统计学意义(P<0.01),其中Mg 400μmol/L组的细胞内ATP水平最低.结论:生理范围内镁离子浓度增加对BMSCs增殖活性无显著影响,可以提高BMSCs成骨分化、矿化性能,其作用可能与MagT1的表达上调、细胞内ATP水平下降和自噬激活相关.     

松果菊苷促进大鼠脂肪干细胞成骨分化的研究

目的:探讨松果菊苷对大鼠脂肪来源干细胞(ADSCs)成骨分化的作用及其可能机制。方法:以0.01、0.1和1 mg/mL松果菊苷培养液培养ADSCs,未加松果菊苷的培养液作为对照组,应用MTT法检测松果菊苷对细胞增殖活性的影响,碱性磷酸酶(ALP)染色和半定量检测细胞ALP的表达,茜素红染色(ARS)和半定量检测细胞的基质矿化,Western blot检测ERK、p38和JNK的蛋白磷酸化水平。结果:1、4、7 d,0.01及0.1和1 mg/mL松果菊苷培养液对大鼠ADSCs的增殖活性无显著影响(P>0.05); 0.01、0.1和1 mg/mL松果菊苷培养液组ALP染色和ARS染色较对照组深染,ALP蛋白分泌和ARS基质矿化均较对照组有显著的增加(P<0.05);0.01 mg/mL松果菊苷培养液作用下ERK、p38和JNK的蛋白磷酸化水平升高。结论:松果菊苷对ADSCs增殖无影响,可促进ADSCs向成骨方向分化,其作用机制与MAPK信号通路有关。     

玻璃纤维增强型复合树脂桩核对基牙折断烤瓷牙效果

目的 探讨用玻璃纤维增强型复合树脂桩核即刻修复基牙折断烤瓷牙的效果.方法 选择19例病人,共22颗基牙折断的烤瓷牙,用玻璃纤维增强型复合树脂桩核即刻修复,并随访观察修复后的牙龈形态、修复体功能、牙根X线片表现等指标.结果 本组22颗牙,随访12个月,1例发生再折断,再次修复,其余21颗牙龈无充血及萎缩,修复体功能良好,未出现根折及根尖周炎表现.结论 玻璃纤维增强型复合树脂桩核即刻修复基牙折断烤瓷牙是一种简便快捷的烤瓷基牙修复方法 .     

玻璃纤维桩修复后牙残冠、残根的效果评价

目的:探讨玻璃纤维桩核与金属烤瓷全冠修复后牙残冠、残根的临床效果.方法:选取100例(18～60岁)后牙残冠、残根患者,共计195颗患牙.经过完善的根管治疗后随机分为2组,实验组50例患者共95颗患牙,植入玻璃纤维桩核;对照组50例患者共100颗患牙,用金属铸造桩核修复.2组患者均用金属烤瓷全冠恢复牙体外形.观察2组患者的修复体形态、功能和成功率,并用SPSS13.0软件包对2组修复体的成功率进行X2检验.结果:随访36个月,实验组共90颗牙咀嚼功能良好,无不适主诉,修复体牢同,牙龈及根尖无明显炎症,占总数的94.74%,而对照组100颗牙获得85.00%的成功率,2组差异有显著性意义(P＜0.05).结论:玻璃纤维桩核可以作为理想的后牙残冠、残根桩核修复材料.     

即刻骨移植与延期牙种植术联合应用修复牙槽骨缺损的初步研究

目的:探讨即刻骨移植与延期牙种植术联合应用修复外伤性上颌前牙区唇侧牙槽骨及牙列缺损的效果.方法:选择16例因各种外伤引起的上颌前牙区牙槽骨唇侧部分缺损及部分上前牙缺失患者.在清创缝合伤口的同时,切取大小合适的自体颅骨外板或颏部骨板,移植到骨缺损部位,钛钉固定.严密缝合牙龈及黏骨膜组织,并在12周后植入ITI SLA种植体42颗.种植体植入后12周,用金属烤瓷牙做固定修复.另选22例患者共50颗采用标准种植手术且无需植骨的ITI SLA种植体作为对照组,于种植体植入后不同时间点,采用无线共振频率分析仪测定2组患者的种植体稳定值(ISQ),应用SPSS13.0软件包对实验组与对照组的ISQ值进行配对t检验.结果:16例患者软组织伤口均一期愈合,黏膜及牙龈组织形态良好,牙槽骨丰满,牙槽弓弧度满意.义齿修复后形态及功能良好.2组种植体在0,4、12、52周时ISQ均值差异比较,其P值分别为为0.82、0.85、0.96和0.89.结论:外伤引起的上颌前牙区牙槽骨唇侧部分缺损,在清创缝合伤口的同期进行自体骨移植,再延期采用种植义齿修复,可以缩短疗程,减少手术次数,获得良好的修复效果.     

