HPLC法测定穿琥宁原料及其注射剂的含量

目的测定穿琥宁原料及其注射剂的含量.方法采用HPLC法,色谱柱为Shim-pack VP-ODS柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相磷酸盐缓冲液(pH 5.8)-甲醇(70∶130),检测波长251nm,流速1.0mL·min-1,灵敏度0.10AUFS.结果平均回收率为99.65%,线性范围为8.32～74.88μg·mL-1,r=0.999 9.结论该法简便、快速、专属性强、灵敏度高,可用于穿琥宁原料药及制剂的质量控制.     

卡氏肺孢子虫MSG抗原基因片段真核表达质粒构建与表达

[目的]构建大鼠源卡氏肺孢子虫MSG抗原基因片段真核表达质粒,进行表达。[方法]以卡氏肺孢子虫DNA为模板,应用PCR扩增MSG基因片段,连接至pGEM-T Easy载体,再克隆至PCDNA3.1( )载体。构建的重组表达质粒经酶切、PCR鉴定后转染至COS-7细胞,并进行大量增殖。RT-PCR验证转染基因的表达。[结果]重组表达质粒PCDNA3.1( )/MSG经酶切及PCR鉴定结果表明构建成功。RT-PCR结果显示MSG基因片段成功转染至COS-7细胞,并在其中进行基因表达。[结论]成功构建了PCDNA3.1( )/MSG重组质粒,并在COS-7细胞中表达,为进一步进行核酸疫苗的研究打下基础。     

硝苯地平控释片和他汀类调脂药物抗冠状动脉粥样硬化作用的研究进展

近些年来,我国的冠心病发病率和死亡率持续攀升,高血压、动脉粥样硬化引起心、脑、肾、视网膜等靶器官慢性缺血性损害,不稳定斑块的破裂和出血引起心肌梗死、脑卒中等急性心脑血管事件的发生.     

巨大神经纤维瘤1例

病例　患者宋某 ,女 ,5 9岁 ,因排尿排便困难 10天入院。患者自 2 4岁结婚以后 ,面部、体表便出现大量高出皮面的肿物 ,不活动 ,色泽较正常皮肤略暗 ,大小不等 ,而后逐渐波及全身 ,大者约 4× 4× 4ｃｍ3,小者约 0 5× 0 5× 0 5ｃｍ3,有的呈皮赘状 ,有的只是凸出体表 ,但无触压痛。于 10天前出现排尿排便困难 ,需靠导尿管排尿 ,遂到我院外科就诊。追问病史 :患者于 2 4岁前无月经来潮 ,其子女全身也有类似肿物。查体 :全身遍布大小不等肿物 ,颜面部、躯干较多 ,四肢较少。腹部无压痛 ,肝脾未触及 ,未触及包块。妇科检查 :阴道弯曲变形 ,…     

替硝唑对大鼠卡氏肺孢子虫肺炎作用的初步观察

肺孢子虫肺炎是免疫功能受损患者,尤其是艾滋病人肺部常见并发症。如不及时治疗,预后极差。目前预防和治疗本病的常用药物为戊烷脒和复方磺胺甲基异恶唑。但均存在明显的毒副作用。因此。研究高效、低毒、价廉的抗卡氏肺孢子虫（Pneumocystis carinii,Pc）药物成为当今肺孢子虫肺炎防治工作的迫切需要。替硝唑是一种抗滴虫、阿米巴及厌氧菌常用药物,应用替硝唑治疗肺孢子虫病尚未见报道。为此,本实验用替硝唑治疗大鼠肺孢子虫感染。观察了替硝唑对大鼠卡氏肺孢子虫肺炎的影响。试图寻找更为安全、有效的抗肺孢子虫药物。     

