CD151对人脐带来源间充质干细胞生物学特性的影响

 目的：探讨CD151对人脐带来源间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs）生物学性状的影响。方法：使用siRNA干扰hUC-MSCs 表面CD151,实验分为实验组（siRNA-CD151组）和对照组（siRNA-NC组）;流式细胞术检测干扰72 h后hUC-MSCs CD151及其它细胞表型,von Kossa和油红O染色检测体外成骨、成脂诱导分化情况;流式细胞术分析细胞周期变化;real-time PCR检测hUC-MSCs CD151、肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）、转化生长因子β1（transforming growth factor β1,TGF-β1）、环氧合酶2（cyclooxygenase 2,COX-2)和吲哚胺2,3-双加氧酶（indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO）mRNA的表达量;ELISA检测hUC-MSCs HGF分泌量。结果：(1) 流式细胞术检测发现干扰72 h hUC-MSCs实验组CD151（11.97±2.63 vs 95.66±1.56;P<0.01）和CD105（93.66±0.21 vs 83.37±0.71;P<0.05）较对照组显著降低;real-time PCR 检测hUC-MSCs CD151 mRNA变化和流式结果一致。(2)给予siRNA-CD151后能够减缓细胞周期进展,表现为细胞G1期增多,S期减少。(3)实验组hUC-MSCs HGF和TGF-β1表达量低于对照组（P<0.01）,而COX-2表达量升高（P<0.05）,IDO无明显改变;ELISA检测显示实验组hUC-MSCs HGF分泌量较对照组下降（P<0.01）。结论：体外干扰CD151后hUC-MSCs 仍保持干细胞表型,体外成脂诱导分化能力无明显变化,但成骨诱导分化能力、增殖能力和相关免疫调节因子表达发生改变。     

TNF-α增强人脐带间充质干细胞条件培养基的体外造血支持功能

 目的：研究肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor α, TNF-α）刺激后所得的脐带间充质干细胞条件培养基对脐血CD34+细胞在半固体培养基中集落形成个数及种类的影响。方法：将3~6代人脐带来源间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells, hUC-MSCs）以2×106接种到75cm2培养瓶中,其中刺激组加入TNF-α（10 g/L）,48 h后收集上清作为条件培养基。Real-time PCR检测hUC-MSCs中各类造血因子mRNA的表达量。密度梯度离心法分离脐血单个核细胞,磁珠分选CD34+细胞,流式细胞术检测细胞纯度后分5组接种到6孔板内：TNF-α刺激hUC-MSC上清+不完全甲基纤维素培养基;hUC-MSC上清+不完全甲基纤维素培养基;TNF-α+DMEM/F12完全培养基+不完全甲基纤维素培养基;完全甲基纤维素培养基;DMEM/F12完全培养基+不完全甲基纤维素培养基。10 d后显微镜下计数各类集落形成单位（colony-forming unit, CFU）的数目,收集集落形成细胞,流式细胞术检测其表型特征。结果：（1）TNF-α刺激后hUC-MSCs中粒细胞集落刺激因子（granulocyte colony-stimulating factor, G-CSF）和白细胞介素6（interleukin-6, IL-6）mRNA表达上调。（2）两种条件培养组均可见粒系CFU（granulocyte CFU, CFU-G）、巨噬系CFU（macrophage CFU, CFU-M）和粒巨噬系CFU（granulocyte-macrophage CFU, CFU-GM）,但TNF-α刺激组CFU-G和CFU-M的数目约为未刺激组的1.5倍,CFU-GM约为未刺激组的2倍;阳性对照组中除粒系、巨噬系集落外还可见红系集落;而DMEM/F12完全培养基加或不加TNF-α组10 d后均未见集落形成。（3）流式细胞术检测TNF-α刺激组与未刺激组集落细胞表型CD14、CD45和CD11b,未见明显差异。结论：hUC-MSC上清作为条件培养基可在体外促进CD34+细胞分化增殖为髓系细胞,具有造血支持作用,TNF-α刺激后此作用增强。     

经输血感染恶性疟原虫1例

本文报道了1例因急性淋巴细胞白血病输血后感染恶性疟原虫的病例。通过对该患者及相关供血者进行流行病学调查和实验室检测，发现传染源为1名非洲籍留学生。该供血者血样经快速诊断试纸条检测为阳性，其外周血涂片镜检及PCR检测结果均提示恶性疟原虫阳性。     

经输血感染恶性疟原虫1例

本文报道了1例因急性淋巴细胞白血病输血后感染恶性疟原虫的病例。通过对该患者及相关供血者进行流行病学调查和实验室检测，发现传染源为1名非洲籍留学生。该供血者血样经快速诊断试纸条检测为阳性，其外周血涂片镜检及PCR检测结果均提示恶性疟原虫阳性。     

细胞因子及C-反应蛋白与输血相关急性肺损伤的研究进展

输血相关急性肺损伤(TRALI)是指输注血液制品6 h内发生的急性呼吸窘迫综合征,是输血导致死亡的主要原因之一,且尚未有完善的特异性治疗及预防方案。到目前为止,TRALI的发病机制尚未完全清楚,普遍认为与"二次打击学说"及"阈值学说"有关。研究者们证实细胞因子及C-反应蛋白(CRP)与TRALI的发病机制有关,本文旨在概括几种细胞因子及CRP在TRALI发生发展机制中的作用,为国内临床研究者们在TRALI诊断、治疗和预防方面提供新的策略。     

人脐带间充质干细胞条件培养基体外支持造血的功能

本研究旨在探讨单纯人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)的条件培养基对脐血CD34+细胞体外造血支持作用。分离得到的hUC-MSC以2×106接种于75 cm2培养瓶中,48 h后收集培养上清作为条件培养液。用人脐血CD34阳性分选试剂盒分选CD34+细胞。将CD34+细胞接种在3个培养体系中:hUC-MSC条件培养液+不完全甲基纤维素培养基、完全甲基纤维素阳性培养基和含10%胎牛血清的DMEM/F12+不完全甲基纤维素作为阴性培养基。培养14d观察集落的形态特征,统计细胞数≥50的造血集落单位数。流式细胞术检测组成集落形成单位的细胞免疫表型。结果表明:hUC-MSC条件培养基中能够形成集落形成单位,且以粒系和粒-巨噬集落形成单位为主(CFU-G 47.67±0.58、CFU-GM 48.67±4.73、CFU-M 3.00±2.00),未观察到红细胞系相关的集落形成单位。阳性培养基中各种集落形成单位均可见,阴性培养体系中无集落形成单位。流式细胞术检测条件培养基组CD45+细胞比例为(97.43±2.15)%,显著高于阳性对照中CD45+细胞比例(39.69±0.96)%(P<0.05)。结论:在体外hUC-MSC条件培养基能够促进CD34+细胞的发育分化,单纯hUC-MSC条件培养基具有造血支持功能,并促进CD34+细胞向髓系分化,但不能促进向红细胞分化。