多孔支架材料PLGA/HA生物相容性的实验研究

目的:探讨多孔支架材料聚乳酸羟基乙酸/羟基磷灰石(poly lactic-glycolic acid/hydroxyapatite,PLGA/HA)的生物相容性。方法:贴壁法培养兔骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs),经体外诱导、扩增,采用实验组A:PLGA/HA(5%HA)、实验组B:PLGA/HA(10%HA)的梯度浸提液进行体外培养,应用MTT法评估材料的细胞毒性;BMSCs与实验组A、实验组B、对照组C(polylactic-glycolicacid,PLGA)进行体外复合培养,通过定性及定量检测细胞在材料表面的粘附、增殖能力及成骨活性,比较分析各组支架材料之间的差异。结果:两实验组材料的细胞毒性均为0或1级;BMSCs能在实验组和对照组支架材料上粘附、增殖,且两实验组与对照组在各时间点有显著性差异(P<0.01)。碱性磷酸酶活性各时间点在两实验组间无明显差异。结论:多孔支架材料PLGA/HA(5%HA)、PLGA/HA(10%HA)具有良好的生物相容性,有可能应用于骨组织工程。     

数码摄影教学在口腔医学本科生口腔修复临床实习中的应用

目的 评价数码摄影教学在口腔医学本科生口腔修复临床实习中的必要性及教学效果。方法 选择上海交通大学医学院口腔教学综合门诊进行口腔修复临床实习的5年级口腔临床医学七年制在读学生,开设数码摄影课程,通过课前及课后问卷调查的方式了解学生的需求、检测学习效果及发现教学内容上的不足之处,并且通过课后学生的摄影实践和病例汇报综合检验学习成果。结果 问卷调查结果显示在本科阶段临床实习中对学生开展有针对性的数码摄影教学很有必要,通过课程的学习和课后实践,学生对于口腔数码摄影的认识明显提升。病例汇报结果显示学生掌握了口腔修复摄影基本技能的应用,可见数码摄影教学取得了良好的教学效果。结论 在口腔医学本科生口腔修复临床实习中开展数码摄影教学提升了学生对于口腔数码摄影的认识,使学生掌握了口腔修复摄影的基本技能。     

RGD-PLGA/HA膜材料的细胞亲和性实验研究

目的:研究将RGD肽结合至聚乳酸基复合材料-聚乙交脂丙交脂与羟基磷灰石的复合物,形成的新型RGD-PLGA/HA(RGD peptide modified poly lactic-glycolic acid/hydroxyapatite)膜材料的细胞亲和性。方法:以RGD-PLGA/HA膜和作为对照的未结合RGD肽的PLGA/HA材料为实验对象,取第二代兔骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)接种到材料上,培养4、12、24h后,细胞计数仪计数定量检测粘附的细胞数,得到粘附率;培养4、24、96h后环境扫描电镜比较粘附细胞的形态和质量。结果:实验组材料与BMSCs复合培养4、12h后,测定细胞粘附率分别为(40.5±1)%、(46.5±0.5)%,均高于同期对照组(P<0.05);24h后实验组材料的细胞粘附率(57.3±0.5)%,也较对照组(47.5±0.5)%高(P<0.01);环境扫描电镜观察BMSCs与实验组材料的细胞形态和质量明显优于对照组。结论:与PLGA/HA相比,新型RGD-PLGA/HA膜材料能提高其对BMSCs的亲和性。     

陶瓷厚度与基牙底色对4种常用CAD/CAM瓷修复体颜色的影响

目的 研究4种不同厚度和半透明度CAD/CAM陶瓷在不同基牙底色上的遮色效果，为临床的陶瓷材料选择提供参考。方法 4种CAD/CAM陶瓷分别是：IPS e.max CAD（硅酸锂玻璃）, VITA SUPRINITYPC（氧化锆增强玻璃）, VITABLOCS MarkⅡ（长石基玻璃）和Vita Enamic（聚合物渗透陶瓷），制作成不同厚度(1 mm、1.5 mm、2 mm)的瓷块试样，在7种基牙底色(A1、A2、ND7色调复合树脂、白色(White)、黑色(Black)、钴铬合金(CC)、贵金属合金(PMA)下使用分光光度计检测Lab值，同一种瓷块2 mm厚度在A2色上的表现作为对照组，横向比较各种瓷块在不同基牙底色上的色差值以及半透明度。结果 ΔL、Δa、Δb值随着陶瓷厚度的增加逐渐减小，且在4种陶瓷间存在明显差异；半透明性参数均值按半透明度递减顺序依次为长石基玻璃>硅酸锂玻璃>氧化锆增强玻璃>聚合物渗透陶瓷；其中半透明度越大，其陶瓷的遮色效果反而越差；当厚度达到2 mm时，4种陶瓷在各种基牙底色下的ΔE（临床可接受颜色阈值）均<3.7;4种陶瓷中ΔE与厚...