卡氏肺孢子虫p55抗原基因片段原核表达质粒的构建与表达

目的 构建卡氏肺孢子虫p55抗原基因片段原核重组表达质粒，表达重组蛋白。 方法 SD大鼠皮下注射免疫抑制剂地塞米松14周，建立卡氏肺孢子虫大鼠模型。从感染大鼠肺组织中抽提总RNA，RT-PCR克隆p55基因，测序, 验证扩增产物。利用定向克隆技术将p55基因片段克隆到载体pGEX-4T-1上，重组质粒经酶切分析、PCR鉴定后，用异丙基?鄄β?鄄D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。最后用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) 和蛋白质印迹（Western blotting）分析鉴定表达产物。 结果 克隆的p55基因片段为690 bp, 重组质粒pGEX-4T-1/690构建成功； SDS-PAGE显示目的蛋白相对分子质量(Mr)约为62 000，表达产量约占菌体蛋白的11.6%；Western blotting分析结果显示，表达蛋白能分别与谷胱甘肽（GST）抗体、卡氏肺孢子虫感染的大鼠血清发生反应。 结论 构建了卡氏肺孢子虫p55抗原基因的pGEX-4T-1/690重组质粒，诱导表达的蛋白具有良好的抗原性。     

基层医院PCI治疗冠心病187例临床分析

目的探讨在基层医院冠心病患者行经皮冠状动脉介入术（PCI）治疗的有效性和安全性。方法选择我院从2011年12月至2013年3月进行PCI治疗的187例冠心病患者,分析所有患者临床特征、冠状动脉造影血管病变特点、手术操作原则、手术成功率、并发症及术后随访情况。结果经皮冠状动脉成形术（PTCA）成功率96.79%,冠状动脉内支架植入术成功率95.72%。其中A、B、C型病变成功率分别为100%、100%、85.71%。完全闭塞病变血管25支,成功率达68%。严重并发症4.2%。结论PCI成功率达95%以上,未发生1例死亡,在基层医院实施PCI术是安全有效的。     

卡氏肺孢子虫MSG抗原基因片段的克隆与分析

目的建立卡氏肺孢子虫动物模型,体外扩增卡氏肺孢子虫MSG基因部分片段,方法取肺孢子虫肺炎大鼠肺组织制备卡氏肺孢子虫(Pc)DNA,并以此模板扩增MSG基因片段,将PCR产物与pGEM-T-easy载体连接,转化E.coli DH5a,在含氨苄青霉素(Amp)的LB培养基上筛选出重组子,提取重组质粒,并通过PCR、酶切及测序验证,并进行序列比较分析;结果PCR扩增获得长度为554bp的序列,测序结果与报道的基因序列相比,碱基序列完全相同。结论本研究从卡氏肺孢子虫DNA中成功获得MSG基因,MSG基因的克隆,为进一步开展MSG蛋白致病机制、基因工程疫苗等研究奠定基础。     

大鼠源卡氏肺孢子菌p55抗原基因克隆和序列分析

目的克隆大鼠源卡氏肺孢子菌55kDa抗原（p55）基因。方法取肺孢子菌病大鼠肺组织制备肺孢子菌DNA，并以此模板扩增p55基因，将PCR产物与pGEM—T载体连接．转化E．coli DH5a．在含氨苄青霉素（Amp）的LB培养基上筛选出重组子，提取质粒进行PCR扩增、酶切鉴定、序列测定及序列比较分析。结果p55基因体外扩增产物长度为l286bp，重组质粒经PCR及酶切鉴定结果表明获得正确重组子，测序结果与文献报道同源性为99．8％。结论成功扩增了p55基因，并插入克隆载体pGEM—T中。p55基因的克隆为进一步建立基因分型、疫苗等研究打下基础。     

肝动脉化疗栓塞联合射频消融治疗大肝癌的临床疗效

探讨肝动脉化疗栓塞联合射频消融治疗大肝癌的临床疗效。44例原发性大肝癌的患者随机分成实验组与对照组,每组各22例。对照组患者接受肝动脉化疗栓塞术,实验组患者接受肝动脉化疗栓塞术外+接受射频消融术,比较两组患者的临床疗效。肝动脉化疗栓塞联合射频消融治疗大肝癌的临床疗效优于单纯的肝动脉化疗栓塞术,且没有增加患者的不良反应。