抗生素诱导的肠道菌群失调加重小鼠肺炎支原体感染

目的初步探讨抗生素诱导的肠道菌群失调对肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)呼吸道感染的影响。方法C57BL/6J小鼠口服万古霉素和庆大霉素21 d后滴鼻感染Mp。实时荧光定量PCR(qPCR)分析抗生素处理前后小鼠粪便中5个主要菌门的菌量;qPCR检测感染后3 d和7 d肺组织中Mp载量;病理切片和HE染色分析肺组织炎症病理改变;流式细胞术分析小鼠脾脏T淋巴细胞分泌的IFN-γ和IL-4;间接ELISA检测Mp特异性IgM和IgG。结果口服万古霉素和庆大霉素后小鼠粪便中拟杆菌门菌量显著减少,厚壁菌门菌量增多,δ,γ变形杆菌门、放线菌门和软壁菌门菌量亦发生改变;口服抗生素小鼠感染Mp后3 d和7 d肺组织Mp载量和炎症病理评分增加,7 d小鼠脾淋巴细胞中分泌IFN-γ的CD4+T细胞减少。结论抗生素诱导的小鼠肠道菌群失调可加重Mp呼吸道感染。     

生殖支原体脂质相关膜蛋白诱导宫颈上皮细胞表达人β防御素2

目的观察生殖支原体脂质相关膜蛋白(LAMP)能否诱导宫颈上皮细胞表达人β防御素2(hBD-2),并探讨其可能的调控机制。方法体外培养End1/E6E7人宫颈上皮细胞,用不同浓度的LAMP作用细胞48 h,反转录PCR检测hBD-2 mRNA的表达,Western blot法检测hBD-2蛋白的表达;用Toll样受体2(TLR2)和TLR6中和抗体孵育End1/E6E7细胞,并用TLR2、TLR6和MyD88负显性突变体转染细胞,以明确TLR2、TLR6和MyD88在介导hBD-2表达中的作用;Western blot法检测核因子κB(NF-κB)p65亚基核转位情况,电泳迁移率实验(EMSA)分析LAMP处理前后NF-κB的DNA结合活性;采用NF-κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)处理,观察对hBD-2表达的影响。结果生殖支原体LAMP可诱导End1/E6E7细胞表达hBD-2mRNA和蛋白。TLR2和TLR6中和抗体以及其负显性突变体转染后,能降低hBD-2表达;MyD88负显性突变体也能显著抑制LAMP诱导的hBD-2表达。Western blot结果显示,LAMP处理后可诱导p65核转位,并能增强NF-κB的DNA结合活性。而NF-κB抑制剂PDTC处理后,hBD-2表达降低。结论生殖支原体LAMP可诱导End1/E6E7细胞表达hBD-2,可能受TLR2、TLR6/MyD88/NF-κB调控。     

一种新人鼠多发性骨髓瘤模型的建立及特性研究

多发性骨髓瘤(MM)其特点是恶性浆细胞在骨髓微环境中不规则积聚引起的不同程度贫血、骨破坏、肾功能不全、高钙血症和感染[1].MM发病机制尚不明确且目前仍被认为不可治愈,因此建立MM模型具有重大意义.Yaccoby等[2]曾建立起较经典的SCID-hu MM模型,但是该模型却忽略了MM是在有免疫力的人体发生的.我们试用尚有残余免疫力的BALB/c裸鼠建立MM模型并研究其特性.     

电离辐射致中国仓鼠卵巢细胞DNA损伤效应

DNA在细胞内外各种因素的作用下可不断出现变化，DNA分子中发生任何非生理性的改变均可看作是DNA的损伤。然而DNA损伤后最终导致的结局如何?过去人们围绕DNA损伤导致的致癌效应和遗传效应的研究较多，而用生殖细胞作为研究模型，研究其DNA损伤的遗传效应则报道的相对较少。与体细胞相比研究包括电离辐射在内的环     

过表达脑源性神经营养因子的神经干细胞移植对受照海马内神经营养因子的影响

目的 探讨过表达脑源性神经营养因子（BDNF）的神经干细胞（NSCs）移植入放射性脑损伤大鼠模型后,对海马内神经营养因子水平及小胶质细胞活化的影响。方法 从胎鼠脑中分离海马神经干细胞并进行培养。选用绿色荧光蛋白（GFP）-慢病毒、GFP-BDNF-慢病毒感染神经干细胞。将SD大鼠按随机数表法分为4组：健康对照组、单纯照射组（R组）、照射后GFP修饰的神经干细胞移植组（R+NSCs组）、照射后GFP-BDNF修饰的神经干细胞移植组（R+BDNF-NSCs组）。全脑单次20 Gy照射后1个月将神经干细胞移植入大鼠双侧海马内。移植后2和8周检测海马组织中BDNF、胶质源性神经营养因子（GDNF）、神经生长因子（NGF）的表达情况;免疫荧光染色观察小胶质细胞活化情况。结果 移植后2和8周时,与R组相比,R+BDNF-NSCs组海马组织中BDNF、NGF蛋白表达均水平明显增高（P<0.05）;移植后8周R+NSCs组和R+BDNF-NSCs组活化的小胶质细胞与R组相比并未显著减少（P>0.05）。结论 过表达BDNF的神经干细胞移植后促进BDNF、NGF的产生,增加了辐射暴露后的海马内神经营养因子水平。     

