人脱细胞软骨细胞外基质对异种软骨种子细胞的影响

目的观察人脱细胞软骨细胞外基质(hACAM)对异种兔软骨种子细胞增殖和表型的影响。方法将差速梯度离心法制作的人脱细胞软骨细胞外基质,配制成0.5%的浆料,分别铺于6孔细胞培养板和96孔细胞培养板,形成1 mm厚的薄膜,以此培养板为实验组。空白对照组培养板仅使用单纯培养液培养。在培养板上培养兔关节软骨细胞。通过hochest33258染色验证人软骨细胞外基质脱细胞完全与否;分别在第5、15天两个时间点,通过倒置显微镜、甲苯胺蓝染色观察两种培养方法的兔软骨细胞的生长形态、细胞表型和增殖情况,用CCK-8细胞增殖实验比较两种培养方法在第1、3、7、10天的增殖情况。结果通过hochest33258染色发现差速梯度离心的人软骨细胞外基质脱细胞完全。通过倒置显微镜观察第5和15天的实验组细胞增殖情况优于空白对照组,甲苯胺蓝染色的结果也证明这个观点;CCK-8细胞增殖试验显示第7天hACAM组在细胞增殖方面明显地优于单纯培养液的对照组(P=0.0298),hACAM组的软骨细胞与空白组的软骨细胞在第10天的增殖情况相比没有统计学差异。结论 hACAM免疫原性低,无细胞毒性,能够很好地促进异种软骨细胞的增殖。     

斯特灵公式在统计学中的一个应用

在概率与数理统计中有一条非常重要结论 ,即自由度为ｎ的ｔ分布ｔ（ｎ）→Ｎ（０，１） (标准正态分布 )（ｎ→∞ )。这条结论无论在理论上还是在应用中无疑是非常重要的。以下给出一种本结论的简单证明方法假定ｔ（ｎ）的分布密度函数为ｐｎ（ｘ） ,则ｐｎ（ｘ）＝。故只要证明ｌｉｍｐｎ（ｘ）＝ (标准正态分布Ｎ（０，１）的分布密度 )即可。因为ｎ为正整数 ,故只要分别考虑ｎ为奇数和偶数两种情况加以说明即可由于显然有ｌｉｍ ,因此只要证明极限 :。１ .ｎ＝２ｋ +１（ｋ为非负整数） ,故ГГ（）ｎ２ ｎπ＝…（ｋ -）１２ （ｋ -）（…     

脱细胞半月板细胞外基质对半月板细胞的影响

目的探讨脱细胞半月板细胞外基质(dMECM)对传代半月板细胞增殖、细胞活性以及细胞表型的影响。方法用CCK-8法检测dMECM对半月板细胞增殖的影响;将P3代的内侧半月板纤维软骨细胞种植在d MECM修饰盖玻片上,以未修饰盖玻片为对照,体外培养7、14d后进行细胞活性检测,糖胺多糖、胶原分泌含量测定并用RT-PCR检测半月板细胞特异性基因mRNA表达变化。结果 CCK-8结果证实,与对照组比较,生长在dMECM修饰盖玻片上的P3代兔半月板纤维软骨细胞具有更好的细胞增殖特性(P0.05);细胞死/活染色结果证实dMECM组可维持更好的细胞活性;糖胺多糖和胶原定量检测结果证实dMECM组在第7、14天时,比对照组分泌更多的糖胺多糖和胶原(P0.05)。RT-PCR的检测结果证实体外培养7、14 d时,dMECM组II型胶原mRNA表达显著上调(P0.05)。结论 dMECM可以很好地促进半月板纤维软骨细胞的增殖、分化以及细胞活性的维持,可能是未来半月板组织工程领域非常有前景的支架材料之一。     

人脐带Wharton胶细胞外基质对软骨种子细胞的作用

目的 观察人脐带Wharton胶细胞外基质（hWJECM）对兔软骨细胞增殖的影响.方法用差速离心法制作hWJECM,制成0.5%浓度浆料分别铺于六孔细胞培养板和96孔细胞培养板上,形成1 mm厚的薄膜,包被有此膜的培养板作为试验组,未铺膜单纯培养液组作为空白对照组,在培养板上培养兔关节软骨细胞.通过倒置显微镜观察,甲苯胺蓝染色观察两个组的兔软骨细胞5,10,15天的生长形态和增殖情况,用CCK8细胞增殖实验比较两组的1、3、5、7 d的增殖情况,来评估软骨种子细胞的增殖和表型维持情况.结果倒置显微镜观察5、10、15 d的细胞增殖情况好于单纯培养液组,5、15 d的甲苯胺蓝染色的结果也证明这个观点,CCK8细胞增殖试验1,3天时试验组和对照组的增殖没有明显的统计学差异（P=0.7142; P=0.0657）,第5,7天显示hWJECM组在细胞增殖方面明显地优于单纯培养液的对照组（P=0.0001;P=0.0006）.结论 hWJECM免疫原性低,无细胞毒性作用,能够很好地促进软骨细胞的增殖.     

零因子方法在计算留数问题中的应用

目的：使留数计算问题更加简化，方法：引入零因子的概念，结果：借助于零因子的概念，可以简化留数计算方法中奇点分类的说明，结论：应用本方法，使传统的教学方法进一步得以改进。     

新型脱细胞半月板细胞外基质的制备及其生物相容性的研究

目的探索新型脱细胞半月板细胞外基质(d MECM)的制备方法,并对其细胞相容性进行研究。方法无菌条件下收集新鲜的猪半月板组织,切碎,采用湿法粉碎、差速离心的方法制备dM ECM生物材料。通过天狼猩红、甲苯胺蓝染色方法分别比较天然半月板与dM ECM中胶原以及糖胺聚糖含量的区别;采用Hoechst 33258荧光染色法观察脱细胞后dM ECM中DNA残留情况。将P3代的兔内侧半月板细胞种植在铺有dM ECM的盖玻片上,体外培养7 d后行扫描电镜检测其细胞相容性。结果本实验制备的dM ECM天狼猩红、甲苯胺蓝染色均呈阳性,并且与天然半月板染色类似;dM ECM行Hoechst33258染色呈阴性;扫描电镜结果显示种植于d MECM表面上的半月板细胞黏附紧密,可见大量细胞ECM的分泌。结论本实验制备的dM ECM可以很好地保留天然半月板ECM成分,有效地去除DNA物质,并且具有良好的生物相容性,是未来半月板组织工程领域非常有前景的支架材料。