清醒状态下大鼠放射性脑损伤实验模型的建立

目的　排除麻醉药物对实验结果的干扰 ,建立清醒状态下全脑照射大鼠放射性脑损伤实验模型。方法　将SD大鼠随机分为 2Gy、15Gy、30Gy剂量照射组和假照射组 ,每组 2 5只。自制“热记忆膜固定罩”固定大鼠照射体位 ,4MeV电子线作不同剂量的单次全脑照射 ,并用治疗束流分析仪和剂量仪作剂量学监测。在照射后 1个月内每周 2次 ,观察并记录大鼠头部照射野毛发与皮肤的情况以及体重的变化 ,并进行神经行为学评分。观察大鼠在照射前、照射后 6h、1d、1周和 1个月时海马CA1区神经细胞的病理形态学改变。结果　该照射条件下的最大剂量点深度约为 14 .3mm ,各照射点吸收剂量的差异≤ 5 %。在通过“热记忆膜固定罩”后 ,剂量衰减率≤2 .5 7%。全部 30Gy和部分 15Gy照射的大鼠在照射后约 2 0d出现照射野内脱毛现象 ,其余大鼠在观察期内无上述表现。各组别大鼠体重增长趋势和神经行为评分差别无显著性意义 (P >0 .0 5 )。病理观察显示放射性脑损伤程度与照射剂量、观察时间呈正相关 ,30Gy照射后随观察时间的延长 ,大鼠海马CA1区神经细胞逐步出现损伤和坏死。结论　该动物模型制作方法简便、可靠 ,排除了麻醉药物对实验结果的干扰 ,临床模拟性好 ,可用于早期放射性脑损伤与防护机制的实验研究     

细菌逃逸中性粒细胞杀伤机制的研究进展

先天性免疫系统是人体对抗细菌入侵的最前沿防线,中性粒细胞作为其主要的免疫细胞可捕获并吞噬降解细菌,对于维持机体的健康不可或缺.部分病原菌(链球菌、脑膜炎奈瑟菌、克雷伯氏菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌和流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、结核分枝杆菌等)已经进化出能够在胞外和胞内逃逸中性粒细胞的杀伤机制,甚至利用细胞作为其生存繁殖...     

脑胶质瘤U251细胞CD133阳性与阴性对放射敏感性影响的初步研究

肿瘤干细胞可能是肿瘤的“起始细胞”和治疗失败的根源^\[1\]。但是,肿瘤干细胞和非干细胞放射生物学特性之间的差异仍不十分清楚。为此以CD₁₃₃为标志物,对脑胶质瘤U₂₅₁细胞应用流式细胞仪分选出CD₁₃₃阳性与阴性细胞,观察两者之间放射敏感性差异。     

食管癌分次放疗期间重要危及器官剂量的不确定性

目的观察食管癌分次放疗期间,重要危及器官（肺和脊髓）受照体积和剂量的变化情况。方法选取14例未手术并接受全程适形放疗的食管癌患者。放疗照射第10、20次后重新定位CT扫描,再次勾画靶区（GTV和PTV）,并根据新靶区重做三维适形计划。随后将放疗前制订的放疗计划复制到新的CT图像上,比较重做计划和没有重做计划的肺和脊髓受照剂量和容积的变化。结果在食管癌分次放疗过程中,14例患者中有12例的右肺平均剂量（MLD）显著增加（P〈0.01）;左肺接受≥5Gy的体积（V5）显著增加（P〈0.01）。右肺V5、V10均显著增加（均P〈0.01）。71.4%（10/14）的患者1ml体积脊髓受照剂量（D1ml）显著增加,增加范围为0.06～4.29Gy（P〈0.05）。第21次到放疗结束,杂交计划（CT3/plan1）和重新计划（CT3/plan3）相比,76.9%的患者脊髓最大剂量（Dmax）显著增加,增加的范围为0.68～5.29Gy（P〈0.01）。结论食管癌分次适形放疗期间,重要危及器官（肺和脊髓）的受照体积和剂量都出现明显的变化,致使放疗的实施存在不确定性。